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      水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌的處理

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      水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌的處理范文第1篇

      益生菌不僅可以?xún)艋|(zhì),還能促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng),提高水產(chǎn)動(dòng)物的免疫力和抗病力等。目前,應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的益生菌主要有光合細(xì)菌、噬菌蛭弧菌、乳酸桿菌、芽孢桿菌、雙歧桿菌、酵母菌、硝化細(xì)菌和乳桿菌等。

      1.1光合細(xì)菌

      光合細(xì)菌(Photosyntheticbacteria,PSB)是利用光能和CO2維持自養(yǎng)生活的有色細(xì)菌,主要是水生細(xì)菌,革蘭氏陰性,含有菌葉綠素和類(lèi)胡蘿卜素;在厭氧光照或好氧黑暗的條件下進(jìn)行光合作用,但不產(chǎn)生O2;光合細(xì)菌包括3科18屬的細(xì)菌。光合細(xì)菌所含營(yíng)養(yǎng)豐富,還有CoQ、維生素B、葉酸等,可以提高水生動(dòng)物的免疫力,促進(jìn)生長(zhǎng)并且改善水質(zhì)。沈錦玉等將光合細(xì)菌添加于飼料并潑灑到養(yǎng)殖水體中,改善了水質(zhì),并使鯽魚(yú)、羅非魚(yú)血清中溶菌酶活性明顯高于對(duì)照組,大田試驗(yàn)也取得了較好的效果,降低了發(fā)病率,也提高了產(chǎn)量。劉慧玲等向養(yǎng)殖羅非魚(yú)苗的養(yǎng)殖水體中投入密度為4.5×104cfu/ml的光合細(xì)菌時(shí),魚(yú)組織中的過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶、溶菌酶和抗菌活力均顯著高于對(duì)照組,存活率也提高了6.67%。王有基等發(fā)現(xiàn)光合細(xì)菌制劑可以提高鯉魚(yú)白細(xì)胞的吞噬活性,增強(qiáng)血清溶菌酶活力。

      1.2芽孢桿菌

      芽孢桿菌(Bacillus)是一類(lèi)能形成芽孢(內(nèi)生孢子)的異養(yǎng)型細(xì)菌,革蘭氏陽(yáng)性,具有生長(zhǎng)速率快、溶解氧要求濃度低、能忍受酸性的環(huán)境優(yōu)點(diǎn);可促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收,提高其消化機(jī)能,減少氨氮、亞硝酸鹽和H2S等有毒有害物質(zhì),降解水體中的有機(jī)碎屑,優(yōu)化養(yǎng)殖環(huán)境,促進(jìn)水環(huán)境生態(tài)良性循環(huán)等功效,我國(guó)規(guī)定可以添加在飼料中的芽孢桿菌為地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌。丁麗等發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌對(duì)異育銀鯽免疫器官指數(shù)和溶菌酶的影響最大;謝佳磊等在飼料中添加枯草芽孢桿菌發(fā)現(xiàn)對(duì)克氏原螯蝦的免疫機(jī)能有促進(jìn)作用,其酚氧化酶活力明顯增加;沈文英等發(fā)現(xiàn)在基礎(chǔ)飼料中添加1×105CFU/g枯草芽孢桿菌后,草魚(yú)血清重點(diǎn)免疫球蛋白M,補(bǔ)體C3含量和堿性磷酸酶(AKP)活性顯著升高,而髓過(guò)氧化物酶(MPO)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性顯著降低,可以提高草魚(yú)的免疫力和抗氧化功能。李衛(wèi)芬等報(bào)道在飼料中添加芽孢桿菌可以改善提高草魚(yú)機(jī)體免疫力和抗氧化功能。Aly等發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌可以抑制熒光假單胞菌(Pseudo-monasfluorescens)的生長(zhǎng),而此類(lèi)菌會(huì)導(dǎo)致魚(yú)類(lèi)內(nèi)臟敗血性壞死從而造成死亡。張賽樂(lè)等研究發(fā)現(xiàn)黃姑魚(yú)投喂伴有枯草芽孢桿菌的飼料后能有效提高黃姑魚(yú)白細(xì)胞吞噬活性。Vaseeharan等研究發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌可以提高斑節(jié)對(duì)蝦的免疫力從而對(duì)哈維氏弧菌有較好抗病能力,使其在感染后死亡率減少90%。Bandyopadhyay等報(bào)道從卡特拉鲃腸道中分離出來(lái)的BacilluscirculansPB7,可以提高卡特拉鲃的免疫力及其對(duì)嗜水氣單胞菌的抗病能力。

      1.3噬菌蛭弧菌

      噬菌蛭弧菌(Bdellovibriobacteriovorus)是一類(lèi)專(zhuān)門(mén)以捕食細(xì)菌為生的寄生性細(xì)菌,具有寄生和裂解細(xì)菌的生物學(xué)特性,可以將致病菌限制在較低水平上,其對(duì)嗜水氣單胞菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、溶藻弧菌、哈維氏弧菌、大腸桿菌、熒光假單胞菌和愛(ài)德華氏菌等革蘭氏陰性菌均有較好的裂解作用;同時(shí),還可以有效控制養(yǎng)殖水體的化學(xué)需氧量、硫化物和氨氮存留量。徐琴等以1%的比例在中國(guó)對(duì)蝦基礎(chǔ)飼料中添加噬菌蛭弧菌,發(fā)現(xiàn)它能促進(jìn)對(duì)蝦生長(zhǎng),提高免疫因子活性。梁思成等發(fā)現(xiàn)在飼料中添加蛭弧菌具有改善銀鯽腸道菌群和提高免疫相關(guān)酶活性的作用;張梁等發(fā)現(xiàn)用添加蛭弧菌的飼料喂養(yǎng)草魚(yú),草魚(yú)的脾臟和胸腺的免疫器官指數(shù)逐漸升高,血液中的NBT陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量逐漸增加,血清抗菌活性與溶菌酶活性逐漸升高,用溫和氣單胞菌疫苗免疫后,草魚(yú)的免疫應(yīng)答水平明顯提高。鄧時(shí)銘等發(fā)現(xiàn)飼料中添加蛭弧菌微生態(tài)制劑,能對(duì)機(jī)體的免疫器官和免疫細(xì)胞產(chǎn)生影響,能調(diào)節(jié)機(jī)體的非特異性免疫功能。韓宇翔等研究發(fā)現(xiàn)噬菌蛭弧菌能夠顯著提高鱘魚(yú)的血清溶菌酶、堿性磷酸酶和過(guò)氧化物酶等免疫相關(guān)酶活性。

      1.4酵母菌

      酵母菌是單細(xì)胞真菌,是兼性厭氧菌,在有氧條件下可將糖類(lèi)分解為CO2和水,無(wú)氧條件下產(chǎn)生CO2和乙醇。丁麗等研究表明酵母菌對(duì)異育銀鯽血清SOD水平的影響較大。Andlid等從虹鱒胃腸道分離的漢遜德巴利酵母(HF1)體外可抑制魚(yú)病原菌殺鮭氣單胞菌和鰻弧菌;徐琴等分別以1%的比例在中國(guó)對(duì)蝦基礎(chǔ)飼料中添加粘紅酵母,發(fā)現(xiàn)其能促進(jìn)對(duì)蝦的生長(zhǎng),提高免疫因子活性。陳秋紅等研究表明酵母菌可中和腸道中毒素,直接與腸道病原體結(jié)合,有效抑制腸道病原體的繁殖,改善腸道微生態(tài)環(huán)境,從而增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力及抗病能力。

      1.5硝化細(xì)菌

      硝化細(xì)菌是將水中的氨轉(zhuǎn)化為亞硝酸和硝酸的一類(lèi)細(xì)菌,包括亞硝化菌和硝化菌,是好氧自養(yǎng)型細(xì)菌,革蘭氏陰性;氨氮和亞硝氮是影響水質(zhì)的重要指標(biāo),一旦超標(biāo)將會(huì)引起水產(chǎn)動(dòng)物病害的發(fā)生,而硝化細(xì)菌可以將其轉(zhuǎn)化為硝酸鹽,被機(jī)體吸收與利用。李長(zhǎng)玲等研究發(fā)現(xiàn)硝化細(xì)菌可顯著改善羅非魚(yú)苗培育環(huán)境的水質(zhì),增強(qiáng)魚(yú)的抗病能力,當(dāng)硝化細(xì)菌濃度為100cfu/L時(shí),幼魚(yú)的堿性磷酸酶活力、溶菌酶活力以及超氧化物歧化酶活力都有明顯提高。

      1.6雙歧桿菌

      雙歧桿菌(Bifidobacterium)是一類(lèi)外觀變化很多的厭氧型放線菌,革蘭氏陽(yáng)性,能有效發(fā)酵糖類(lèi)產(chǎn)生乳酸和乙酸,存在于腸道中;其中,能用于制備微生態(tài)制劑的雙歧桿菌主要有兩歧雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、短雙歧桿菌和長(zhǎng)雙歧桿菌。桂遠(yuǎn)明等利用雙歧桿菌制劑來(lái)抑制革蘭氏陰性菌,減少腸桿菌細(xì)胞壁內(nèi)毒素進(jìn)入魚(yú)體,從而保護(hù)肝臟對(duì)鯉爆發(fā)性肝炎有一定的治療效果。鄒向陽(yáng)利用雙歧桿菌作為飼料添加劑,可以提高中國(guó)對(duì)蝦幼體的免疫力,促進(jìn)提前變態(tài),減少死亡率。

