色譜柱

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色譜柱范文第1篇

關鍵詞：色譜柱 維護與保養 高壓液相色譜 應用 

        0 引言

        色譜作為一種分離技術與方法，自本世紀初起已經有100多年的歷史了，現在已經成為分析化學學科中的一個重要的分支。在人類進入新時代之際，人們面臨著在信息科學、生命科學、材料科學、環境科學等領域的快速發展的挑戰，在這些領域人才的需求成為國家高度發展的至關重要的因素。而色譜技術是生命科學、材料科學、環境科學必不可少的手段和工具。根據最近的統計在全世界各類分析儀器中氣象色譜儀和液相色譜儀的營銷總額占25%-30%。

        科學技術的發展，使得色譜技術也得到進一步的發展，不斷有新的聯用的技術得到應用。生物醫學的發展，也不斷要求高靈敏和高選擇性的方法對研究的對象進行定性和定量的研究。

        1 色譜柱的相關性質

        1.1 色譜柱的定義：裝填有固定相用以分離混合組分的柱管。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。

        1.2 分類：色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。液相色譜通常均采用填充柱。色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相，以及色譜柱的制備和操作條件。簡單而言：常見的分配住填料：碳十八柱（ODS/C18)、碳八柱（Octy了/C8）、碳六柱（Hexyl/C6）、碳四柱（Butyl/C4）、碳一注（Methyl/C1）、陰離子交換柱（SAX)、陽離子交換柱（SCX）、苯基柱（Phenyl）、氨基柱（Amino/NH2）、氰基柱（Cyano/CN/Nitrile）。常見的吸附柱填料：硅膠柱

        色譜柱的選擇會直接影響混合物中組分的分離。舉例來講：對于填充柱而言，可選擇的固定相較多，柱容量較大，但是受柱長的限制，分離能力有限，主要應用于簡單化合物的分離。

        2 色譜柱的維護與保養

        2.1 色譜柱的維護。我們在使用新的色譜柱應該在我們自己的液相色譜儀上進行性能測試，即使用色譜柱附帶的檢驗報告上測試條件和樣品來測定該色譜柱的柱效。并且，在以后的使用中，應時常對色譜柱進行測試。而且在使用的過程中常常有堵塞的現象，造成這種現象的主要原因是①溶劑中的不溶物②樣品中的不溶物③泵進樣器等中的不溶物④柱內不溶物的形成等。如果當色譜柱堵塞以后我們可以對色譜柱進行修復，首先，使用含鹽緩沖液后（如離子對試劑）應用溶解性強的溶劑（如水）進行沖洗。其次，先斷開檢測器，然后用對來自樣品中的物質有強溶解性的溶劑進行沖洗，對于反相色譜柱，可使用甲醇、乙睛、四氫呋喃、氯仿、庚烷等，在此條件下，應避免溶劑的pH低于2或高于8。最后如果經過上述還是沒有修復，色譜柱壓力還是沒有下降，則要斷開檢測器，將色譜柱反方向放置，然后檢查柱壓，若壓力穩定下降，則保持色譜柱反方向連接，用低于0.5 ml/min 流速沖洗一小時。如果壓力不下降，則要看內置過濾器是否被堵塞，如果被堵塞應沖洗或更換，若進口端的填料發生堵塞，柱子將不可能被徹底恢復，只能通過去掉進口端的部分填料，重新填充進行有限的柱效恢復。而且修復的厚度是2-5mm。

        2.2 色譜柱的保養。色譜柱在使用前，最好進行柱的性能測試，并將結果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是最佳條件)，只有這樣，測得的結果才有可比性。我們在對色譜柱使用前進行測試以后，我們要根據不同的情況對色譜柱進行保養：①反相色譜柱每天實驗后的保養：使用緩沖液或含鹽的流動相，實驗完成后應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘，洗掉色譜柱中的鹽，再用甲醇沖洗30分鐘。注意：不能用純水沖洗柱子，應該在水中加入10%的甲醇，防止將填料沖塌陷。②長期保存色譜柱：如色譜柱要長時間保存，必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中，正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中，離子交換柱可以儲存于水（含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞）中，并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度最好是室溫。

