熱必寧口服液中黃芩苷含量

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【摘要】目的建立HPLC法測定熱必寧口服液中黃芩苷的含量。方法采用Waters600高效液相色譜儀，ODSC18分析柱，固定相十八烷基硅膠，流動相為甲醇：水：磷酸（50：30：0.5），流速1.0ml/min，檢測波長278nm，常溫。結果黃芩苷的進樣量在0.218～2.180μg范圍內線性關系良好，r=0.9998；黃芩苷的平均回收率為98.02%，RSD為0.96%（n=5）。結論該方法測定熱必寧口服液中黃芩苷的含量準確、敏感、重復性好。

【關鍵詞】熱必寧口服液；高效液相；黃芩苷；質量標準

【Abstract】ObjectiveTheassayforbaicaliuinrebiningfluidwasexploredinordertocontrolthequalityofthepreparation.MethodsTheRP-HPLCmethodwasemployedtakingODSC18aschromatocolumnandmethanol-water-phosphoricacid(50：30：0.5)asfluidphase，velocityofflowwas1.0ml/min；detectionwavelengthwas278nm.ResultsThelinearconcentrationrangeofbaicalinwas0.218～2.18μg，correlationcoefficientr=0.9998，averagerecoverywas98.02%(RSDwas0.96%，n=5)．ConclusionThismethodishighlysensitive，accurate，selectiveandsuitableforqualitycontrolofrebiningfluid.

【Keywords】baicalin；oralrebiningfluid；HPLC；qualitystandard

熱必寧口服液是湖北省中醫院自行研制的復方制劑，由柴胡、大黃、板藍根、知母、黃芩等九味中藥組成，具有清熱解毒的功效，特別對由病毒、細菌引起的高熱療效顯著。為了控制該制劑的質量，保證臨床用藥的安全有效，我們對熱必寧口服液的質量進行了研究，黃芩為該方的君藥，其主要有效成分為黃芩苷，為了有效控制內在質量，本文采用高效液相色譜法對其中主藥黃芩的有效成分黃芩苷進行了含量測定。

1儀器與試藥

1.1儀器Waters600高效液相色譜儀；Waters2996二極管陣列檢測器；AS-10200型超聲波發聲器；DZF型真空干燥箱（上海浦東躍欣科學儀器廠）；Explorer萬分之一電子分析天平。

1.2樣品與試劑熱必寧口服液（湖北省中醫院制劑室，批號060316，060319，060321，060328，060405），黃芩苷（中國藥品生物制品檢定所110715-200514）甲醇（色譜純）；磷酸（色譜純）。

1.3色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇―水―磷酸（50：30：0.5）為流動相［0.2%的磷酸：甲醇（35：65）］；流速1.0ml/min，進樣量10μl，常溫，檢測波長278nm。

2方法與結果

2.1對照品的制備精密稱取在60℃減壓干燥4h的黃芩苷對照品2.18mg，置10ml容量瓶中，加甲醇定容制成每1ml含（0.218mg/ml）的溶液即得。

2.2標準曲線的制備精密吸取對照品溶液1、2、4、6、8、10μl進樣。以對照品溶液濃度C為橫坐標，峰面積A為縱坐標，進行回歸分析，得到線性方程：y=-60566+3663196x，r=0.9998，表明黃芩苷在進樣量0.218～2.18μg范圍內線性關系良好。見圖1、圖2。

圖1黃芩苷標

準品HPLC圖圖2黃芩苷供

試品HPLC圖2.3供試品的制備取熱必寧口服液適量，過濾，取濾液0.1ml加甲醇15ml搖勻，定容，再用0.45μm的微孔濾膜過濾，取濾液放于冰箱內備用。

2.4空白溶液的配制除藥材黃芩外，按照處方比例，稱取藥材混勻加水適量浸泡30min開始煎煮，藥液沸騰1h后，將煎液濾出，藥渣加水繼續再煎1.5h，合并濾液，將濾液濃縮至約400ml，加入95%的乙醇，使乙醇含量達到60%靜置過夜，取上清液過濾，濾液加熱揮發乙醇至無醇味，加水至1000ml，分裝，灌封，滅菌，即得。

2.5空白干擾實驗按照上述色譜條件，吸取對照品溶液，供試品溶液，空白溶液10μl分別進樣測定，在相同的色譜條件下供試品色譜峰，與對照品色譜峰在相應的位置上有相同保留時間的色譜峰，而空白溶液在此保留時間無峰干擾。

2.6精密度實驗精密吸取黃芩苷對照品溶液5μl（0.218mg/ml），重復進樣5次，根據對黃芩苷峰面積的積分計算。

2.7穩定性測試精密吸取同一供試品溶液5μl，分別在0h、4h、8h、12h、16h、20h后進樣，得黃芩苷的峰面積分別為262128、274202、268022、266357、265741、263579，且峰面積基本不變（平均峰面積為266672），RSD%=1.59。則樣品溶液至少在20h內穩定性良好。

2.8加樣回收率實驗取已知含量的樣品1ml，5份，分別加入到1、2、3、4、5ml的對照品溶液中，平均回收率為98.02%，RSD%=0.957，見表1、表2。表1加樣回收率試驗結果表2加樣回收率實驗

2.9重復性實驗取同一批樣品5份，依法測定含量，平均含量為0.159mg/ml，RSD為1.3%。

2.10樣品測定按照含量測定方法共測定5批樣品，含量結果如表3。表3黃芩苷含量樣品測定

3討論

中藥復方制劑以黃芩苷為質量控制指標的文獻報道較多［1～4］，只是樣品大都經過回流提取步驟，而本文根據黃芩苷的性質及我院制劑制備工藝―水提醇沉，經過濾甲醇定容后直接測定，結果在本實驗條件下得到了較好的分離，此方法簡便，準確，重復性好，空白無干擾，可作為熱必寧口服液中黃芩苷含量測定的定量方法，為醫院制劑熱必寧口服液的質量標準提供了快速準確的測定方法。

【參考文獻】

1褚克丹，邱水生，葉建春.復方黃芩液質量標準研究.中國現代應用藥學，2003，20（2）：143-145.

2張玲莉，彭燕.高效液相色譜法測定黃芩口服液中黃芩苷的含量.中國藥師，2005，8（5）：388-389.

3劉曉玲，趙娟，張裕民.HPLC法測定抗癌口服液中野黃芩苷的含量.中醫藥導報，2005，11（9）：454.

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