      1.7乳桿菌

      乳桿菌(Lactobacillus)是一種不產(chǎn)生芽孢的革蘭氏陽(yáng)性菌,主要代謝產(chǎn)物是乳酸。王富強(qiáng)等在牙鲆腸道內(nèi)定植和投喂乳桿菌后發(fā)現(xiàn)牙鲆消化道內(nèi)弧菌的數(shù)量明顯下降。許褆森發(fā)現(xiàn)戊糖乳桿菌R1作為益生菌作為飼料添加劑可以取代抗生素應(yīng)用在草魚(yú)養(yǎng)殖中。吳桂玲等研究在飼料中添加乳酸菌、芽孢桿菌和節(jié)桿菌等9株菌,發(fā)現(xiàn)花鱸的巨噬細(xì)胞殺菌力顯著高于對(duì)照組,頭腎巨噬細(xì)胞數(shù)量顯著高于對(duì)照組,且對(duì)鰻弧菌有抗病力。鄺哲師等研究表明乳酸菌可以刺激吞噬細(xì)胞的吞噬功能,促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖,提高細(xì)胞因子水平,增加NK細(xì)胞的活性和免疫球蛋白水平,從而達(dá)到免疫監(jiān)視和提供系統(tǒng)免疫功能。SON等現(xiàn)乳酸菌不僅提高點(diǎn)帶石斑魚(yú)的生產(chǎn)性能,還能夠強(qiáng)化免疫系統(tǒng),增強(qiáng)對(duì)鏈球菌和彩虹病毒的耐受能力。Aly等研究表明乳酸菌可以提高尼羅羅非魚(yú)的嗜中性粒白細(xì)胞的粘著性和溶菌酶活性,同時(shí)對(duì)熒光假單胞菌和鏈球菌有較好的抵抗力。

      2水產(chǎn)用益生元對(duì)提高水產(chǎn)動(dòng)物免疫機(jī)能的作用

      益生元是指由一些益生菌代謝所產(chǎn)生的并且可引起腸道內(nèi)相關(guān)菌群變化的一類(lèi)不可消化的物質(zhì),在水產(chǎn)中主要作為免疫增強(qiáng)劑使用。

      2.1寡糖

      寡糖又稱(chēng)為低聚糖,可改善機(jī)體消化道內(nèi)的微生態(tài)環(huán)境,促進(jìn)益生菌的增殖;此類(lèi)寡糖包括半乳糖寡糖、果寡糖、甘露寡糖等。劉愛(ài)君等報(bào)道在飼料中添加0.50%~0.75%的甘露寡糖可以顯著提高羅非魚(yú)的生長(zhǎng)性能,改善腸道結(jié)構(gòu)功能,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和機(jī)體非特異性免疫功能。徐磊等發(fā)現(xiàn)在飼料中添加240和480mg/kg的甘露寡糖能提高異育銀鯽的免疫能力,增強(qiáng)魚(yú)體抗病原菌(嗜水氣單胞菌)的能力。劉含亮等在飼料中添加殼寡糖對(duì)虹鱒生長(zhǎng)性能、白細(xì)胞吞噬百分率、吞噬指數(shù)、血清殺菌百分率以及血清、肝臟和鰓中溶菌酶活性有顯著影響。徐后國(guó)等報(bào)道在飼料中添加0.3%~0.6%的殼寡糖可以在一定程度上影響大黃魚(yú)幼魚(yú)的非特異性免疫能力。譚崇桂等在飼料中添加0.2%的β-葡聚糖、0.4%甘露寡糖、175mg/kg蛋白酶PT可提高凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能,改善消化酶活性,葡聚糖和甘露寡糖還具有改善血清非特異性免疫的功能。

      2.2多糖

      微生物非抗生素活性物質(zhì)主要有脂多糖、肽聚糖、葡聚糖和真菌多糖等,是一種具有免疫促進(jìn)效果的高分子聚合碳水化合物,具有促進(jìn)機(jī)體免疫功能、增強(qiáng)機(jī)體抗病能力與應(yīng)激能力等功能;在飼料中添加多糖的水產(chǎn)動(dòng)物,其血漿蛋白和噬菌細(xì)胞活動(dòng)的改變,產(chǎn)生急性期蛋白和激活巨噬細(xì)胞;而巨噬細(xì)胞表面有多糖的受體,巨噬細(xì)胞對(duì)于提高殺菌能力起關(guān)鍵作用,而且能夠產(chǎn)生影響免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞的一系列的血漿移動(dòng)因子。朱斐等研究表明葡聚糖可提高克氏原螯蝦超氧化歧化酶活性,從而降低其感染W(wǎng)SSV,對(duì)克氏原螯蝦有免疫保護(hù)作用。Itami等在飼料中添加肽聚糖后投喂日本囊對(duì)蝦,并對(duì)其進(jìn)行WSSV攻毒,試驗(yàn)組的成活率比對(duì)照組高60%~70%。張璐等發(fā)現(xiàn)在飼料中添加500mg/kg肽聚糖顯著提高了鱸魚(yú)的白細(xì)胞吞噬指數(shù)、血清LSZ活力和替代途徑的補(bǔ)體活力,并且對(duì)哈維氏弧菌的抵抗力也顯著增強(qiáng)。陳昌福等證實(shí)酵母細(xì)胞壁多糖對(duì)南美白對(duì)蝦的免疫系統(tǒng)和免疫相關(guān)酶有激活作用。Solem認(rèn)為脂多糖可促進(jìn)大西洋鮭(Atlanticsalmon)巨噬細(xì)胞的分裂,從而提高機(jī)體的抗感染能力。許第新等報(bào)道酵母細(xì)胞壁中的多糖可以提高克氏原螯蝦肝胰腺中的酸性磷酸酶(ACP)和堿性磷酸酶(ALP),對(duì)血清和肌肉中的ACP和ALP沒(méi)有明顯作用。李桂峰等研究表明添加0.5%和0.8%酵母多糖的飼料能顯著提高赤眼鱒的超氧化歧化酶活性、溶菌酶活性、補(bǔ)體C3水平、白細(xì)胞吞噬活性、紅細(xì)胞的免疫功能。Sung等采用β-葡聚糖溶液浸泡斑節(jié)對(duì)蝦,不僅提高了酚氧化酶活性和溶菌酶活性,而且也增強(qiáng)了對(duì)創(chuàng)傷弧菌的抵抗力。李紅權(quán)等從赤芝液體發(fā)酵菌絲體中提取真菌多糖,在日本沼蝦餌料中添加不同濃度的真菌多糖,可以提高沼蝦血細(xì)胞的溶菌活力、抗菌活力、抗毒和能力。

      3水產(chǎn)用合生素對(duì)提高水產(chǎn)動(dòng)物免疫機(jī)能的作用

      合生素又稱(chēng)合生元,是益生菌與益生元結(jié)合使用的生物制劑,兼具益生菌和益生元的雙重作用,通過(guò)促進(jìn)外源性活菌在動(dòng)物腸道中的定植,選擇性刺激一種或幾種生長(zhǎng)和繁殖,從而提高宿主的免疫機(jī)能。肖世玖等在團(tuán)頭魴基礎(chǔ)飼料中添加合生素顯著提高了團(tuán)頭魴血清抗氧化能力,降低了腸道中的大腸桿菌數(shù)量,促進(jìn)芽孢桿菌的增殖;溫俊等試驗(yàn)表明飼料中添加合適比例的合生素能起到提高南美白對(duì)蝦免疫機(jī)能和調(diào)節(jié)腸道菌群的功效。

      4微生態(tài)制劑在改善水產(chǎn)動(dòng)物免疫力中的作用

      微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中用于調(diào)節(jié)改善水質(zhì),降低水體中NH+4-N、NO-2-N、H2S等對(duì)水生生物的毒害作用,穩(wěn)定水體pH;抑制水體中的病原菌的生長(zhǎng);刺激免疫系統(tǒng),增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物的免疫力;提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育,減少病害發(fā)生;提高水產(chǎn)動(dòng)物的飼料利用率等。在增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物免疫力方面的研究大致集中在微生態(tài)制劑刺激水產(chǎn)動(dòng)物非特異性免疫系統(tǒng),導(dǎo)致非特異性免疫相關(guān)酶活性的提高,從而能夠抵抗病原體。因此,微生態(tài)制劑在改善水產(chǎn)動(dòng)物免疫力方面上還應(yīng)從以下方面進(jìn)行研究:①對(duì)試驗(yàn)條件進(jìn)行控制,保證研究結(jié)果的準(zhǔn)確性,并從免疫相關(guān)因子的變化、個(gè)體抗病能力等進(jìn)行系統(tǒng)、深入研究,以為微生態(tài)制劑的使用提供指導(dǎo);由于微生態(tài)制劑屬于生物制劑,受環(huán)境條件的影響較大;而在實(shí)際養(yǎng)殖生產(chǎn)中,水質(zhì)條件復(fù)雜,使用哪種微生態(tài)制劑需要依靠科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑囼?yàn)基礎(chǔ)。②在菌株的篩選上應(yīng)篩選適應(yīng)性強(qiáng)、效果好、便于保存的菌種,加強(qiáng)水產(chǎn)用微生態(tài)制劑的研究,利用適合水環(huán)境的微生態(tài)制劑;在畜牧業(yè)上篩選出的一些菌株經(jīng)過(guò)多年生產(chǎn)實(shí)踐,取得較好的效果,但水體環(huán)境與陸地環(huán)境差異顯著;對(duì)于在畜牧業(yè)上的菌株,不能直接在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中推廣,應(yīng)當(dāng)篩選出適合水體環(huán)境并能提高水產(chǎn)動(dòng)物免疫力的優(yōu)質(zhì)菌株。③對(duì)微生態(tài)制劑的研究應(yīng)從其作用機(jī)理方面深入研究,以對(duì)應(yīng)不同情況使用不同制劑,從而達(dá)到高效利用的目的;目前,對(duì)于微生態(tài)制劑作用機(jī)理仍處于宏觀水平,應(yīng)當(dāng)開(kāi)展更多微觀水平的作用機(jī)理研究,使微生態(tài)制劑最高效地提高水產(chǎn)動(dòng)物免疫力。④在微生態(tài)制劑的保存與運(yùn)輸過(guò)程中運(yùn)用充氮、真空冷凍干燥等技術(shù)進(jìn)行處理,以延長(zhǎng)微生態(tài)制劑的保質(zhì)期;微生態(tài)制劑作為生物制劑,在運(yùn)輸和保存方面要求嚴(yán)格,通過(guò)試驗(yàn)研究出微生態(tài)制劑最高效的保存和運(yùn)輸方式。然而,在微生態(tài)制劑的研發(fā)和使用方面也存在以下問(wèn)題:①微生態(tài)制劑的研究?jī)H在個(gè)體水平內(nèi)進(jìn)行,因環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)等對(duì)試驗(yàn)結(jié)果造成的影響不可忽略,因此相關(guān)研究還需具體化與系統(tǒng)化;②目前所使用的微生態(tài)制劑菌株種類(lèi)較少,還需要對(duì)適用于水體環(huán)境及水生生物的菌種進(jìn)行開(kāi)發(fā);③缺少安全性方面的驗(yàn)證,在水產(chǎn)上使用的微生態(tài)制劑應(yīng)用使用時(shí)間短且效仿陸生動(dòng)物,不一定對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物有效果,另外基因工程菌株應(yīng)用在水產(chǎn)養(yǎng)殖中潛在威脅和安全性問(wèn)題也缺少驗(yàn)證;④微生態(tài)制劑產(chǎn)品加工、保存、運(yùn)輸和使用上不能保證有效活菌數(shù),因此其使用效果也不能保證;⑤微生態(tài)制劑作為一種新型水質(zhì)條件未納入相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),市場(chǎng)魚(yú)龍混雜,產(chǎn)品質(zhì)量得不到根本保證;⑥對(duì)微生態(tài)制劑的使用最佳條件研究尚不確定,針對(duì)性差,引起養(yǎng)殖戶(hù)在一些情況下盲目使用從而造成浪費(fèi)。