    概括起來就是：①柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強烈震動；②當柱子和色譜儀聯結時，閥件或管路一定要清洗干凈；③要注意流動相的脫氣；④避免使用高粘度的溶劑作為流動相；⑤進樣樣品要提純；⑥嚴格控制進樣量；⑦每天分析工作結束后，要清洗進樣閥中殘留的樣品；⑧每天分析測定結束后，都要用適當的溶劑來清洗柱；⑨若分析柱長期不使用，應用適當有機溶劑保存并封閉。

        3 色譜柱的維護與保養在高壓液相色譜中的應用

        高效液相色譜(HPLC)是20世紀60年代后期發展起來的分離分析技術，是現代分離測定的重要手段。問世以來，因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析高沸點但不能氣化的熱不穩定生理活性物質的特點而被廣泛應用于生物化學、藥物及臨床分析。高效液相色譜柱是消耗品，會隨使用時間或進樣的次數增加，出現色譜峰高降低，峰寬加大或出現肩峰，柱效下降。需要定期進行徹底清洗和再生，不同的色譜柱清洗方法各不相同比如：

色譜柱范文第2篇

【摘要】 建立了雞組織中甲基鹽霉素的高效液相色譜柱后衍生化分析方法。樣品經異辛烷提取，離心后上層有機相過硅膠固相萃取小柱，洗脫液濃縮后用V(甲醇)∶V(水)=90∶10混合液溶解。采用Inertsil ODS3 C18柱，以V(甲醇): V(乙酸)∶V(水)=94∶3∶3為流動相，香草醛為衍生劑進行高效液相色譜柱后衍生分析，520 nm檢測，外標法定量。方法檢出限為6 μg/kg; 定量限為20 μg/kg; 添加濃度在20~1800 μg/kg范圍內，平均添加回收率為764%~931%; 批內相對標準偏差(RSD)在26%~89%之間; 批間相對標準偏差(RSD)在47%~97%之間。樣品濃度在0．07~10．0 mg/L范圍內與峰面積呈良好的線性關系，r>09993。

【關鍵詞】 雞組織，固相萃取，甲基鹽霉素，柱后衍生，殘留

Abstract A method was developed for determining residual narasin in chicken tissues by HPLC with postcolumn derivatization. The samples were extracted with isooctane. Further cleanup was performed on LCsi cartridge after centrifugation. Then the eluent was dried by nitrogen and residues were dissolved in methanol， water mixture (90∶10 v/v). The samples were analyzed on an Inertsil ODS3 C18 column with a mixture of methanolacetic acidwater as the mobile phase and vanillin as the derivatization reagent. The detection wavelength was 520 nm. The samples were quantified with the external standard calibration curve method. The limit of detection and the limit of quantification for narasin in chicken tissues were 60 μg/kg and 20 μg/kg， respectively. The average recoveries of narasin in chicken tissues were 764 %－931 %， the intraassay relative standard deviations were 26 %－89% and the interassay relative standard deviations were 47%－97% at spiked levels of 20－1800 μg/kg. There was a good linear correlation (the calibration coefficient is above 09993) between the peak areas and concentration of narasin in the range of 70－10000 μg/L.

Keywords Chicken tissues， solid phase extraction， narasin， postcolumn derivatization， residue

1 引 言

甲基鹽霉素(narasin)是金色鏈霉菌（streptomyces aureofaciens）的發酵產物，屬于聚醚類抗生素，常作為藥物添加劑混料飼喂來預防雞球蟲病[1]。但是這種用藥方式易導致動物性食品中藥物殘留和球蟲出現抗藥性[2]，從而影響畜禽產品的質量安全和動物生產。我國已制定了甲基鹽霉素在雞組織中的最高殘留限量，其中雞肌肉、雞皮/脂肪和雞肝中最高殘留限量分別為600、1200和1800 μg/kg。因此，有必要建立雞組織中甲基鹽霉素殘留分析方法。

