馬鈴薯脫毒苗管理技術(shù)論文

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摘要：從培養(yǎng)基制作、溫度控制、瓶裝苗及其污染控制、消毒滅菌和定期檢查等方面介紹了馬鈴薯脫毒苗快繁生產(chǎn)管理技術(shù)，以期為馬鈴薯脫毒苗快繁生產(chǎn)提供參考。

關(guān)鍵詞：馬鈴薯脫毒苗；快繁；管理技術(shù)

隨著高科技的發(fā)展，作為植物營養(yǎng)繁殖的一個新手段，組織培養(yǎng)技術(shù)成為現(xiàn)代生物領(lǐng)域及現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的一項基本操作手段，其繁殖速度是一般常規(guī)方法所不能比的。通過無菌方法進行快繁的方法能在較短的時間和較少的空間內(nèi)由1個個體迅速繁殖大量群體，實驗室脫毒馬鈴薯試管苗的離體繁殖正是借助這一顯著優(yōu)勢在國內(nèi)外種薯生產(chǎn)上得以廣泛利用，是脫毒馬鈴薯原種大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的前提。青海省農(nóng)科院生物中心是青海省最大的脫毒馬鈴薯科研、生產(chǎn)相結(jié)合的經(jīng)濟實體，生產(chǎn)能力達200多萬株脫毒馬鈴薯試管苗，為青海省脫毒馬鈴薯原種生產(chǎn)最大的省級單位。經(jīng)過多年的實際探索及對馬鈴薯實驗室的改進，大幅度增加了脫毒馬鈴薯原種的生產(chǎn)數(shù)量，而脫毒馬鈴薯的優(yōu)勢，即高產(chǎn)和不易腐爛，被農(nóng)民（特別是靠天吃飯及高海拔地區(qū)的農(nóng)民）及市場接受，收到了良好的經(jīng)濟和社會效益，為青海省的經(jīng)濟發(fā)展做出了貢獻。

1培養(yǎng)基及其制作對瓶裝苗的生長影響

1.1培養(yǎng)基材料對試管苗的生長影響

培養(yǎng)基包括大量元素、微量元素、鐵鹽、食用白糖、自來水、瓊脂。試管苗單節(jié)切斷繁殖宜采用固體培養(yǎng)基，如果工作人員在培養(yǎng)基滅菌過程中，不慎放氣不均，一般滅菌后拿出來的培養(yǎng)基過稀（成糊狀），影響接苗質(zhì)量和幼苗生長；相反，如果培養(yǎng)基硬度太大，切斷不易插入培養(yǎng)基中，影響苗切斷與培養(yǎng)基的接觸。

1.2培養(yǎng)基制作對試管苗成活率的影響

在快繁苗時，所需的培養(yǎng)基一般應(yīng)提前2周做，以防使用被污染的培養(yǎng)基，影響試管苗的成活率。如筆者4月中旬快繁大西洋苗時，由于培養(yǎng)基的污染超過了10%，影響很大。另外，培養(yǎng)基的瓶或盒上的水珠影響快繁苗的污染和強壯生長。

2溫度對瓶裝脫毒苗生長的影響

夏天晝長夜短，日光燈照射比冬天短，而自然照射光多，可提高組培瓶苗移栽后的成活率；但夏天比冬天室內(nèi)溫度高，污染增高，所以室內(nèi)需裝空調(diào)。一般溫度應(yīng)控制在20~25℃范圍內(nèi)，溫度高于26℃，則苗頂端易產(chǎn)生燒苗現(xiàn)象，高于33℃，則苗停止生長。另外，瓶中或盒中的培養(yǎng)基要比平時多放，以防抽干盒或瓶中的培養(yǎng)基，影響幼苗的正常生長。生長間的生長架以用玻璃層為宜，因利用散射光可提高組培瓶苗移栽后的成活率。試驗表明，用玻璃作為培養(yǎng)層的生長架比用鐵作為生長架好。用鐵做的生長架，散熱效果比較差，當生長間放滿用鐵做的生長架時，一般早上關(guān)燈后，繼續(xù)讓空調(diào)再開2~3h才能保證整個生長間的溫度較適合幼苗的生長。