      5結(jié)語(yǔ)

      水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌的處理范文第2篇

      關(guān)鍵詞:水產(chǎn)養(yǎng)殖;廢水處理;生物技術(shù);特點(diǎn);應(yīng)用

      近年來(lái),在全球動(dòng)物性食品生產(chǎn)中我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)具有較快的增長(zhǎng)速度如2012年我國(guó)水產(chǎn)品產(chǎn)量5906萬(wàn)噸,同比增長(zhǎng)5.4%,其中養(yǎng)殖量4305萬(wàn)噸,同比增長(zhǎng)7.0%,捕撈量1601萬(wàn)噸,同比增長(zhǎng)1.3%。但是,由于養(yǎng)殖過(guò)程中存在大量餌料投入、大量用藥和大量換水等一系列問(wèn)題,使得養(yǎng)殖水環(huán)境污染日益嚴(yán)重,養(yǎng)殖環(huán)境惡化引起病害頻繁發(fā)生,養(yǎng)殖產(chǎn)品質(zhì)量下降。水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水治理技術(shù)與普通污水處理相比,具有污染物種類(lèi)少、含量變化小、生化過(guò)程耗氧量低等特點(diǎn),為此,可選用生物凈化技術(shù)進(jìn)行水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水處理。該技術(shù)的應(yīng)用,可有效滿足排放標(biāo)準(zhǔn)及循環(huán)利用節(jié)約水資源、改善水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境的要求。

      一、水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水的特點(diǎn)

      水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水中主要的污染物有氨氮、亞硝酸鹽、有機(jī)污染物、磷及污損生物。目前,我國(guó)已開(kāi)展了一些港灣及傳統(tǒng)網(wǎng)箱養(yǎng)殖區(qū)的污損生物調(diào)查研究。與工業(yè)、生活污水不同,水產(chǎn)魚(yú)污水屬污染物成分簡(jiǎn)單的低濃度有機(jī)污水,BOD一般不超過(guò)80mg/L。但水產(chǎn)生物對(duì)水質(zhì)的要求較高,氨氮和硫化氫是育苗水體中最普遍的有害物質(zhì),水體中的氨氮和硫化氫濃度會(huì)隨著育苗的進(jìn)行而逐漸升高。氨氮是水產(chǎn)生物的排泄物,也是殘餌、糞便以及動(dòng)植物尸體等含氮有機(jī)物分解的終產(chǎn)物。硫化氫則是由于含硫有機(jī)物在缺氧條件下,由厭氧細(xì)菌分解形成。水質(zhì)和底質(zhì)敗壞而誘發(fā)弧菌等致病菌的大量繁殖,導(dǎo)致疾病發(fā)生;更多的是由于生態(tài)系統(tǒng)的破壞和放養(yǎng)密度的增加而導(dǎo)致生態(tài)失衡的綜合因素所致,水生物的抗病力降低,造成更易感染致病菌。

      二、水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水生物凈化技術(shù)的應(yīng)用

      我國(guó)是世界第一水產(chǎn)養(yǎng)殖大國(guó),水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量長(zhǎng)期處于世界首位。但現(xiàn)階段中國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖,尤其是精養(yǎng)技術(shù)模式下水質(zhì)污染嚴(yán)重,并對(duì)水產(chǎn)品質(zhì)量和周?chē)h(huán)境造成潛在威脅。為此,可選用生物技術(shù)對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水加以處理,其具體應(yīng)用方式如下所述:

      1、生物膜法

      生物膜法具有高效、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)。生物膜的載體不同,附著在載體上的微生物的生長(zhǎng)量不同,對(duì)養(yǎng)殖廢水的處理效果也不同。目前多采用紫外線殺菌器、臭氧發(fā)生器、蛋白質(zhì)分離器和生物過(guò)濾器4部分構(gòu)成養(yǎng)殖污水生物膜處理工藝系統(tǒng)(如圖1)。

      圖1 水產(chǎn)養(yǎng)殖污水生物膜法處理系統(tǒng)工藝流程

      常用的生物過(guò)濾器有浸沒(méi)式生物濾床、滴濾式生物濾床、生物轉(zhuǎn)盤(pán)等。但生物膜法存在抗沖擊力弱、易受污染、不能多次循環(huán)利用、運(yùn)行時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn),尚不能廣泛的應(yīng)用于處理養(yǎng)殖污水。因此一些研究者在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)研究。如萬(wàn)紅等提出采用以組合填料為載體的序批式生物膜反應(yīng)器處理水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水;李軍等也設(shè)計(jì)出復(fù)合式膜生物反應(yīng)器(MBR)裝置,以粉末活性炭(PAC)作為填料,加入活性污泥經(jīng)過(guò)馴化培養(yǎng),用該裝置處理污水,連續(xù)運(yùn)行100d,膜出水COD始終穩(wěn)定在25mg/L以下,NH3-N的去除率可以達(dá)到99%以上。PAC為硝化細(xì)菌的吸附生長(zhǎng)提供了良好的載體,使其能夠很好地繁殖,從而提高了膜生物反應(yīng)器的氨氮去除率;何潔等把篩選到的菌群附著在沙子、活性炭與沸石3種載體上,對(duì)養(yǎng)殖廢水進(jìn)行處理,研究表明以這3種載體的生物過(guò)濾器對(duì)養(yǎng)殖廢水的氨氮去除率差不多。

      2、活性污泥法

      活性污泥法是以活性污泥為主體的廢水生物處理的主要方法。活性污泥法是向廢水中連續(xù)通入空氣,經(jīng)一定時(shí)間后因好氧性微生物繁殖而形成的污泥狀絮凝物。其上棲息著以菌膠團(tuán)為主的微生物群,具有很強(qiáng)的吸附與氧化有機(jī)物的能力。典型的活性污泥法是由曝氣池、沉淀池、污泥回流系統(tǒng)和剩余污泥排除系統(tǒng)組成。污水和回流的活性污泥一起進(jìn)入曝氣池形成混合液。從空氣壓縮機(jī)站送來(lái)的壓縮空氣,通過(guò)鋪設(shè)在曝氣池底部的空氣擴(kuò)散裝置,以細(xì)小氣泡的形式進(jìn)入污水中,目的是增加污水中的溶解氧含量,還使混合液處于劇烈攪動(dòng)的狀態(tài),形懸浮狀態(tài)。溶解氧、活性污泥與污水互相混合、充分接觸,使活性污泥反應(yīng)得以正常進(jìn)行。

      第一階段,污水中的有機(jī)污染物被活性污泥顆粒吸附在菌膠團(tuán)的表面上,這是由于其巨大的比表面積和多糖類(lèi)黏性物質(zhì)。同時(shí)一些大分子有機(jī)物在細(xì)菌胞外酶作用下分解為小分子有機(jī)物。

      第二階段,微生物在氧氣充足的條件下,吸收這些有機(jī)物,并氧化分解,形成二氧化碳和水,一部分供給自身的增殖繁衍。活性污泥反應(yīng)進(jìn)行的結(jié)果,污水中有機(jī)污染物得到降解而去除,活性污泥本身得以繁衍增長(zhǎng),污水則得以?xún)艋幚怼?/p>

      經(jīng)過(guò)活性污泥凈化作用后的混合液進(jìn)入二次沉淀池,混合液中懸浮的活性污泥和其他固體物質(zhì)在這里沉淀下來(lái)與水分離,澄清后的污水作為處理水排出系統(tǒng)。經(jīng)過(guò)沉淀濃縮的污泥從沉淀池底部排出,其中大部分作為接種污泥回流至曝氣池,以保證曝氣池內(nèi)的懸浮固體濃度和微生物濃度;增殖的微生物從系統(tǒng)中排出,稱(chēng)為“剩余污泥”。事實(shí)上,污染物很大程度上從污水中轉(zhuǎn)移到了這些剩余污泥中。

      三、結(jié)束語(yǔ)

      綜上所述,隨著世界性水資源短缺和環(huán)境污染的日趨嚴(yán)重,今后各國(guó)將采用封閉式循環(huán)水養(yǎng)殖方式。其中,養(yǎng)殖廢水的綜合利用與無(wú)害化排放技術(shù)具有極大的研究開(kāi)發(fā)價(jià)值和廣泛的應(yīng)用前景。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步,水產(chǎn)養(yǎng)殖也將由單一型向生態(tài)型發(fā)展,要求在最大限度提升水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)產(chǎn)量的同時(shí),起到凈化水質(zhì)的作用,并形成生態(tài)系統(tǒng)的良性循環(huán)。

      參考文獻(xiàn)

      [1] 江云. 水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水生物凈化技術(shù)研究[D]. 揚(yáng)州大學(xué) 2013

      [2] 傅雪軍,馬紹賽,曲克明,周勇,徐勇. 循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)生物掛膜的消氨效果及影響因素分析[J]. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2010(01)