對莫能菌素和鹽霉素這兩種聚醚類抗生素的殘留分析主要采用柱前衍生HPLC法[3]和柱后HPLC法[4~6]；而甲基鹽霉素的殘留量分析主要采用時間分辨熒光免疫分析（TRFIA）[7，8]、柱后HPLC法[9~11]、LC/MS法[12，13]和LC/MS/MS法[14~16]，涉及的對象有飼料、雞肉、雞內臟、雞蛋和魚組織等[7~16]。本實驗根據甲基鹽霉素的化學性質建立了柱后衍生分析方法，采用異辛烷為提取劑，步驟相對簡單，提取液可直接過固相萃取小柱。本方法靈敏度高、準確且穩定。

2 實驗部分

21 儀器與試劑

2690996高效液相色譜儀，配柱后衍生裝置和二極管陣列檢測器（Waters公司）；Inertsil ODS3 C18色譜柱(25 cm×46 mm，5μm)；離心機（Sigma公司）；UltraTyrrax T25型勻質器（德國）；硅膠SPE小柱（500 mg，3 mL）。甲基鹽霉素標準品（Sigma 公司）。香草醛（Fluka公司）；衍生液配制：量取5 mL H2SO4，緩慢加入到250 mL甲醇中，置冰水浴中緩慢加入20 g香草醛，混勻，脫氣5 min后避光保存，臨用現配；異辛烷和甲醇均為色譜純(Fisher公司)；乙酸和濃H2SO4為分析純（北京化學試劑公司）。

22 色譜分離條件

流動相：V(甲醇)∶V(乙酸)∶V(水)=94∶3∶3；流速： 08 mL/min；衍生液流速：04 mL/min；反應溫度： 95 ℃；檢測波長： 520 nm；進樣量： 100 μL；柱溫： 30 ℃。

23 樣品處理

231 樣品中甲基鹽霉素的提取

稱取組織樣品(50±005）g于50 mL聚四氟乙烯離心管中，加入10 mL蒸餾水，以10000 r/min以上的速度均質60 s，再加入10 mL異辛烷，旋渦混合3 min左右，以3000 r/min離心5 min，吸取上層有機相，備用。然后加入10 mL異辛烷，按上述步驟重復提取一次，取上層有機相，備用，合并兩次離心后的有機相。

232 固相萃取凈化

用5 mL異辛烷預洗硅膠小柱，不使流干，加入231所得的上清液，然后再用5 mL異辛烷淋洗，過柱流速控制在1~2 mL/min，然后抽干小柱，再用2 mL甲醇洗脫，于40℃水浴中氮氣吹干后用10 mL V(甲醇)∶V(水)=90∶10混合液溶解，高效液相色譜儀測定。

24 線性實驗

稱取100 mg甲基鹽霉素于100 mL棕色容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得100 mg/L甲基鹽霉素標準儲備液。吸取標準儲備液10 mL于100 mL棕色容量瓶中，得10 mg/L標準工作液。將標準工作液用流動相稀釋成70、250、500、1000和5000 μg/L的標準工作溶液和10 mg/L標準工作溶液一起進行HPLC分析。每個濃度進樣6次，以標準工作液的濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。

25 添加回收率實驗

添加回收率實驗添加濃度為20、100、300和600 μg/kg（雞肉），20、100、600和1800 μg/kg（雞肝），20、100、300和600 μg/kg（雞腎）及20、100、600和1200 μg/kg（雞脂肪）。稱樣后加入標準溶液，渦旋混勻放置05 h后進行樣品處理，其它步驟同23。

3 結果與討論

31 色譜條件的建立

本實驗色譜條件基本參照文獻[4]進行分析，其中4種組織的添加濃度均為20 μg/kg，所得圖譜見圖1。從圖1可知，甲基鹽霉素出峰時間為656 min，峰形較好，在空白組織中未見干擾。

32 提取和凈化條件的選擇

甲醇、乙睛、丙酮、異辛烷和正已烷可用于提取聚醚類藥物，但為減少后續凈化的壓力，通常選擇極性相對較低的異辛烷、氯仿、乙酸乙酯等。本實驗對異辛烷的提取條件進行了優化，發現當雞肉中添加濃度為5000 μg/kg時，提取兩次（每次10 mL）直接進樣扣除空白后的回收率>95%。通常，選擇正相固相萃取凈化動物組織中的聚醚類藥物，有氧化鋁小柱和硅膠小柱。本實驗在參考文獻[4]的凈化方法和不影響方法靈敏度的基礎上，將10 mL二氯甲烷洗滌液改為5 mL異辛烷，6 mL二氯甲烷/甲醇洗脫液改為2 mL甲醇，節約了溶劑，縮短了實驗時間。33 衍生化條件的優化

