研究中的結(jié)核病診斷技術(shù)

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2007年世界防治結(jié)核病日

由于現(xiàn)有結(jié)核病細(xì)菌學(xué)診斷技術(shù)存在的技術(shù)缺陷，尋找簡(jiǎn)便、快速、實(shí)用的實(shí)驗(yàn)診斷方法是亟待解決的問題。多年來防治結(jié)核病工作者在細(xì)菌學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)等方面進(jìn)行了大量的、卓有成效的努力，在結(jié)核病的實(shí)驗(yàn)診斷中引入了多項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)并取得了一定的進(jìn)燕尾服。建立了一些新的技術(shù)和方法。

1．結(jié)核病的免疫學(xué)診斷技術(shù)：

近年來報(bào)道較多的主要有血清學(xué)診斷技術(shù)：這項(xiàng)技術(shù)起始于19世紀(jì)末，主要是檢測(cè)血清內(nèi)的抗結(jié)核抗菌素體。它是一種快速、簡(jiǎn)便的檢查技術(shù)，并且在多種疾病的診斷中得到廣泛的應(yīng)用。1976年Nassau首先將酶疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法應(yīng)用于結(jié)核病的免疫學(xué)診斷以后，由于這種方法具有與同位素檢測(cè)相似的靈敏度并避免了同位素的，放射性污染，國(guó)內(nèi)外一直沒有間斷這方面的研究，主要是檢測(cè)結(jié)核病人血清中的特異性抗體。陽性率在70%-90%，假陽性在4%-8%，這一方法的引入促進(jìn)了結(jié)核病免疫學(xué)診斷的進(jìn)展。存在的主要問題是結(jié)核菌的抗原性較弱且屬間和種間共同抗原決定簇的存在及體液免疫與結(jié)核病的相關(guān)性未得到充分的闡明，致使ELISA這一血清學(xué)診斷技術(shù)難以取得實(shí)質(zhì)性的進(jìn)展。

2．結(jié)核病的分子生物學(xué)診斷技術(shù)：

20世紀(jì)90年代以來，隨著分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域取得的飛速發(fā)展，研究者也將分子生物學(xué)的原理引入了結(jié)核病實(shí)驗(yàn)研究范圍。聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）是一種以核酸生物化學(xué)為基礎(chǔ)的分子生物學(xué)診斷技術(shù)，是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域內(nèi)最有價(jià)值的研究手段之一。自1989年引入結(jié)核病的診斷以來，立即成為結(jié)核病細(xì)菌學(xué)診斷領(lǐng)域中備受關(guān)注的焦點(diǎn)。經(jīng)過世界秘書網(wǎng)版權(quán)所有,數(shù)年的努力積累了大量的資料和經(jīng)驗(yàn)，使這一方法不斷完善，其反應(yīng)靈敏、特異、快速的特性在多數(shù)報(bào)告中得到肯定。PCR的技術(shù)操作并不復(fù)雜，但是要求很高的技術(shù)質(zhì)量。因擴(kuò)增氣溶膠污染而導(dǎo)致的假陽性和因標(biāo)本中抑制物質(zhì)存在而導(dǎo)致的假陰性和試劑盒缺乏規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化是影響PCR結(jié)果可信性的關(guān)鍵。為此研究人員正在不斷開發(fā)出新的高敏度和高特異性的PCR方法，如逆轉(zhuǎn)錄PCR法、巢式PCR法、單管巢式逆轉(zhuǎn)錄PCR法、實(shí)時(shí)熒光PCRE、酶聯(lián)PCR等，在一定程度上提高了PCR方法的敏感性和特異性。研究者們還將分子生物學(xué)的原理應(yīng)用于結(jié)核菌的耐藥性測(cè)定及核酸指紋分析，在耐藥基因的檢測(cè)和分子流行病學(xué)方面，取得了重大的進(jìn)展世界秘書網(wǎng)版權(quán)所有,。