      水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌的處理范文第3篇

      群體感應(yīng)的類(lèi)型根據(jù)自誘導(dǎo)物的不同,細(xì)菌的群體感應(yīng)信號(hào)系統(tǒng)大體可分為三類(lèi):一是由N-酰化高絲氨酸內(nèi)酯(N-acyl-homoserinelactones,AHLs)類(lèi)物質(zhì)調(diào)節(jié)的群體感應(yīng)系統(tǒng),這種調(diào)節(jié)機(jī)制主要存在于革蘭氏陰性菌中。當(dāng)細(xì)菌分泌的自誘導(dǎo)物濃度達(dá)到一定臨界值后,就可與LuxR蛋白相結(jié)合來(lái)激活目的基因,調(diào)控生理行為;二是在革蘭氏陽(yáng)性菌中存在的以翻譯修飾的寡肽作為信號(hào)分子的群體感應(yīng)系統(tǒng)。在這種系統(tǒng)中,細(xì)菌通過(guò)調(diào)節(jié)寡肽類(lèi)物質(zhì)感應(yīng)周?chē)h(huán)境的變化。目前已在枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、肺炎球菌(Pneumococcus)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)等革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)了這種調(diào)節(jié)機(jī)制,而且現(xiàn)有的研究表明沒(méi)有產(chǎn)生AHLs類(lèi)信號(hào)分子的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌;三是以費(fèi)氏弧菌(Vibriofischeri)為代表的由luxL酶催化的AI-1系統(tǒng)和luxI酶催化的AI-2系統(tǒng)[7-9]。

      AHLs類(lèi)信號(hào)分子的檢測(cè)方法隨著對(duì)細(xì)菌群體感應(yīng)系統(tǒng)研究的深入,研究者希望可以通過(guò)人為干擾對(duì)其進(jìn)行調(diào)控,以達(dá)到有益于人類(lèi)的目的。目前,對(duì)革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的AHLs類(lèi)信號(hào)分子已建立了一套比較完整的檢測(cè)體系,Paul等和Lars等[10-11]都對(duì)AHLs類(lèi)信號(hào)分子的特性和檢測(cè)方法進(jìn)行了比較詳細(xì)的闡述。主要的檢測(cè)方法可以歸結(jié)為以下三類(lèi):(1)物理方法:主要是利用高效液相色譜-質(zhì)譜法(HPLC-MS)和氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)檢測(cè)目標(biāo)菌種,該法不僅簡(jiǎn)單高效,而且能在沒(méi)有標(biāo)樣的情況下定性檢測(cè)AHLs類(lèi)信號(hào)分子[12];(2)生物方法:主要是利用報(bào)告菌是否產(chǎn)生顏色反應(yīng)來(lái)檢測(cè)AHLs類(lèi)物質(zhì)是否存在,目前使用最廣泛的是C.violaceum和A.tumefaciens兩種細(xì)菌生物感應(yīng)器,它們對(duì)不同長(zhǎng)度的酰基側(cè)鏈和不同取代基的AHL分子具有不同程度的敏感性[13];(3)薄層層析法:通過(guò)與標(biāo)樣進(jìn)行對(duì)比可知道檢測(cè)物中是否含有AHLs類(lèi)信號(hào)分子。根據(jù)目前對(duì)群體感應(yīng)系統(tǒng)的認(rèn)識(shí)和研究,不僅可以建立起細(xì)菌之間化學(xué)信號(hào)物質(zhì)與生理行為的聯(lián)系,還可以通過(guò)人為手段阻斷或促進(jìn)細(xì)菌的群體感應(yīng)系統(tǒng),從而調(diào)控其某種特定功能,以實(shí)現(xiàn)其在實(shí)際應(yīng)用上的價(jià)值。

      群體感應(yīng)系統(tǒng)在其他領(lǐng)域的應(yīng)用大多數(shù)微生物使用群體感應(yīng)系統(tǒng)來(lái)調(diào)控毒性因子的表達(dá)和生物膜的形成,這一發(fā)現(xiàn)使群體感應(yīng)成為了抗菌研究的一個(gè)備受關(guān)注的新手段。Singh等[14]認(rèn)為銅綠假單胞桿菌的群體感應(yīng)信號(hào)分子與肺部囊胞性纖維癥的感染有直接關(guān)系。張曉兵等[15]認(rèn)為利用群體感應(yīng)與致病菌存在一定的關(guān)系,可以把致病菌群體感應(yīng)系統(tǒng)的檢測(cè)作為臨床細(xì)菌感染診斷的潛在生物標(biāo)志物,另外對(duì)群體感應(yīng)的抑制還可作為臨床治療的一種手段。而在食品領(lǐng)域,由于微生物是導(dǎo)致食品腐敗的主要原因,所以利用群體感應(yīng)系統(tǒng)對(duì)食源性細(xì)菌進(jìn)行調(diào)控,在防止食品腐敗、抑制腐敗菌生長(zhǎng)等方面有重要意義。Whitehead等[16]認(rèn)為許多食品腐敗有關(guān)的特性如果膠水解酶、蛋白水解酶、脂肪水解酶活性及生物膜形成等都是由AHLs調(diào)控的。Gram等[17-18]在真空包裝的牛肉、禽類(lèi)產(chǎn)品中也檢測(cè)到AHLs的濃度與腸桿菌數(shù)量的特定關(guān)系。此外,他們還發(fā)現(xiàn)把產(chǎn)生AHLs并且能水解果膠的胡蘿卜軟腐病菌添加到豆芽中,能加速豆芽的腐敗。

      盡管研究發(fā)現(xiàn)多數(shù)細(xì)菌具有群體感應(yīng)系統(tǒng),并且群體感應(yīng)系統(tǒng)能對(duì)細(xì)菌的生理行為產(chǎn)生一定作用,但是這方面的研究仍然受到許多因素的制約,包括研究方法、研究材料以及細(xì)菌本身的特征等等。此外,有關(guān)群體感應(yīng)的多數(shù)研究都是以銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、大腸桿菌(E.coli)或費(fèi)氏弧菌(Vibriofischeri)為對(duì)象進(jìn)行的,對(duì)于其他菌種的研究還十分有限,并且在水產(chǎn)領(lǐng)域有關(guān)群體感應(yīng)的報(bào)導(dǎo)并不多見(jiàn)。水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)在人們的生活中以至整個(gè)社會(huì)中都占有重要地位,水產(chǎn)養(yǎng)殖的發(fā)展也是學(xué)者和社會(huì)人士關(guān)注的重點(diǎn),而且水產(chǎn)養(yǎng)殖中的很多方面都涉及群體感應(yīng)系統(tǒng)的調(diào)控作用,因此研究群體感應(yīng)在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用是十分必要的。

      在養(yǎng)殖污水處理方面的應(yīng)用養(yǎng)殖水體中的有害物質(zhì)大多來(lái)自殘餌、殘?jiān)图S便等有機(jī)物的大量沉積,這不僅會(huì)引起水體缺氧,而且會(huì)產(chǎn)生大量有害的中間產(chǎn)物,危害養(yǎng)殖動(dòng)物健康,嚴(yán)重時(shí)甚至造成死亡[19-21]。目前,養(yǎng)殖污水的處理方法主要有物理法、化學(xué)法和生物法三種。生物法又包括生物膜法、人工濕地法、添加高效微生物菌劑和固化微生物等方法。其中生物膜法因具有運(yùn)行穩(wěn)定、管理方便、處理費(fèi)用低的優(yōu)點(diǎn)[22],已成為養(yǎng)殖污水處理的主要方法之一,其對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖污水中氨氮和有機(jī)物的去除有很好的效果[23-24]。生物膜是一個(gè)非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),相對(duì)于游離細(xì)胞,它具有更強(qiáng)的穩(wěn)定性,可以提高細(xì)菌的存活率,因此自然界中的細(xì)菌主要是以生物膜的形式存在的。生物膜的形成過(guò)程由可逆性粘附、不可逆性粘附、早期形成階段、成熟和老化等5個(gè)階段構(gòu)成[25-26]。生物膜法處理養(yǎng)殖污水的主要作用原理是利用生物膜上微生物的新陳代謝作用,將污水中的有害物質(zhì)最終分解為CO2和H2O[27-29]。水產(chǎn)養(yǎng)殖中常見(jiàn)的生物濾池法就是使廢水與生物膜接觸,利用生物膜內(nèi)微生物的作用將廢水中的有機(jī)物氧化,使水質(zhì)得到凈化。凈化作用主要是通過(guò)生物膜上硝化菌、反硝化菌、聚磷菌等細(xì)菌的作用來(lái)實(shí)現(xiàn)的。這些細(xì)菌是生物膜法處理養(yǎng)殖污水的關(guān)鍵,影響著生物膜的形成、養(yǎng)殖污水的處理效果等方面。通過(guò)單因子實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)添加了C6-HSL和N-3-oxo-C8-HSL兩種AHLs類(lèi)信號(hào)分子的實(shí)驗(yàn)組的養(yǎng)殖污水處理效果發(fā)生了變化,其中較為明顯的是附著基上的生物量發(fā)生了顯著改變。與空白對(duì)照組和添加乙醇的實(shí)驗(yàn)組相比,添加C6-HSL和N-3-oxo-C8-HSL的兩組生物膜的生物量明顯增加。但具體的調(diào)控機(jī)制以及群體感應(yīng)如何對(duì)養(yǎng)殖污水處理產(chǎn)生影響、如何大幅提高處理效率等方面的問(wèn)題,還需要更全面更深入的研究。如果可以通過(guò)人為手段,利用群體感應(yīng)對(duì)生物膜上的微生物進(jìn)行干預(yù),就可達(dá)到縮短掛膜時(shí)間或提高氨氮去除率的目的。首先在生物膜掛膜啟動(dòng)階段,通過(guò)向系統(tǒng)中投加群體感應(yīng)信號(hào)分子的拮抗物或結(jié)構(gòu)類(lèi)似物,從而提高掛膜速度和效率;其次可以通過(guò)增強(qiáng)或減弱某種群體感應(yīng)信號(hào)分子的濃度來(lái)強(qiáng)化或弱化某些種群,優(yōu)化生物膜的群落組成及結(jié)構(gòu),進(jìn)而提高該工藝對(duì)特定污染物的去除效果,例如,利用群體感應(yīng)使降解養(yǎng)殖水體中有害有機(jī)物的菌群(如硝化菌群)占據(jù)優(yōu)勢(shì)地位,提高去除效率;此外,利用化學(xué)信號(hào)物質(zhì)干預(yù)細(xì)菌的信息系統(tǒng),還能夠影響細(xì)菌的其它生理行為,例如:某些特定污染物的降解基因通過(guò)具有結(jié)合轉(zhuǎn)移特性的質(zhì)粒在種群內(nèi)的擴(kuò)散和進(jìn)化,可以增加生物膜系統(tǒng)對(duì)環(huán)境變化的適應(yīng)能力[30]。#p#分頁(yè)標(biāo)題#e#

