前言:想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎?我們特意為您整理了5篇解救美羊羊范文,相信會為您的寫作帶來幫助,發現更多的寫作思路和靈感。
關鍵詞:媒介素養;媒介素養教育;大學生;高職生
一、關于我國大學生媒介素養狀況的調查研究
2012年,尹力發表了《回顧與反思:國內高校媒介素養教育研究述評》一文,文章中回顧與反思了我國近些年的高校媒介素養教育研究成果,文章主要從高校媒介素養的實證調研、途徑與模式、高校媒介教育的不同環境下的狀況以及其他學科與高校媒介素養教育的交叉性與互動性等四個維度進行了闡述,在探討不足的同時又提出了我國高校媒介素養教育的展望和建議[2]。《2010年以來國內大學生媒介素養教育研究綜述》一文的作者陳勇分析了我國未來媒介素養研究的趨勢,他指出我國的大學生媒介素養教育研究仍處于發展階段,全面發展的態勢已比較明朗,未來也將會出現多元化的研究方法、領域和視覺[3]。姜燕在《微博時代高職院校媒介素養教育探討》的文章中指出媒介素養在微博時代的表現是傳統媒介素養的延伸,可以通過選擇、批判、理解、評估、反應和思辨及生產和創造海量的微博碎片化信息來綜合體現[4]。《網絡新聞影響下大學生網絡媒介素養教育研究》是由孟維穎撰寫的碩士學位論文,她在文中指出媒介素養教育在紛繁復雜的網絡媒介環境中的重要性,需要我們以學習為主要陣地來抵制在理解、使用和駕馭傳媒及內容的偏差[5]。《媒介化生存——中國青年媒體素質研究》是我國首批關于媒介素養教育的專著之一,在書中學者呂巧平對集中在兩個城市的8所大學和1996名在校大學生進行了實證調查研究,探討了在大學生中開展媒介素養教育的必要性和可行性,這一專著的面世,積極推動了我國高校媒介素養教育的研究實踐,同時對我國高校媒介素養教育的具體實施具有重要的探索意義。
二、關于媒介素養教育本土化研究
蔡尚偉、李朗以中國大眾傳媒的發展歷程為線索撰寫了《1949年以前的中國媒介素養教育萌芽——媒介素養教育的本土化考察》一文,文章探討了我國大眾媒介意識從初步培養、正式開始到發展形勢,探討了學術界在以前關于媒介素養和媒介素養教育的研究,文中也初步考察了我國1949年以前的媒介素養萌芽,以此主線來探索研究我國媒介素養的本土化研究道路[6]。《文化視野中的主體性建構——對中國青少年媒介素養教育本土化的思考》的作者牛鴻英指出,青少年能從實用層面來了解、消費和運用媒介不足以體現中國青少年媒介素養的基本目標,還應該引導青少年通過運用媒介,充分利用媒介來促進形成他們獨特文化,成為具有文化價值觀念的主體性的人。中國青少年媒介素養教育更應該承載民族復興的重任,這才是我國的本土化策略,而不是我們偏安一隅的被動防守,更不是僭越全球的妄自尊大[7]。趙世環認為:“媒介素養教育應盡快與國際接軌,成為大學的通識教育[8]。”孫麗娜等學者發表的《大學生媒介素養教育的國際視野與本土化研究》一文中提出要從本土化人的視角,立足我國國情,對我國的媒介素養教育展開研究,要完善中國特色的媒介素養教育體系,并把“保護主義”與“非保護主義”相結合[9]。學者李冬霞在《我國網民新媒介素養研究綜述》中指出,目前學術界尋求媒介素養教育理論的突破和創新應該立足于教育學、心理學、政治學、社會學等多個學科領域[10]。目前,西方媒介素養教育的優秀理論研究促進了我國的大學生媒介素養教育,我們也根據我國的國情進行了本土化的改造,體現出了媒介素養教育普適性和特殊性相融合的特征[11]。