固定流動相流速，以4種雞組織樣品為基質，考察衍生液的流速對信噪的影響。實驗發現，當衍生液流速為01~04 mL/min時，各種組織的添加樣品（濃度100 μg/kg）的信噪比逐步增加；流速為04~08 mL/min時，信噪比均無明顯變化。實驗選擇衍生液的流速為04 mL/min。

34 線性實驗

根據24線性實驗方法，在07~100 mg/L范圍內，以峰面積對甲基鹽霉素濃度作圖，所得標準曲線方程為y=1058x+105，相關系數均大于09993，說明本方法適用于甲基鹽霉素的定量分析。

35 方法的檢出限、回收率和精密度

采用在空白樣品中添加標準溶液的方法，對4種雞組織進行了4次添加回收率重復實驗，每次每個濃度點進行5次重復實驗，實驗結果見表1。從表1可見，雞組織中各濃度點平均添加回收率在764%~931%之間。批內相對標準偏差(RSD)在26%~89%之間，批間相對標準偏差(RSD)在47%~97%之間，可見本方法具有較好的準確性和穩定性。甲基鹽霉素在4種雞組織中的檢出限均為60 μg/kg (S/N=3)，定量限均為200 μg/kg (S/N=10)。表1 雞組織中甲基鹽霉素的平均回收率和相對標準偏差（略）

36 方法應用

利用本方法對甲基鹽霉素預混劑在雞體內休藥期進行了檢測。休藥0 h，雞肉中含甲基鹽霉素(852±26) μg/kg（n=3）;休藥48 h后，雞肉中未檢出甲基鹽霉素。

參考文獻

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色譜柱范文第3篇

【摘要】 目的測定分析天竺葵莖中的揮發油成分及組成。方法采用索氏提取儀萃取后，用GC/MS聯用儀測定天竺葵莖中的揮發油成分。結果共鑒定出三十多種化學成分，其中含量較大的有順-9-二十三烯、1-二十二烯、二十一烷、山崳醇、維生素E、二十四烷、1-二十六烷醇、順-9-二十烯、1-十八烷烯、磷酸三(正)丁酯、油酸及正二十醇等，共占分離出物質總量的72.44%。結論天竺葵莖中的揮發油成分復雜，且以烯類、烷類及醇類成分居多。

【關鍵詞】 天竺葵; 揮發油成分; 氣相色譜-質譜聯用分析

Abstract：ObjectiveTo measure and analyze the components of essential oils from Geranium stem.MethodsIts chemical components were extracted by Soxhlet extraction equipment and were determined by GC/MS.Results The components contained 30 chemical compositions， in which were rich in (Z)-9-Tricosene， Vitamin， Heneicosane， 1-Docosene， 1-Docosanol， Tetracosane， 1-Hexacosanol， 9-Tricosenes， 1-Octadecene， Tributyl phosphate， (E)-9-Octadecenoicacid， 1-Eicosanol， accouating for 72.44%.Conclusion Alkenes， alkanes， and Butanols are made up the bulk in 30 kinds of components.

Key words： Geranium; Components of essential oil; GC/MS

天竺葵Pelargonium hortorum，又名洋繡球，牻牛兒苗科天竺葵屬。天竺葵是一種重要的中藥材，半灌木型，莖肉質，葉對生或互生，通體有暗紅色蹄紋[1，2]。天竺葵精油含量較高，其精油有多種作用，如平衡內分泌，治療靜脈曲張，創傷止血促進愈合，對扁桃腺炎、咳嗽、肌肉厥痙有很好的治療效果，還能刺激毛發生長，對癌癥患者也有一定的幫助[3，4]。