      水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌的處理范文第4篇

      1引起海洋疾病的主要原因

      許多因素之間的相互作用影響著海洋疾病的發(fā)生,環(huán)境因素是其中一個(gè)非常重要的因素,同時(shí)其他自然因素對(duì)海洋疾病災(zāi)害暴發(fā)也起到了推波助瀾的作用。海洋生態(tài)環(huán)境上的變化會(huì)使流行性海洋疾病加劇以及致病因子毒力提高,從而導(dǎo)致海洋疾病的大規(guī)模暴發(fā),甚至可能會(huì)誘發(fā)一些新的疾病的發(fā)生。導(dǎo)致環(huán)境改變的因素主要包括氣候變化和人類(lèi)行為,他們?cè)诓≡瓊鞑シ矫姘缪葜匾巧視?huì)使宿主抵抗力下降。雖然目前對(duì)氣候變化和人類(lèi)行為是如何影響海洋生態(tài)系統(tǒng)的時(shí)空變化的研究還不是非常透徹,但是其中一個(gè)不爭(zhēng)的事實(shí)就是海洋生態(tài)系統(tǒng)往往隨著氣候變化而改變,這種突發(fā)性、非線性的改變所帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)也不斷增加[10];另一方面,人類(lèi)向海洋環(huán)境輸入的持久性有機(jī)污染物可以影響海洋生物的免疫力[13]。

      1.1氣候變化對(duì)海洋疾病的影響在過(guò)去的30a,溫室效應(yīng)已經(jīng)導(dǎo)致全球平均溫度升高了0.2℃,而這個(gè)增加的能量大部分被海洋吸收[14]。我國(guó)近海海洋表層溫度正在不斷上升,而由海洋生態(tài)環(huán)境改變所引起的疾病暴發(fā),其流行性和嚴(yán)重程度與氣候變化密切相關(guān)。全球溫度的升高無(wú)論對(duì)海洋生物還是對(duì)海洋病原體都會(huì)產(chǎn)生明顯影響,促使海洋疾病的大規(guī)模暴發(fā),而且也擴(kuò)大了疾病發(fā)生的時(shí)空范圍。

      1.1.1氣候變化對(duì)海洋疾病的直接影響隨著全球氣候變化的發(fā)生,海洋生態(tài)系統(tǒng)的健康和生產(chǎn)力也受到了影響,氣候變暖會(huì)導(dǎo)致許多海洋生物的生物性能改變,從而使它們更容易受到疾病的感染。例如,在上個(gè)世紀(jì)九十年代,由于溫度升高,斑海豹的密度增加,這為病原體的傳播和侵入提供了良好的條件,從而導(dǎo)致了北歐斑海豹流行病的發(fā)生[15]。當(dāng)水體溫度過(guò)高或者太陽(yáng)光照強(qiáng)度過(guò)強(qiáng)時(shí),在一系列的環(huán)境因素共同協(xié)作下,很多珊瑚發(fā)生白化現(xiàn)象[1,16]。從上個(gè)世紀(jì)七十年代開(kāi)始,珊瑚白化的程度和規(guī)模都有所增加,在1998年發(fā)生的珊瑚白化現(xiàn)象是歷史上范圍最廣、程度最嚴(yán)重的一次,甚至影響到整個(gè)珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)[10]。由氣候變化所引起的海洋酸化對(duì)珊瑚也產(chǎn)生著直接影響[17]。海水的酸化會(huì)影響單細(xì)胞浮游藻類(lèi)和珊瑚等有碳酸鈣軀殼的海洋生物,因?yàn)楹Q筮^(guò)量吸收大氣中的二氧化碳時(shí)就會(huì)導(dǎo)致海洋水體的酸化,而珊瑚礁是利用碳酸鈣來(lái)構(gòu)建自己的骨骼,海水的酸化使得珊瑚的骨骼變薄,例如大堡礁珊瑚的鈣化程度從1990年開(kāi)始,已經(jīng)降低了14.2%[18]。科學(xué)研究表明,由于海洋的溫度和酸度不斷升高,當(dāng)空氣中二氧化碳濃度達(dá)到450ppm時(shí)就會(huì)對(duì)生態(tài)系統(tǒng)中的珊瑚礁構(gòu)成嚴(yán)重威脅。如果空氣中二氧化碳濃度已達(dá)到450ppm,大氣溫度一旦比前工業(yè)時(shí)代高出2℃,大批珊瑚就會(huì)發(fā)生白化甚至死亡;如果海洋已呈酸化狀態(tài),空氣中的二氧化碳濃度一旦超過(guò)450ppm,珊瑚礁將會(huì)進(jìn)入負(fù)的碳平衡狀態(tài)[19]。

      1.1.2氣候變化提高了海洋病原生物的活力病毒、細(xì)菌和寄生蟲(chóng)是海洋有機(jī)體致病的主要因素,同時(shí)也是海洋生物數(shù)量和棲息地的關(guān)鍵調(diào)節(jié)者。然而,近十多年來(lái),氣候變化導(dǎo)致了海平面和溫度上升,海洋循環(huán)、pH、鹽度和紫外線發(fā)生變化。這些物理和化學(xué)因素的改變影響了海洋病原生物的傳播和致病力。ChrisB等[17]研究者指出水溫和紫外線輻射強(qiáng)度發(fā)生變化,會(huì)擾亂海洋中細(xì)菌、真菌和病毒的相對(duì)數(shù)量,同時(shí)也會(huì)影響到魚(yú)類(lèi)和海洋哺乳動(dòng)物的生存狀況。海洋環(huán)境中,尤其是海水養(yǎng)殖環(huán)境中細(xì)菌性疾病是一類(lèi)常見(jiàn)且危害非常大的疾病。溫度影響著有害細(xì)菌的生存狀況以及感染疾病的能力。已知的病原菌有副溶血弧菌、鰻弧菌、哈維氏弧菌、河流弧菌、創(chuàng)傷弧菌、溶藻膠弧菌、黃桿菌、鏈球菌、諾卡氏菌等,共30多種。弧菌是引起海水養(yǎng)殖魚(yú)蝦細(xì)菌性疾病發(fā)生的一種最為常見(jiàn)的病原體,其發(fā)生溫度范圍廣,持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),地域范圍廣[20]。當(dāng)水溫升高或者其他環(huán)境條件惡化時(shí),其致病力更強(qiáng),潛在危害性更大。有報(bào)道指出美國(guó)東部大西洋沿岸的切薩皮克灣弧菌的存在狀況與海水溫度的升高有一定關(guān)系[21]。氣候變化中的一個(gè)重要生態(tài)因子的改變就是海洋溫度升高,許多寄生蟲(chóng)原本生活在抑制其生長(zhǎng)的環(huán)境,但是由于溫度的升高,該環(huán)境變?yōu)楦欣谄浞敝车沫h(huán)境,從而使寄生蟲(chóng)的生長(zhǎng)、傳播速度加快,生存能力也更強(qiáng)。據(jù)報(bào)道,寄生蟲(chóng)病的危害日益嚴(yán)重,例如,在1990~1991年變暖的期間,貝類(lèi)帕金蟲(chóng)向美國(guó)東南部擴(kuò)散了500km2[17]。

      1.1.3氣候變化影響赤潮的發(fā)生赤潮的發(fā)生與海水溫度及營(yíng)養(yǎng)鹽密切相關(guān)。2011年美國(guó)科學(xué)促進(jìn)會(huì)(AAAS)科學(xué)家指出,隨著氣候變暖,美國(guó)太平洋西北區(qū)普吉特海灣赤潮發(fā)生的頻率和持續(xù)時(shí)間正在增加。通過(guò)對(duì)未來(lái)海洋和氣候模型的分析,鏈狀亞歷山大藻或有毒“赤潮”將大量傳播,它們可積累在甲殼類(lèi)動(dòng)物體內(nèi)引發(fā)病變,甚至引起神經(jīng)麻痹[11]。專(zhuān)家們預(yù)言,在30a之內(nèi),甚至可能是在10a內(nèi),普吉特海灣赤潮發(fā)生時(shí)間可能將會(huì)提前,到21世紀(jì)末,赤潮發(fā)生的時(shí)間可能每年會(huì)提前兩個(gè)月,而且比現(xiàn)在的持續(xù)時(shí)間會(huì)增加一個(gè)月,這對(duì)海洋生物的危害無(wú)疑是巨大的,可能會(huì)導(dǎo)致海洋魚(yú)類(lèi)等大量的死亡。

      1.2人類(lèi)行為對(duì)海洋疾病的影響

      隨著科學(xué)技術(shù)和國(guó)際貿(mào)易的不斷發(fā)展,人類(lèi)的影響已經(jīng)涉及遠(yuǎn)洋。即使在南極洲,企鵝遠(yuǎn)離任何農(nóng)業(yè)但體內(nèi)卻檢測(cè)到DDT,海岸線也被溢油污染,藍(lán)鯨處于嚴(yán)重瀕危狀態(tài)。然而,物種和生態(tài)系統(tǒng)受到危害最嚴(yán)重的區(qū)域則還是在最靠近人類(lèi)的海域。人類(lèi)行為觸發(fā)了海洋生態(tài)和氣候的變化,同時(shí)人類(lèi)行為也直接影響海洋生物的生存狀況[3]。