關鍵詞:新傳媒時代;媒介;人力資源;培訓
在社會化媒體盛行的當今社會,除了資本、技術設備、受眾市場這些競爭因素外,人才也是媒介發展過程中至關重要的因素,扮演著中流砥柱的角色,“媒體竟爭的關鍵和核心是人,媒體競爭就是人才競爭”[1]這已是業界的共識。但是我國媒介行業在對待人才上一直是“重管理,輕培養”。
一、當前我國媒介人才培養的現狀概述
以來,我國文化傳媒事業實行“事業性質,企業管理”的發展模式,受體制優勢和國家政策的扶持,各媒介組織對人才大都是按照國家事業單位的辦法來進行管理,對于媒介人才培養缺乏足夠的認識。
近些年,各種新媒體異軍突起,打破了以往的傳媒格局。以微博、微信為代表的社會媒體迅猛發展,它不僅改變了傳統的傳播模式,也大大解放了受眾的被動地位,這使得各個媒介對受眾市場的爭奪更加激烈;同時,中外合作交流與經濟貿易的發展,國外許多文化產品和媒介企業紛紛進入中國傳媒市場,這更加激發了各傳媒集團間的競爭。
鑒于此,媒介集團乃至整個媒介行業開始從各個方面進行改革,以提高自身的競爭力,作為媒介行業發展的核心動力,媒介人才受到業界的重視,對于媒介優秀人才爭奪也更加的激烈。但是因為早期經驗的不足,許多媒介機構在人才培養上一般都是直接借鑒或套用其他產業的管理辦法,早在21世紀之初,就有學者指出:“許多新聞單位中的人事部門觀念保守,而且還在沿用幾十年一貫制的人事組織管理模式,人力資源管理已成為傳媒業的薄弱環節。”[2]雖然也取得了一些成效,但是隨著媒介產業的迅速發展,也暴露了諸多的局限性,許都研究成果大都是側重于已有人才資源的管理和整合上,而對于潛在的媒介人才資源開發和培訓討論不足,整個行業缺乏自成體系的理論指導,這種“重管理,輕培養”的模式依然盛行。
二、媒介人才“重管理、輕培養”原因分析
社會化媒體環境里媒介人才培養的重要性日益凸顯,但是目前我國對媒介人才培訓有所欠缺,這種現實存在的矛盾,不利于我國媒介產業的發展和壯大。
一方面媒介人才培訓成本較高,作為企業化管理的媒介組織因為考慮到成本投入,很少會組織專門的培養,即使有其范圍也是有限。而從媒介人才自身來說,他們的文化素質、專業技能的起點普遍較高,鑒于時間、精力等各種因素的限制,就業之后個人從事脫產培訓的意愿相對較低,但是媒介行業和組織又要求媒介人才不斷的學習,掌握新技能,這使得兩者存在一定的矛盾性。有學者分析指出:許多媒介人才因為媒介組織忽視人才培訓或者不重視人才潛能積累和開發,以致得不到應有的培養,最后不得不選擇離開,或投奔重視人才培養的媒介,或者離職深造。[3]另一方面,我國的媒介組織在人力資源的管理上仍然實行的是雙軌制和行政化層級管理的模式。這使得媒介組織的大部分的精力和培訓都投放在少數體制內的人員上面,而對于數量眾多的編外人員仍然側重于管理上。傳統觀念認為許多被選為培訓對象的媒介人才,或是單純的為了獲取某種技能,或是為了獲取某種利益,作為一項任務而應付草草的應付了之,很難實現培訓真正的效果和目的。