同一植物不同部位及同一植株不同時間精油成分均不相同[5]。現今對天竺葵揮發性物質的研究大多僅限于葉片[3～6]，而天竺葵通體均含芳香氣味。本實驗利用氣相色譜-質譜聯用法對天竺葵莖中所含揮發性物質的化學成分進行檢測，對更好地利用天竺葵精油具有重要意義。

1 試材與儀器

1.1 試材天竺葵莖。

1.2 儀器GC-MS氣相色譜-質譜聯用儀(HP689000/5973，美國惠普公司)。索氏提取儀(SZT-06A，蘇州市天威儀器有限公司)。

2 方法

2.1 提取方法取新鮮植株莖30 g，稱重后置于烘箱殺青，于70℃烘干至恒重。以乙醚為溶劑，采用索式萃取法萃取新鮮天竺葵莖中精油，利用GC-MS分析儀對精油成分進行分析，同時做空白1份。

將裝有樣品的濾紙包用長鑷子放入抽提筒中，注入的50 ml的無水乙醚。連接好提取儀各部分，在恒溫水浴中進行抽提，調節水溫在73.5℃，抽提1 h，除去乙醚后濃縮備用。

2.2 分析方法氣相色譜-質譜條件：玻璃毛細管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)，柱前壓68.95 kPa;程序升溫條件：起始溫度180℃，恒溫2 min，然后以20℃·min-1速度升至230℃，恒溫2 min，然后以25℃·min-1速度升至270℃，恒溫15 min，進樣口溫度：280℃;載氣：高純氦氣;柱前壓71 kPa;流速為1 ml·min-1 ;分流比50∶1，接口溫度：280℃;電離方式：EI;電子能量：70 eV;離子源溫度230℃;四極桿溫度：150℃;調諧方式：標準調諧;質量掃描方式：SCAN;溶劑延遲：3 min;掃描范圍：10～550 amu;電子倍增器電壓：1 635 V。微進樣器：5 μl;進樣量：4 μl。

3 結果

氣相色譜分析樣品時，樣品是以氣體形式從柱子前端引入，其中于液體固定相中有一定溶解度的組分便按平衡定律在液相、氣體之間進行分配， 然后載體氮氣通過柱子進行洗脫，各組分沿柱子移動的速度取決于它們在液體固定相中的溶解程度，各組分的分配系數差異大，則有利于分離。而那些在液體固定相中溶解度可忽略的組分則很快流過柱體。因此各組分在色譜柱中的運行經過一定的柱長后便彼此分離，按順序離開色譜柱進入檢測器，產生的離子流訊號經放大后，在記錄器上描繪出各組分的色譜峰。

本實驗共分離出四十余個峰，經總離子流色譜圖的面積歸一化得到各成分的質量分數。通過對各色譜峰的質譜分析和計算機標準譜庫檢索，并參考相應化合物在類似色譜分析條件下的保留時間，共鑒定出30個化合物。氣相色譜分析見表1。

天竺葵莖精油所含化學成分主要有烷、醇和烯等。其中烷占18.17%，醇占18.97%，烯占47.13%。質量分數較高的有順-9-二十三烯(22.44%)，1-二十二烯(16.03%)，二十一烷(6.36%)，山崳醇(4.03%)，維生素E(3.69%)，二十四烷(3.66%)，1-二十六烷醇(3.19%)，順-9-二十烯(2.77%)，1-十八烷烯(2.73%)，磷酸三(正)丁酯(2.68%)，油酸(2.65%)，正二十醇 (2.21%)。這12種物質占總量的72.44%。

4 小結

植物精油在多種領域可以很好地發揮作用。在醫學領域，植物精油具有去痛、降壓、消炎、提高免疫力、抗菌、保健等功效。如本研究所提取的正二十二醇是2000年世界首次上市的化學結構及作用機制全新的廣譜抗病毒藥物，主要通過干擾病毒包膜與宿主細胞膜的融合而發揮作用。美國食品與藥物管理局批準10%正二十二醇乳膏用于顏面復發性單純皰疹的治療，該藥在艾滋病相關的Kaposi肉瘤和燒傷領域亦有潛在的應用價值。此外，植物精油對害蟲生物活性很高，不易產生抗藥性，對人畜毒性很小，不污染環境等優點，是一種很好的生物農藥原料。本實驗所提取的順-9-二十三烯(含量為22.44%)是一種高效家蠅外激素，可調節其取食生殖行為來誘殺蒼蠅[7]。同時實驗提取出的磷酸三(正)丁酯對皮膚和呼吸道有強烈刺激作用，具有全身致毒作用，因此在實際應用時應注意去除有毒物質。