      1.2.1人類(lèi)行為對(duì)海洋疾病的直接影響世界上有很大一部分人口居住在沿海地區(qū),因此,廢水經(jīng)常被直接或間接的排入到近海。以美國(guó)為例,美國(guó)每天處理后的廢水排海量約達(dá)1.0×1010gal[22]。從全球來(lái)看,沿海地區(qū)約有90%的廢水未經(jīng)嚴(yán)格處理就排入到海水中[23-24]。病原微生物是一類(lèi)重要的海水污染類(lèi)型,人類(lèi)生活和生產(chǎn)中排出的廢水、污水中含有大量的病原微生物,它們?cè)谝欢l件下,可造成海水環(huán)境嚴(yán)重污染,引起疾病流行,甚至嚴(yán)重危害人類(lèi)健康。由于海洋環(huán)境惡化使各種細(xì)菌、病毒和原生動(dòng)物等滋生,增加了海洋生物的發(fā)病率或死亡率,并可導(dǎo)致災(zāi)害性疾病暴發(fā)。一項(xiàng)抽樣調(diào)查顯示,大量的生活污水入海是導(dǎo)致海洋貝類(lèi)大腸菌群超標(biāo)的主要原因[25]。從1966年開(kāi)始,海洋哺乳動(dòng)物的疾病發(fā)生率就開(kāi)始增加,到1992年開(kāi)始穩(wěn)定的增加,已經(jīng)公布的鯨等海洋哺乳動(dòng)物的發(fā)病和死亡多數(shù)是由陸地上的病原生物擴(kuò)散到海洋導(dǎo)致的[26],例如,在北大西洋,海洋疾病引起的哺乳動(dòng)物的大規(guī)模死亡,這些證據(jù)均表明人類(lèi)行為是海洋疾病發(fā)生的一個(gè)主要原因[27]。廢水的排放還可能引起近岸海域富營(yíng)養(yǎng)化的發(fā)生,水體的富營(yíng)養(yǎng)化直接或間接的導(dǎo)致了一些病原微生物的滋生,以及富營(yíng)養(yǎng)化引起的赤潮藻類(lèi)的大量繁殖,不僅造成大批海洋生物因?yàn)槿毖跛劳觯矣卸驹孱?lèi)可能會(huì)產(chǎn)生大量的毒素。據(jù)報(bào)道,1998年5月17日~1998年6月6日在福建省連江縣苔錄鎮(zhèn)后灣海域發(fā)生一起由裸甲藻等引起的赤潮,對(duì)鮑魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重危害,初步斷定是由于裸甲藻等赤潮生物分泌了某種毒素[28]。一項(xiàng)調(diào)查結(jié)果顯示,在過(guò)去的40a里,赤潮的發(fā)生也間接的導(dǎo)致了哺乳動(dòng)物的發(fā)病率和死亡率的升高[29]。化學(xué)污染物對(duì)海洋生物也是一個(gè)重要的威脅。化學(xué)污染物增加會(huì)造成海洋哺乳動(dòng)物傳染疾病的流行,尤其是多氯聯(lián)苯(PCBs)、DDTs和重金屬等污染能在食物鏈中累積,并且能夠在哺乳動(dòng)物的組織中檢測(cè)出污染物質(zhì),這些污染物會(huì)對(duì)生物的內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)產(chǎn)生影響,例如波羅的海的海豹發(fā)生的腎上腺畸形就是由PCBs引起的[30]。

      1.2.2人類(lèi)行為對(duì)病原體傳播的間接影響海洋旅游業(yè)和貿(mào)易是影響動(dòng)物感染流行性疾病的最主要的人為因素[5,11],人類(lèi)活動(dòng)在很大程度上間接地加快了海洋病原生物的傳播,尤其是在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè),例如雙殼貝類(lèi)的大批死亡就是由于人類(lèi)無(wú)意間傳播感染源而引起的。1995年,在澳大利亞的安克舍斯灣,皰疹病毒引起的沙丁魚(yú)死亡以每天30km的速度傳播,從3月到9月,覆蓋了澳大利亞5000km的海岸線。有證據(jù)表明,引起這次災(zāi)難的原因是飼喂金槍魚(yú)的沙丁魚(yú)攜帶皰疹病毒,其第二次大規(guī)模的流行是在澳大利亞的斯賓塞灣,該地區(qū)也是以冷凍的沙丁魚(yú)飼喂其他魚(yú)類(lèi)[21]。

      1.2.3人類(lèi)行為造成物種棲息地退化和污染人類(lèi)行為造成物種棲息地退化和污染也是加快海洋疾病暴發(fā)一個(gè)重要原因。對(duì)水棲哺乳動(dòng)物的研究表明,污染對(duì)哺乳動(dòng)物的免疫系統(tǒng)造成一系列的不同程度的損害。但是關(guān)于棲息地退化對(duì)疾病的影響研究還很少,尤其是對(duì)無(wú)脊椎動(dòng)物,到目前為止,已經(jīng)證實(shí)的大部分?jǐn)?shù)據(jù)都是珊瑚礁疾病暴發(fā)和寄生蟲(chóng)病的數(shù)據(jù)[3,5]。

      2海洋疾病的危害

      2.1海洋疾病對(duì)人類(lèi)健康的危害

      由于許多人類(lèi)病原微生物在海洋中都是具有活性的病原體,而人類(lèi)通過(guò)某些行為可能會(huì)有意無(wú)意地造成海洋中的病原體增加,其主要途徑就是廢水的排放,其次是降雨所攜帶的空氣中的一些人類(lèi)和動(dòng)物的廢棄物入海,同時(shí)地表徑流也隨之增加,其攜帶的陸源細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)的數(shù)量也隨之增加,給沿岸的游泳或從事其他娛樂(lè)活動(dòng)的人群帶來(lái)嚴(yán)重威脅[11];第三是非點(diǎn)源污染,而這一途徑也是最近科學(xué)界的研究熱點(diǎn)。上述這些排放入海的病原體多數(shù)能夠在海水中存活一段時(shí)間,當(dāng)人類(lèi)暴露到這些水體或是食用被這些海水污染的水產(chǎn)品時(shí)就有可能會(huì)感染不同程度的疾病。根據(jù)流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn),在污染海區(qū)游泳患病危險(xiǎn)性會(huì)增加[31-32]。據(jù)估計(jì),香港海岸游泳人群比非游泳人群患胃腸炎的概率要高出5倍,僅1990年因接觸污染的海水而患病的人數(shù)就不少于40萬(wàn)人。1992年,通過(guò)對(duì)香港25000個(gè)海水游泳者進(jìn)行調(diào)查,他們患眼睛、皮膚和呼吸道疾病的幾率要比其他人高出2~20倍[33]。據(jù)估計(jì),在香港每年由海洋疾病所引起的人類(lèi)疾病的醫(yī)療費(fèi)用達(dá)數(shù)百萬(wàn)美元。海洋疾病很多是通過(guò)人類(lèi)食用污染的海產(chǎn)品,攝入帶有病原體的飲用水和娛樂(lè)水體而引起的。這些疾病的傳播受到各種社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、生態(tài)條件和人類(lèi)免疫力的影響,同時(shí)氣候條件起到了非常重要的作用[34]。海洋疾病對(duì)人類(lèi)的食品安全影響是非常巨大的,其影響主要是人類(lèi)食用有毒的海水養(yǎng)殖生物而引起疾病。例如赤潮生物產(chǎn)生的毒素會(huì)在貝類(lèi)體內(nèi)富集,而人類(lèi)食用這些貝類(lèi)常發(fā)生中毒。在1976年英國(guó)因食用海灣扇貝而引起33起中毒事件,患病人數(shù)797人;1978年澳大利亞因食用牡蠣涉及2000余人中毒[35];1991年加拿大魁北克省有200多人吃牡蠣而感染疾病[36-37]。

      2.2海洋疾病對(duì)海洋生態(tài)系統(tǒng)的影響

      海洋生態(tài)系統(tǒng),是人類(lèi)生存和發(fā)展的重要環(huán)境,是社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。從生態(tài)學(xué)角度來(lái)看,海洋環(huán)境的污染、海洋疾病的暴發(fā)都可能會(huì)引起海洋生物群落結(jié)構(gòu)和分布的改變。海洋疾病的發(fā)生一方面可能導(dǎo)致海洋生態(tài)系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)種群的轉(zhuǎn)變[15],另一方面還可能降低某一群落結(jié)構(gòu)的多樣性。例如,海草床的海膽疾病的暴發(fā)可能會(huì)改變這些群落的生物多樣性,珊瑚疾病的發(fā)生導(dǎo)致珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)種從珊瑚轉(zhuǎn)變?yōu)樵孱?lèi)[38]。隨著污染的加劇,可持續(xù)發(fā)展的海洋生態(tài)系統(tǒng)的維護(hù)已迫在眉睫,各級(jí)政府以及相關(guān)環(huán)境管理部門(mén)應(yīng)該建立健全生態(tài)系統(tǒng)監(jiān)測(cè)指標(biāo)及評(píng)價(jià)指標(biāo)體系,加強(qiáng)海洋生態(tài)系統(tǒng)管理,減少疾病的發(fā)生,保護(hù)我們的海洋。

      2.3海洋疾病對(duì)商業(yè)持續(xù)性發(fā)展的影響

      海洋是人類(lèi)21世紀(jì)生存與發(fā)展的資源寶庫(kù)和實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展的重要?jiǎng)恿υ础夂蜃兓约叭祟?lèi)行為引起的海洋疾病暴發(fā)已經(jīng)從根本上影響了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)和以海洋為基礎(chǔ)的旅游業(yè),商業(yè)價(jià)值大幅度的降低,影響了海洋經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。