三、提高媒介人才培養的策略
加強對媒介人力資源的培訓既是完善媒介人力資源管理的重要內容,也是提升自身競爭力的重要方面。有學者指出:媒介行業是一項依靠智力的工作,任何一家媒體一旦形成人才優勢,勢必會在短時間內創造出強大的影響力。”[4]具體來說,可以從以下幾個方面進行媒介人才培養。
1、改變傳統觀念,提高對人才培養的重視度
當今,無論是媒介管理者還是普通工作人員乃至媒介行業都應該轉變那種人才培養是“賠本的買賣”的觀念,提高對人才培養重要性的認識,雙方都要舍得花錢花時間。對于人才培養的目的和所能帶來競爭優勢都有一個清晰的認識。因為現代意義上的人才培養不僅僅是現有人才在業務和專業技能的提升,而是對已有媒介人才資源的再度開發,是媒介組織或對人才的一種肯定與厚望,以實現媒介組織與人員在情感、事業、價值等層面上的高度融合。從管理層面上講,這也是激勵機制的一種形式,更有助于提高員工對企業組織的忠誠度。
2、增強培養功能意識,謀求與媒介集團的“三維”契合
眾所周知,媒介也是一個更新換代很快的信息產業,這需要員工緊跟時代的步伐,掌握最新的行業動態,而人才培養是他們快速獲取知識的最佳途徑。作為參加培養的媒介人才,應當適應培養功能角色的轉變,不僅僅是把培養局限在獲取某種特定技能上,而是從自身的實際情出發,結合自己的業務需要,有計劃有方向的去學習、總結,以實現知識技能的積累和創造;同時樹立危機意識,積極的應對未來工作中出現的各種風險,既增強現有的業務能力,又為能滿足以后的工作需求,通過培養實現與媒介組織在“感情、事業、價值”三個維度上的契合。
3、加強與高校的合作,提高自身的理論水平
高校是培養媒介人力資源的搖籃,也是媒介產業發展的后援地。據不完全統計,目前國內注冊高校中開設新聞學及相關專業的院校約占85%。雖然一些學者認為我國高校的新聞傳播教育事業尚有一些弊端,但是高校在媒介人才培養上仍然具有其他媒介機構無法比擬的優勢。現代高校積不僅聚了傳媒業內諸多的學術大家,而且還是許多前言理論的開拓者,是相關理論的集散地。媒介集團可以和具有媒介專業方面研究的高校合作,共同培養人才,使參加培訓的人員通過參與高校開辦的學術探討和講座,或是系統的課程學習,進行“回爐”再教育,甚于還能與業內的專家學者交流討論,借鑒和學習他們的研究成果和經驗,結合自身的工作實踐,不斷提升理論修養,為以后的實際工作提供理論指導和支持。
現代意義上的媒介人才已不是單純的指從事媒介工作的相關人員,而是指從事媒介生產和管理的人員的腦力和體力的總和。而優秀的人才資源是長期學習和積累的結果,制定合理的人才培訓戰略規劃,提高新聞從業人員的綜合素質,是媒介產業科學發展的有力保證。[5]我國的媒介人才培養應該得到長期深入的規劃。(作者單位:湖南大學新聞傳播與影視文化藝術學院)
參考文獻:
[1] 高德蒙.傳媒人力資源市場化的困境[J].傳媒,2004,(2).
[2] 曹鵬.人力資源管理已是傳媒業最薄弱的環節[J].新聞記者,2002,(7).