表1 天竺葵莖中揮發油成分分析峰號化合物名稱分子式分子量/Da時間t/min含量

本實驗所采用的天竺葵生性健壯，生長速度較快，很少病蟲害，適應性強。現今對天竺葵揮發性物質的開發利用大多僅限于葉片，本研究采用索氏提取儀提取天竺葵莖中的精油，氣相色譜-質譜儀檢測化學成分，對天竺葵莖中有益成分的開發提供了科學依據。

參考文獻

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色譜柱范文第4篇

關鍵詞：胺鮮酯 氣相色譜 毛細管柱分析

胺鮮酯具有廣譜和突破性效果的高能植物生長調節劑。它能提高植物過氧化物酶和硝酸還原酶的活性，提高葉綠素的含量加快光合速度，促進植物細胞的分裂和伸長，促進根系的發育，調節體內養分的平衡。已有報道采用填充柱和毛細管柱氣相色譜法測定胺鮮酯制劑的報道[1，2]，但未見關于胺鮮酯原藥的分析方法報道，本文采用毛細管柱氣相色譜法定量分析胺鮮酯原藥及5%胺鮮酯水劑中胺鮮酯含量，此方法操作簡便、快速、定量準確。

一、實驗部分

1.試劑和溶液

丙酮：色譜純；胺鮮酯標樣：已知質量分數≥990%（由國家農藥檢測中心提供）：胺鮮酯原油和5%胺鮮酯水劑（廣東植物龍生物技術有限公司生產）；內標物：鄰苯二甲酸二乙酯（色譜純）；內標溶液：稱取鄰苯二甲酸二乙酯4.5g （精確到0.0001g），用丙酮溶解并稀釋至250mL，混勻，密封備用。

2.儀器

3.色譜條件

4.測定步驟

4.1標樣溶液的配制

準確稱取胺鮮酯標樣0.1g（精確到0.0001g）于25mL容量瓶中，用移液管準確加入5.00mL內標溶液，用丙酮溶解并稀釋至刻度，混勻。

4.2試樣溶液的配制

準確稱取5%胺鮮酯水劑2.0g（精確到0.0001g）于25mL容量瓶中，用移液管準確加入5.00mL內標溶液，再用丙酮溶解并稀釋至刻度，混勻。

4.3測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，計算各針相對響應值，待相鄰兩針響應值變化小于1.5%時，按照標樣溶液，試樣溶液，試樣溶液，標樣溶液的順序進行測定。

二、 結果與討論

1.色譜柱條件的選擇

1.1色譜柱的選擇

1.2內標物的選擇

分別以鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸二戊酯、鄰苯二甲酸二乙酯、正十二烷、正十五烷、正二十烷等作內標，發現以鄰苯二甲酸二乙酯作內標，在胺鮮酯后出峰，與樣品中有效成分峰分離清晰，峰形對稱，分析時間適中，無雜質干擾。

2.線性關系的測定

稱取標樣1.2900g于25ml的容量瓶中，丙酮溶解、定容。再分別移取1、1.5、2、2.5、3ml上述液于25ml容量瓶中，用同一根移液管準確加入5ml內標液，然后用丙酮定容到25ml，搖勻，在上述色譜條件下進行測定，以胺鮮酯與內標物的質量比為橫坐標，相應的峰面積比為縱坐標，繪制標準曲線。得到胺鮮酯線性方程為y=0.0120+1.0556x，相關系數r為0.999。