      2.3.1水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)自上個(gè)世紀(jì)八十年代以來(lái),水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)已經(jīng)成為發(fā)展最快的一個(gè)食品行業(yè)。目前,養(yǎng)殖業(yè)多為高密度養(yǎng)殖,這就導(dǎo)致養(yǎng)殖動(dòng)物對(duì)疾病的感染更為敏感。在上個(gè)世紀(jì)60年代,由于某種原因,帕金蟲(chóng)被引入到美國(guó)的切薩皮克灣和特拉華州灣,當(dāng)時(shí)的低溫抑制了其生長(zhǎng),從而限制了帕金蟲(chóng)傳染病的暴發(fā),但是到了90年代晚期,由于海洋溫度的升高,導(dǎo)致帕金蟲(chóng)傳染病在當(dāng)?shù)氐哪迪狆B(yǎng)殖場(chǎng)暴發(fā)[29]。從上個(gè)世紀(jì)七十年代以來(lái),氣候變化引起的海洋表面溫度、鹽度、pH和營(yíng)養(yǎng)鹽濃度的波動(dòng)導(dǎo)致魚(yú)類(lèi)死亡率的增加[39]。其表現(xiàn)形式為這些海洋環(huán)境的變化加速了赤潮的暴發(fā),而赤潮產(chǎn)生的有害生物毒素多數(shù)是致命的,除此之外,赤潮還可以間接引起水體缺氧而導(dǎo)致生物大量死亡。持續(xù)的赤潮大量消耗水中的氧氣,同時(shí)伴隨著有機(jī)體碎片的分解,導(dǎo)致水體低氧或缺氧。對(duì)于一些以漁業(yè)為基礎(chǔ)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展中國(guó)家來(lái)說(shuō),赤潮對(duì)沿岸水域的威脅顯得尤為嚴(yán)重。海洋疾病對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的直接危害就是導(dǎo)致海洋生物的大規(guī)模死亡,造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。1993年以來(lái),我國(guó)對(duì)蝦養(yǎng)殖病害暴發(fā)并大規(guī)模流行,使我國(guó)的對(duì)蝦產(chǎn)量由1992年的20.69萬(wàn)t下降至8.78t;1997年以來(lái),養(yǎng)殖櫛孔扇貝病害大規(guī)模流行,死亡率達(dá)50%~90%;1998年以來(lái),養(yǎng)殖貽貝病害大規(guī)模流行;1999年開(kāi)始,池塘和灘涂養(yǎng)殖的文蛤因病害而大規(guī)模死亡;2000年開(kāi)始,發(fā)現(xiàn)灘涂養(yǎng)殖的菲律賓蛤仔因病害而大規(guī)模死亡;期間,皺紋盤(pán)鮑、蝦夷馬糞海膽、蝦夷扇貝、海灣扇貝的養(yǎng)殖病害也時(shí)有發(fā)生;隨著海水魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大,魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖病害也有日趨嚴(yán)重趨勢(shì)。此外,條斑紫菜的赤腐病,海帶的大面積死亡,也給海水藻類(lèi)的養(yǎng)殖帶來(lái)了困難。

      2.3.2旅游業(yè)海洋旅游業(yè)在海洋產(chǎn)業(yè)中具有先導(dǎo)地位,尤其是在發(fā)展中國(guó)家,發(fā)展?jié)摿艽蟆I汉鹘甘呛Q舐糜螛I(yè)的亮點(diǎn),他們的吸引力主要在于其生物的多樣性,但是珊瑚礁也正在遭受各種疾病的影響,例如珊瑚的白化現(xiàn)象、黃帶病和黑帶病。世界保護(hù)監(jiān)測(cè)中心(WCMC)的一份報(bào)告中指出,近20a來(lái),有證據(jù)表明珊瑚疾病的暴發(fā)主要發(fā)生在全球變暖之后,這些結(jié)果表明氣候變化使珊瑚疾病進(jìn)一步惡化,但是關(guān)于海洋溫度的升高與珊瑚礁疾病暴發(fā)率升高的關(guān)系研究較少,需要進(jìn)一步的研究。珊瑚礁的死亡不僅僅使得巖礁魚(yú)類(lèi)的棲息地丟失,而且也使依靠珊瑚礁為主的旅游業(yè)變得蕭條,尤其對(duì)于一些貧困的國(guó)家,所帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失不可估量。

      3小結(jié)與展望

      3.1小結(jié)氣候變化和人類(lèi)行為以多種多樣的方式影響海洋疾病發(fā)生,氣候變化主要通過(guò)以下幾方面影響海洋疾病:(1)溫度升高會(huì)促進(jìn)海洋動(dòng)物的繁殖,增加其密度,從而有利于病原體的侵入,發(fā)病幾率增加,或是降低海洋生物機(jī)體的免疫力,增加了它們對(duì)疾病的易感性;(2)溫度的升高加快了病原生物的繁殖速度和擴(kuò)散速度,或者促進(jìn)了新的病原體的產(chǎn)生,從而使海洋生物致病;(3)海洋的酸化會(huì)對(duì)一些利用碳酸鈣形成骨骼的生物產(chǎn)生影響。人類(lèi)行為對(duì)海洋疾病的影響主要表現(xiàn)在以下幾方面:(1)人類(lèi)排污對(duì)近岸海域的污染會(huì)造成沿岸生物抵抗力降低,化學(xué)污染在其體內(nèi)沉積造成機(jī)體損傷;(2)人類(lèi)向海洋中排放大量的營(yíng)養(yǎng)鹽,使海水呈富營(yíng)養(yǎng)化狀態(tài),從而促進(jìn)了赤潮的暴發(fā),赤潮間接造成水體缺氧而導(dǎo)致海洋生物大量死亡,另外,赤潮產(chǎn)生的生物毒素對(duì)海洋生物產(chǎn)生了嚴(yán)重的毒害作用。海洋疾病對(duì)我國(guó)海洋生態(tài)系統(tǒng)和經(jīng)濟(jì)造成嚴(yán)重的負(fù)面影響,主要表現(xiàn)在以下幾方面:(1)海洋疾病直接或間接影響人類(lèi)健康,主要通過(guò)食用海產(chǎn)品和暴露到娛樂(lè)水體的途徑危害人類(lèi)健康;(2)海洋疾病可能會(huì)由食物傳播而影響人類(lèi)健康;(3)海洋疾病的發(fā)生對(duì)海洋生態(tài)系統(tǒng)的影響主要是改變海洋生態(tài)系統(tǒng)的多樣性和群落結(jié)構(gòu);(4)全世界每年由于海洋疾病所造成的經(jīng)濟(jì)損失是不可估量的。

      水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌的處理范文第5篇

      關(guān)鍵詞 胞外酶;水解圈;酶用飼料;河蟹養(yǎng)殖;微山湖

      中圖分類(lèi)號(hào) S966.16 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739(2013)18-0254-02

      近年來(lái),由于人們生活水平的提高,對(duì)水產(chǎn)品的需求越來(lái)越大,但天然水產(chǎn)品卻供不應(yīng)求,進(jìn)而產(chǎn)生了許多河蟹養(yǎng)殖區(qū)以滿足人們對(duì)河蟹的需求[1]。目前,飼料工業(yè)更多青睞于微生物酶的使用,飼用酶制劑目前被廣泛使用,它是通過(guò)特定生產(chǎn)工藝加工而成的包含單一酶或混合酶的工業(yè)產(chǎn)品。動(dòng)物直接攝入酶產(chǎn)品具有多項(xiàng)保健效果:補(bǔ)充內(nèi)源酶(主要是指消化酶類(lèi)如淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等)的不足,激活內(nèi)源酶的分泌;水解非淀粉多糖(NSP)等抗?fàn)I養(yǎng)因子,降低消化道內(nèi)容物粘度;破壞植物細(xì)胞壁,使包裹在細(xì)胞中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分地釋放出來(lái),從而增加與消化酶的接觸面,提高消化吸收率;提高機(jī)體代謝水平,增強(qiáng)免疫力等[2]。近年來(lái)的研究表明,酶不僅直接參與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收,也影響其代謝和參與有關(guān)激素的調(diào)節(jié)作用;改變消化部位,使某些物質(zhì)的消化場(chǎng)所由盲腸轉(zhuǎn)移到小腸,減少后腸微生物發(fā)酵,提高其消化率[3]。此外,外源酶還有助于改善消化道內(nèi)環(huán)境,如平衡內(nèi)源酶的分泌,減少腸黏膜細(xì)胞的脫落;改變腸壁結(jié)構(gòu),提高養(yǎng)分吸收能力;減少細(xì)菌性疾病的發(fā)生等[4]。酶用飼料不僅能消除飼料抗?fàn)I養(yǎng)因子的有害作用,促進(jìn)養(yǎng)分的消化和吸收,提高畜禽的生長(zhǎng)速率、飼料轉(zhuǎn)化效率和增進(jìn)畜禽健康,而且能減少養(yǎng)殖業(yè)排污中氮、磷的排放,保護(hù)生態(tài)環(huán)境。應(yīng)用飼料酶制劑是現(xiàn)代化養(yǎng)殖業(yè)中經(jīng)濟(jì)與生態(tài)效益兼顧的重要科學(xué)技術(shù)措施[5]。

      目前,飼用酶制劑有單一酶制劑和復(fù)合酶制劑,而且大多是誘導(dǎo)酶類(lèi),因此向培養(yǎng)基中加入誘導(dǎo)物就會(huì)增加胞外酶的產(chǎn)量[6]。菌種不同,生產(chǎn)酶制劑所需工藝條件也不同,其最佳工藝參數(shù)必須通過(guò)試驗(yàn)來(lái)確定[7]。只有為培養(yǎng)物提供一個(gè)最適的環(huán)境,菌體的代謝活動(dòng)才能得到最充分的表達(dá),酶產(chǎn)量才能提高。提高微生物酶制劑的產(chǎn)量、活性和穩(wěn)定性,增強(qiáng)產(chǎn)品的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力是很重要的發(fā)展方向。

      細(xì)菌胞外酶是指那些在細(xì)胞內(nèi)合成后穿過(guò)細(xì)胞質(zhì)膜的酶,它們有些鑲嵌在質(zhì)膜上,有些存在于周質(zhì)空間,有些則完全脫離其生產(chǎn)者,擴(kuò)散到環(huán)境中[8]。特別是異養(yǎng)細(xì)菌是水環(huán)境中胞外酶的主要生產(chǎn)者。胞外酶是水域生態(tài)中有機(jī)物的降解不可缺少的物質(zhì),同樣也有利于水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物的生長(zhǎng)。田 黎等[9]研究了芽孢桿菌產(chǎn)生的胞外酶類(lèi)和多糖,發(fā)現(xiàn)其對(duì)水生生物具有促進(jìn)生產(chǎn)和激發(fā)產(chǎn)生免疫病害的功能。微生物最主要的作用是對(duì)水體水質(zhì)的改善,它通過(guò)一系列物理和化學(xué)作用起到改善水質(zhì)的作用。特別對(duì)于高密度養(yǎng)殖的水體,由于養(yǎng)殖密度大、養(yǎng)殖面積有限,所以水體的自?xún)裟芰Ψ浅S邢蓿搅损B(yǎng)殖的中后期,常常會(huì)因?yàn)樗|(zhì)的變壞導(dǎo)致疾病的發(fā)生,所以在高密度養(yǎng)殖水體中要定期加入有益微生物來(lái)改善水質(zhì),減少疾病的發(fā)生。如果有益微生物在水體中達(dá)到一定的數(shù)量,就會(huì)形成特定的種群,這樣在生存競(jìng)爭(zhēng)中,有益微生物就會(huì)抑制有害微生物的生長(zhǎng),在很大程度上提高水體的質(zhì)量,使水體保持一個(gè)很好的穩(wěn)定狀態(tài)。這樣對(duì)水生動(dòng)物也是非常有利的,使它們生活在穩(wěn)定的水環(huán)境中,對(duì)它們的生長(zhǎng)發(fā)育非常有利[9]。

