腦出血病患免疫變化規律

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本文作者：周路球馬真石小峰尹夕龍賈軍糾智松陳國昌孫大勇作者單位：廣東省深圳市龍崗中心醫院神經外科

腦出血是腦外科情況最危急、預后也較差的疾患之一，若出血破入腦室還會形成血腫，造成梗阻性腦積水，引起急性顱內壓增高，使患者癥狀迅速惡化，出現腦疝死亡，經搶救存活的患者也常常遺留肢體和語言功能障礙，嚴重威脅著患者的身體健康及生命質量［1］。創傷后免疫功能的改變可以影響機體的防御功能和康復效果。紅細胞除了具有其基本的生理功能外，在機體免疫及防護方面也起到極為重要的作用。本次研究通過觀察腦外傷后患者血液中紅細胞免疫促進因子、免疫抑制因子及T淋巴細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+）免疫黏附功能的變化及規律，了解其與預后的關系，為今后臨床病情判定、預后的預測提供依據。

1對象與方法

1.1研究對象

選取2010年1月～2011年9月到我院就診的腦出血患者64名作為病例組。所有患者的診斷依據第四屆腦血管病學術會議制定的診斷標準［2］，同時配合CT或MRI檢查結果，由兩名主治醫生及以上的醫師確診。病例組腦出血部位分布情況：基底節38例（59.38%）、腦葉15例（23.44%）、腦干6例（9.37%）、小腦5例（7.81%）。神經功能的損傷程度劃分標準依據《腦卒中患者臨床神經功能缺損程度評分標準》［3］，分為輕度20例（31.25%）、中度26例（40.63%）、重度18例（28.12%）。以年齡、性別為匹配條件，選擇健康家屬60例作為對照組。所有的研究對象均簽署知情同意書，并且調查前2周未使用免疫增強劑及免疫抑制劑，排除有可能引起免疫異常的疾病。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑

采用美國Beckman-coulter公司的EpicsImmunologyWorkstation流式細胞分析儀。試劑也采用美國Beckman-coulter公司的三色單抗、生物標記抗小鼠IgG及標準熒光微球。

1.2.2檢測方法

取研究對象清晨空腹靜脈血2ml置于干燥管及抗凝管中混勻，將干燥管中的標本參照文獻［4］提供的方法對紅細胞C3b受體花環率（RBC-C3bRR）、紅細胞免疫復合物花環率（RBC-ICR）、紅細胞免疫促進因子（RFER）、紅細胞免疫抑制因子（RFIR）進行檢測。對抗凝管中的標本進行T細胞亞群的檢測，方法參考文獻［5］：每50μl標本加入5μl的單克隆抗體，打開流式細胞儀及氬離子激光光源（488nm），預熱20min，儀器自動初始化，用標準熒光微球進行光路與流路標準，所有熒光信號的變異系數（CV）均小于2%，在前向散射光（FS）和側向散射光（SS）散點圖中圈定細胞群，選擇淋巴細胞為分析對象，去除細胞碎片，用陰性對照確定熒光陰性范圍及PMT電壓標準，顏色補償，每份標本測定5000個細胞，全部數據用流式細胞儀和軟件SYSTEMⅡ獲取和分析。

1.3統計分析

采用SPSS16.0軟件進行統計分析，計量資料兩組間的比較采用t檢驗，多組間采用方差分析，計數資料的比較采用χ2檢驗。

2結果

2.1研究對象一般情況分析

病例組平均年齡（38.78±11.56）歲，男女性別比為2.76︰1；對照組平均年齡（37.16±10.74）歲，男女性別比為3︰1。兩組的平均年齡及性別分布差異無統計學意義（P﹥0.05）。見表1。

2.2紅細胞免疫黏附功能及紅細胞免疫調節因子比較

病例組與對照組RBC-C3bRR、RBC-ICR、RFER及RFIR的差異有統計學意義（P﹤0.001）見表2；按照神經功能損傷程度分層后比較，不同損傷程度RBC-C3bRR、RBC-ICR、RFER及RFIR的差異也有統計學意義（P﹤0.01）見表3。

2.3T細胞亞群比較

病例組與對照組CD3+、CD4+、CD8+及CD4／CD8的差異有統計學意義（P﹤0.01）見表4；按照神經功能損傷程度分層后比較，不同損傷程度CD3+、CD4+、CD8+及CD4／CD8的差異也有統計學意義（P﹤0.01）見表5。

3討論

腦出血在腦外科較為常見，常威脅患者生命，出血破入腦室還會形成血腫，造成梗阻性腦積水，引起急性顱內壓增高，使患者癥狀迅速惡化，出現腦疝死亡，經搶救存活的患者也常常遺留肢體和語言功能障礙，因此對病情及預后盡早判斷有非常重要的意義。腦出血后導致細胞免疫功能變化，其機制一般認為是由于腦出血可引起下丘腦-垂體-腎上腺軸功能活動增強，產生大量的促腎上腺皮質激素，通過其對外周血紅細胞或T淋巴細胞上的高親和力受體直接抑制免疫功能，促腎上腺皮質激素能增強皮質醇的生成，是免疫細胞活化的抑制劑，可以抑制細胞免疫［6］。

紅細胞最主要的免疫功能是免疫黏附作用，紅細胞表面存在C3b受體，可黏附循環中的抗原-抗體-補體復合物（IC），旁路激活黏附補體的抗原，使IC不易在組織中沉積，從而失去了沉積于血管內皮細胞或基底膜所產生的致病性。紅細胞被認為是對異物和IC起免疫黏附作用的主要細胞，紅細胞也參與機體免疫功能的調控［7］。本研究結果發現，病例組與對照組RBC-C3bRR、RBC-ICR、RFER及RFIR的差異有統計學意義；按照神經功能損傷程度分層后比較，不同損傷程度RBC-C3bRR、RBC-ICR、RFER及RFIR的差異也有統計學意義，屬于繼發性紅細胞免疫功能低下，其原因這可能是因為腦出血患者血液中出現大量循環免疫復合物（CIC）。腦外傷出血部位釋放的抗原產生抗體、病原體等進入血液，與紅細胞上的補體受體相結合，從而導致紅細胞清除免疫復合物能力下降，這些抗原抗體復合物也可沉積在腦血管網中，釋放血管活性物質，引起腦血管痙攣，或激活補體系統加重腦血管的損害［8］。

此外，病例組與對照組CD3+、CD4+、CD8+及CD4／CD8的差異有統計學意義，按照神經功能損傷程度分層后比較，不同損傷程度CD3+、CD4+、CD8+及CD4／CD8的差異也有統計學意義，腦出血患者CD3+、CD4+、CD4／CD8低于對照組，并且隨病情加重下降趨勢更加明顯，提示腦出血患者細胞免疫功能隨病情的加重也逐漸下降。

綜上所述，腦出血患者的紅細胞免疫功能及T細胞免疫功能均出現降低，這些指標對判斷病情嚴重程度及預后有一定的臨床意義。