3.精密度測定

方法精密度的測定通過對同一樣品進行5次平行測定，測得的胺鮮酯質量分數的標準偏差為0.036，變異系數為1.78%。

4.準確度測定

采用標準加入法，稱取5份已測胺鮮酯質量分數的試樣，分別加入一定質量的標準樣品，按測定方法進行測定，測得胺鮮酯回收率在97.6～102.4%之間。

三、結論

綜上所述，該方法具有定量準確、重復性好、分析速度快、線性關系良好、操作簡便等特點，用于胺鮮酯原藥和制劑的含量測定是一種較為理想的分析方法。

參考文獻

色譜柱范文第5篇

關鍵詞 三重四級桿質譜；多氯萘；多層硅膠柱

1 引 言

多氯萘（Polychlorinated naphthalenes，PCNs）是一類理化性質與二噁英相似的持久性有機污染物（Persistent organic pollutants， POPs），根據萘環上氯原子取代的數目和位置不同，共有75種同類物[1]。2011年，POPs審查委員會認為二至八氯代萘滿足《關于持久性有機污染物的斯德哥爾摩公約》附件D具體規定的篩選標準，具有持久性、生物蓄積性、遠距離環境遷移潛力和生物毒性，已被提議列入候選POPs[2]。近年的研究表明，PCNs是全球環境中普遍存在的一類POPs[1，3～6]。

針對環境樣品中PCNs的檢測，目前還沒有國際公認的標準分析方法。早期采用氣相色譜帶電子捕獲檢測器測定PCNs，隨著質譜技術的發展，逐漸開始采用氣相色譜質譜（EI或NICI源）法[7，8]。近年來，高分辨氣相色譜串聯高分辨質譜兼具色譜的高分離度和質譜的高分辨能力，已在環境樣品PCNs分析中得到廣泛應用[6，9～11]。然而，高分辨質譜儀的購置和維護成本昂貴、操作復雜、對儀器使用人員要求較高[12]，限制了環境樣品中PCNs的分析。氣相色譜串聯三重四級桿質譜（GCQqQMS/MS）在使用成本和操作維護方面均與一般低分辨質譜較接近，其多重反應監測（MRM）模式可有效去除儀器檢測中的背景干擾，降低儀器的檢出限，適合超痕量POPs的分析[13～15]。

利用氣相色譜串聯三重四級桿質譜測定環境樣品中的PCNs已有報道。Teng等[16]采用TSQ Quantum XLS三重四級桿氣質聯用儀帶TR5MS（30 m×0.25 mm i.d.×0.25 μm）毛細管色譜柱，測定了四至八氯代萘共6種PCNs同類物。該研究僅采用SIM模式，即單四級桿對PCNs進行測定，并未發揮三重四級桿質譜MRM模式的優勢。劉芷彤等[17]采用78907000B三重四級桿氣相氣譜質譜聯用儀， 配DB5MS（60 m×0.25 mm i.d.×0.25 μm）毛細管色譜柱，在MRM模式下測定了一至八氯代萘共20種PCNs同類物，且采用穩定同位素標記的PCNs作為內標，建立了同位素稀釋氣相色譜串聯三重四級桿質譜法測定環境樣品中的PCNs，檢出限為0.04～0.48 μg/L。該研究的缺點在于采用3種層析柱對PCNs進行凈化，方法凈化效果良好，但過程繁瑣、耗時較長。此外，該研究利用碳13同位素標記的1，3，5，7四氯代萘（IUPAC #42）作為一氯代萘（#2）、二氯代萘（#6）和三氯代萘（#13）的內標，由于一至三氯代萘的揮發性高于四氯代萘，將導致一至三氯代萘定量結果偏低。

本研究以土壤和沉積物為研究對象，基于PCNs在多層硅膠層析柱上的流出曲線、氘代一氯萘（#2）的使用、60 m DB5MS和30 m RtβDEXcst兩根毛細管色譜柱等，建立了加速溶劑萃取多層硅膠柱凈化同位素稀釋氣相色譜串聯三重四級桿質譜測定土壤和沉積物中PCNs的分析方法。本方法簡化了樣品前處理過程，減少了有機溶劑的使用量，操作簡便、靈敏度高，能夠滿足土壤和沉積物中痕量PCNs的定性和定量分析的需求。 2 實驗部分