      河蟹養(yǎng)殖區(qū)中主要產(chǎn)蛋白水解酶和脂肪水解酶[10],通過(guò)試驗(yàn)研究河蟹養(yǎng)殖環(huán)境中的主要菌體和主要胞外酶,為飼用酶制劑的加工和選擇提供借鑒和參考,以發(fā)揮最大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。

      1 材料與方法

      1.1 試驗(yàn)材料

      1.1.1 菌種來(lái)源。從濟(jì)寧微山湖河蟹養(yǎng)殖區(qū)水體中采集水樣并制成菌懸液,進(jìn)一步梯度稀釋?zhuān)九囵B(yǎng)基過(guò)夜培養(yǎng),挑取單菌落,經(jīng)過(guò)多次純化培養(yǎng),得到25株菌。

      1.1.2 試劑及儀器。瓊脂,酵母粉,中性紅,酪蛋白,尿素水溶液,豆油,可溶性淀粉,培養(yǎng)皿,三角瓶,高壓滅菌鍋,顯微鏡,直尺等。

      1.1.3 培養(yǎng)基[6]。①LB培養(yǎng)基:蛋白胨10.0 g,酵母粉5.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂16.0 g(1.6%),蒸餾水1 000 mL,pH值約7.0。②產(chǎn)蛋白酶菌株鑒定的培養(yǎng)基配方:LB培養(yǎng)基+酪蛋白,含量1.0%。③產(chǎn)淀粉酶菌株的鑒定培養(yǎng)基:可溶性淀粉1.0 g,蛋白胨0.5 g,酵母1.0 g,瓊脂1.5 g,蒸餾水100 mL,pH值約7.2。④產(chǎn)脲酶菌株的鑒定培養(yǎng)基:LB培養(yǎng)基+酚紅0.04 g(或0.2%酚紅水溶液20 mL),滅菌后冷卻至50~55 ℃,加入20%尿素水溶液10 mL。⑤產(chǎn)脂肪酶菌株鑒定培養(yǎng)基(300 mL):LB培養(yǎng)基+中性紅0.2 mL,豆油2 g,pH值為7.2左右。

      1.2 試驗(yàn)方法[11]

      1.2.1 樣品采集。從濟(jì)寧微山湖河蟹養(yǎng)殖區(qū)水體中直接用滅菌三角瓶從養(yǎng)殖區(qū)采集水樣。

      1.2.2 樣品處理。將采集到的水樣制成菌懸液,進(jìn)一步稀釋1 000倍,按10倍稀釋法連續(xù)稀釋到10-8,并分別取0.1 mL涂布于制好的固體分離平板上,每個(gè)稀釋度做3個(gè)平行樣,置于28 ℃條件下恒溫培養(yǎng)。

      1.2.3 菌種純化。從培養(yǎng)好的平板中挑取單菌落,進(jìn)一步在分離培養(yǎng)基平板上劃線分離純化,28 ℃恒溫培養(yǎng)48 h。

      1.2.4 菌種鑒定。菌株純化后,根據(jù)菌株培養(yǎng)特征、細(xì)胞形態(tài)、革蘭氏染色等方法測(cè)定菌株的生理生化反應(yīng),根據(jù)結(jié)果進(jìn)行鑒定。從河蟹養(yǎng)殖區(qū)分離得到25株菌,將其分別接種在各鑒定培養(yǎng)基上(酪蛋白培養(yǎng)基、淀粉培養(yǎng)基、脂肪培養(yǎng)基、尿素培養(yǎng)基),觀察并記錄哪種菌株主要產(chǎn)哪種水解酶,并以水解圈直徑與菌落直徑比(D/d)表示產(chǎn)酶能力的大小,同時(shí)記錄一種菌株產(chǎn)多種水解酶的情況,以期培育特殊菌種和高產(chǎn)菌種。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 產(chǎn)淀粉水解酶菌株的檢測(cè)

      在培養(yǎng)過(guò)程中,若菌株具有分泌淀粉水解酶的能力,產(chǎn)生的淀粉酶就會(huì)分解培養(yǎng)基中的淀粉,然后在培養(yǎng)基中加入碘液,若菌落周?chē)a(chǎn)生透明的水解圈,說(shuō)明該菌株能產(chǎn)淀粉水解酶。圖1為淀粉培養(yǎng)基,此處為14號(hào)菌株所產(chǎn)生的水解圈,即證明了14號(hào)菌能夠產(chǎn)生淀粉水解酶。

      2.2 產(chǎn)脂肪酶菌株的檢測(cè)

      該試驗(yàn)中,細(xì)菌分泌的胞外脂肪酶擴(kuò)散出來(lái),催化培養(yǎng)基中豆油水解成脂肪酸,在中性紅指示劑的作用下,形成紅色的菌落圈。圖2為脂肪培養(yǎng)基,此處為1號(hào)菌株所產(chǎn)生的水解圈,證明了1號(hào)菌株能夠產(chǎn)生脂肪水解酶。圖3為脂肪培養(yǎng)基,此處為9、10、11、12號(hào)菌株產(chǎn)生的水解圈,證明此4株菌能夠產(chǎn)生脂肪水解酶。

      2.3 產(chǎn)酪蛋白酶菌株的檢測(cè)

      基礎(chǔ)培養(yǎng)基為L(zhǎng)B培養(yǎng)基,底物為酪蛋白,將菌株點(diǎn)接到酪蛋白酶檢測(cè)平板上,培養(yǎng)后若菌落周?chē)霈F(xiàn)透明水解圈,則說(shuō)明該菌株能產(chǎn)酪蛋白酶。圖4為酪蛋白培養(yǎng)基,此處為2號(hào)菌株產(chǎn)生的水解圈,證明2號(hào)菌株能夠產(chǎn)生酪蛋白水解酶。圖5為3、7、23號(hào)菌株產(chǎn)生的水解圈。

      2.4 產(chǎn)脲酶菌株的測(cè)定

      以加入酚紅的LB培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,以尿素為底物,接種培養(yǎng)后,若菌落周?chē)霈F(xiàn)透明圈則說(shuō)明該菌株可產(chǎn)脲酶。

      2.5 菌株產(chǎn)酶能力測(cè)定統(tǒng)計(jì)結(jié)果

      由表1可知,在河蟹養(yǎng)殖水域,產(chǎn)蛋白水解酶和脂肪水解酶的細(xì)菌明顯多于產(chǎn)淀粉水解酶和脲酶的細(xì)菌,產(chǎn)淀粉水解酶和脲酶的細(xì)菌數(shù)量相差不大。這可能與河蟹飼料中所含的蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪、粗纖維、礦物質(zhì)與維生素有關(guān),可以根據(jù)細(xì)菌的產(chǎn)酶情況研究選擇合適安全的酶飼料,以更有利于河蟹的生長(zhǎng)繁殖。

      由表2可知,通過(guò)水解圈與菌落直徑的比值,河蟹養(yǎng)殖環(huán)境中,產(chǎn)淀粉水解酶和脲酶水解酶的菌株很少并且D/d值很小,即該菌株產(chǎn)酶活性不高或基本沒(méi)有。相反,產(chǎn)蛋白水解酶和脂肪水解酶的菌株多而且D/d值大,即該菌株產(chǎn)酶活性大。而且9、10、11號(hào)等菌株可以產(chǎn)酪蛋白水解酶和脂肪水解酶,根據(jù)以上數(shù)據(jù),可以有目的地培養(yǎng)一些產(chǎn)酶活性高的菌株(比如2、10、11、12號(hào)菌株)和一些產(chǎn)多種酶的菌株(例如9、10、11號(hào)比較明顯的菌株),以備酶用飼料及酶制劑的進(jìn)一步研究。

      3 結(jié)論與討論

      在LB 培養(yǎng)基基礎(chǔ)上增加酪蛋白、淀粉、脂肪或尿素制成的培養(yǎng)基,當(dāng)培養(yǎng)基上產(chǎn)生水解圈后,則說(shuō)明該種細(xì)菌能夠產(chǎn)生分解酪蛋白等物質(zhì)的水解酶。通過(guò)產(chǎn)生水解圈的數(shù)量可以比較細(xì)菌產(chǎn)生分解該種物質(zhì)的細(xì)菌數(shù)量,通過(guò)測(cè)量水解圈與菌落直徑的比值可以得知該菌株的產(chǎn)酶能力[12]。結(jié)果表明:產(chǎn)蛋白水解酶和脂肪水解酶的細(xì)菌明顯多于產(chǎn)淀粉水解酶和脲酶的細(xì)菌數(shù)量,同時(shí)菌株一般多產(chǎn)蛋白水解酶和脂肪水解酶,少產(chǎn)淀粉水解酶和脲酶,這對(duì)河蟹養(yǎng)殖的酶用飼料具有很大的影響。

      通過(guò)研究河蟹養(yǎng)殖水域中的菌體及產(chǎn)酶情況,可以選擇合適的酶用飼料或酶制劑,幫助河蟹更好的生長(zhǎng)繁殖。再者,根據(jù)菌株產(chǎn)酶情況可以進(jìn)一步培育高產(chǎn)菌株,研究其產(chǎn)酶的最佳工藝條件,為河蟹的生長(zhǎng)和生態(tài)環(huán)境的保護(hù)提供借鑒和幫助,創(chuàng)造更大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。

      4 參考文獻(xiàn)

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