3快繁瓶裝苗的控制

在快繁脫毒苗時，瓶中如少放脫毒苗，其長得快，脫毒苗節(jié)間長、葉大且須根發(fā)達；如放多脫毒苗，其長得慢，脫毒苗弱、葉小且挨瓶的苗腐爛。這2種情況對快繁都不利，故快繁苗時，在瓶中放40~50根脫毒苗為宜；同時快繁脫毒苗應(yīng)控制苗的節(jié)間。

4瓶苗污染的控制

在脫毒瓶苗的繼代培養(yǎng)過程中，常因種種原因出現(xiàn)細菌類和真菌類污染，細菌污染苗極弱，且擴繁后下一代大部分表現(xiàn)為細菌污染，在生產(chǎn)中通常用抗生素來處理細菌污染。對于真菌污染的脫毒瓶苗，除嚴格操作規(guī)程外，可在培養(yǎng)基中配制不同濃度多菌靈來減輕瓶苗污染率。最主要是快繁留的基礎(chǔ)脫毒苗沒有細菌和真菌的污染。而對于繼代擴繁4年以上的瓶苗，要定期進行病毒檢測確認是無病毒苗。因此，要定期更新脫毒瓶苗，每年應(yīng)通過剝離莖尖組織的辦法培養(yǎng)新鮮無病毒瓶苗，以確保繼代培養(yǎng)脫毒瓶苗質(zhì)量。

5無菌操作室內(nèi)消毒滅菌

5.1操作前消毒

一是無菌室剛開始工作或間隔1~2個月未進行消毒時，先把高錳酸鉀倒入培養(yǎng)皿，再倒入甲醛，關(guān)閉門窗進行熏蒸消毒，間隔1~2d即可在室內(nèi)工作；二是將工作服、口罩、拖鞋、盛裝75%的酒精瓶、剪刀、鑷子、苗源瓶、快繁瓶等無菌室所需物品放在無菌室固定位置，啟動超凈工作臺，通風殺菌，并將室內(nèi)紫外燈打開消毒，工作人員快速離開無菌室，滅菌25~30min即可。

5.2操作中消毒

工作人員進入隔離間，穿戴好消毒服裝，在組培室用75%的酒精將雙手消毒，再用酒精泡的酒精棉擦超凈工作臺，同時將鑷子、剪刀和支撐干用酒精擦過后，放在加熱器進行5~6s的消毒，并將已挑揀好的無污染的脫毒苗放在超凈工作臺上，先打開滅菌過的快繁瓶放在超凈工作臺上，然后擰開脫毒苗瓶的口，用已滅菌過的鑷子將脫毒苗瓶中的小苗夾出瓶口，只留根部在瓶內(nèi)，用剪刀剪掉根部，然后再用鑷子夾小苗離快繁瓶口1~2cm（注意不要讓小苗挨上快繁瓶瓶口，以防感染），剪帶1片小葉莖放在快繁瓶中。蓋上蓋子，在苗瓶外壁用打號槍注明該品種的編號及快繁日期。

6定期檢查

放在生長間的快繁脫毒苗，一般每隔7d要用稀釋好的清潔爾滅噴撒滅菌，每天早關(guān)燈和晚開燈時，發(fā)現(xiàn)有污染的瓶苗，必須馬上將其拿出生長間，并放入高壓滅菌鍋滅菌，然后用清潔熱水加入適量洗衣粉，用刷子涮洗苗瓶，并換水沖洗，然后倒置木架上晾干水珠待用。健康苗20多天就可快繁或移栽溫室。

7取苗

在取苗時，有時也有真菌污染的脫毒苗，不能作快繁苗但可以作移栽苗。如果下一批苗要得急，取苗的同時需做培養(yǎng)基，若在同一間進行，帶有真菌的脫毒苗被取出時，就會污染正在做的培養(yǎng)基，故應(yīng)分開進行。超級秘書網(wǎng)：