2.1 儀器與試劑

78907000B型氣相色譜串聯三重四級桿質譜（安捷倫公司）；DB5MS毛細管色譜柱 （60 m×0.25 mm i.d.×0.25 μm，J&W公司），RtβDEXcst（30 m×0.25 mm ×0.25 μm，RESTEK公司）；ASE 300型加速溶劑萃取儀（戴安公司）； R215型旋轉蒸發濃縮儀（步琪公司）；CVE3100型平行蒸發濃縮儀（Eyala公司）；NEVAP112型氮吹儀（Organomation Associates公司）。

PCNs標準品：PCNMXA（包括#2， #6， #13， #28， #52， #66， #73和#75）和PCNMXC（包括#27， #36， #46， #48， #50， #53， #69和#72），購自Wellington Laboratories公司；ECN2641（#42）、ECN2664（#68）、ECN5102（包括13C #27， #42， #52， #67， #73和#75）、DLM2005S（D7#2）和ECN5260（13C#64），購自Cambridge Isotope Laboratories公司；Halowax 1014（10 μg/mL，環己烷）購自Dr. Ehrenstorfer GmbH公司。

商品多層硅膠柱（Multilayer silica gel， MSG）：Presep 29141653，H2SO4含量為13%（和光純藥工業株式會社）；硅藻土（化學純，國藥集團化學試劑有限公司）；正己烷、二氯甲烷（農殘級， J.T. Baker公司）；癸烷（特級，和光純藥工業株式會社）。

2.2 流出曲線的制作

商品多層硅膠柱使用前以正己烷浸潤，用空氣泵趕盡柱內的氣泡后，用50 mL正己烷進行預淋洗，淋洗液棄去。在柱上添加500 μL Halowax 1014，并用150 mL 正己烷進行淋洗，每10 mL淋洗液單獨收集于刻度試管中，用平行蒸發濃縮儀濃縮至約1.0 mL，添加回收率內標ECN5260，混勻后待測。

2.3 樣品前處理

供試土壤和沉積物樣品采于江蘇省昆山市景楓公園和蘇州市糖坊灣橋。分別稱取供試樣品和硅藻土各10.0 g左右，稱取銅粉約5.0 g，將上述物質混勻裝填入ASE萃取池中，加入ECN5102和DLM2005S標記物后進行萃取。加速溶劑萃取儀條件：溶劑為正己烷二氯甲烷（1 ∶ 1， V/V）混合溶液，加熱溫度100 ℃，10.4 MPa（1500 psi）壓力，預加熱平衡時間5 min，靜態萃取時間5 min，淋洗液體積為池體積的40%，吹掃時間100 s，循環兩次。

收集到的萃取液用旋轉蒸發濃縮儀濃縮至約2 mL，濃縮后的萃取液過商品多層硅膠柱進行凈化，淋洗液為150 mL 正己烷，凈化后的萃取液經旋轉蒸發濃縮后，進一步氮吹濃縮至約200 μL，添加回收率內標ECN5260，混勻后待測。

2.4 樣品分析

標準曲線的配制：由低至高共配制CSL， CS1， CS2， CS3， CS4和CS5共6個濃度點，對應PCNs的濃度分別為0.5， 1.0， 5.0， 20， 80和240 μg/L，ECN5102和DLM2005S標記物濃度為100 μg/L，回收率內標ECN5260濃度為100 μg/L，溶劑為癸烷。其中CSL供測定方法檢出限和定量限使用。

氣相色譜進樣方式為不分流進樣，進樣量為1.0 μL。色譜柱所用載氣為高純氦氣，恒流模式，流速為1.0 mL/min。DB5MS色譜柱的條件：進樣口溫度為280℃；傳輸線溫度為280 ℃；程序升溫條件為80 ℃保持2 min，以20 ℃/min升至180 ℃，保持1 min，以2 ℃/min升至255 ℃，再以5 ℃/min升至280 ℃， 保持9.5 min，總運行時間為60 min；RtβDEXcst色譜柱的條件：進樣口溫度為220 ℃；傳輸線溫度為220 ℃；程序升溫條件為110℃保持0.5 min，以20 ℃/min升至160 ℃，再以0.5 ℃/min升至225 ℃，保持20 min，總運行時間為150 min。