[3] 宋寒.媒介人才流失的原因及對策[J].傳媒觀察,2009(06)
(大連海洋大學,遼寧 大連 116023)
摘要:采用中性蛋白酶對海馬粉進行酶解獲得酶解液,并對酶解液的抗氧化活性、抑菌活性和抗疲勞活性進行了測定。實驗結果表明,海馬酶解液對DPPH的清除率為:雄海馬45.2%,雌海馬36%;清除羥自由基率為:雄海馬81.7%,雌海馬80.0%;超氧陰離子清除率為:雄海馬46.0%,雌海馬34.4%。海馬酶解液同時具有抑菌活性,通過濾紙片法可以看出海馬酶解液對大腸桿菌、產氣桿菌和變形桿菌的抑制性比較強,而對金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的抑制性較弱。海馬酶解液還具有抗疲勞活性,通過小鼠負重游泳實驗檢測海馬中性蛋白酶酶解液的抗疲勞活性,實驗組游泳時間平均為143 min,而對照組的游泳時間為91 min,相比之下實驗組比對照組高出52 min。進一步的研究結果還表明,海馬酶解液具有增加小鼠游泳耐力、增加小鼠血清中SOD活力、降低血清中MDA和尿素以及降低血乳酸的作用。
關鍵詞 :海馬;中性蛋白酶;抗氧化活性;抑菌活性;抗疲勞活性
利用海洋生物資源進行藥物開發的系統研究始于20世紀60年代。70-80年代開始了大規模篩選,并發現了多種有生物活性的化合物,到20世紀90年代,則有多個海洋生物新藥進入臨床實驗。海馬(Hippocampus)作為刺魚目海龍科動物,還是一種具有較高經濟價值的名貴中藥,具有強身健體、補腎壯陽、舒筋活絡、消炎止痛、鎮靜安神、止咳平喘等藥用功能,在中藥經典著作中均有記載,歐洲從18世紀就已經開始將海馬入藥。海馬中含有豐富的氨基酸、蛋白質、微量元素及高碳多烯不飽和脂肪酸;具有抗癌作用、性激素樣作用、抗疲勞作用和提高機體免疫力、提高心肌細胞的收縮功能等,有待在食品、醫藥等方面進行研究開發[1]。
目前,市場上有許多關于海馬壯陽功效的產品,如泌陽春海馬膠囊,實驗表明具有明顯提高機體性功能的藥理作用[1]。但是關于海馬的抗氧化活性和抗疲勞活性報道的較少,報道較多的是海馬的性激素樣作用,例如用5種海馬的乙醇提取物,研究表明,灌服5種海馬的乙醇提取物后,雄性小鼠的數和成活率增加,但對正常小鼠的性腺和性器官幾乎無影響。
本實驗先利用中性蛋白酶對海馬進行酶解,對海馬酶解液進行抗氧化活性、抑菌活性和抗疲勞活性分別進行了測定。
1實驗部分
1.1儀器與試劑
1.1.1試劑與材料海馬(克氏海馬)為雌、雄海馬,均購自大連美羅大藥房;硫酸銅、硫酸鉀、濃硫酸、氫氧化鈉、硼酸溶液、冰醋酸均為分析純;中性蛋白酶(250 g,Beijing Solarbio);乙腈(色譜純,百靈威科技有限公司); N,N-二甲基甲酰胺(分析純,天津博迪化工股份有限公司)。
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus),變形桿菌(Bacterium Proteus),枯草桿菌(Bacillus Subtilis),大腸桿菌(Escherichia coli),產氣桿菌(clostridium perfingens)均來自大連海洋大學食品工程學院微生物實驗室;超氧化物歧化酶(SOD)測定試劑盒(生產批號20130406)、丙二醛(MDA)測定試劑盒(生產批號20130406)、尿素氮(BUN)測定試劑盒(生產批號20130410)、乳酸(LD)測定試劑盒(生產批號20130417) 購于南京建成生物研究所。DPPH,濃H2SO4,Tris-HCl緩沖溶液,95%乙醇,水楊酸,鹽酸,鄰苯三酚,磷酸二氫鈉,磷酸氫二鈉,中性蛋白酶,胰蛋白酶酶解,牛肉膏,瓊脂,無水乙醇,氯化鈉,葡萄糖,鹽酸,氫氧化鈉等均為分析純,20只昆明小鼠(清潔級,大連醫科大學提供),PBS緩沖液,鼠糧,木屑,鉛絲。緩沖溶液和實驗室用水均用Milli-Q凈化處理器制備。
1.1.2儀器與設備Milli-Q超純水凈化儀(Millipore公司,美國)。高速多功能粉碎機(上海冰都有限公司)。Pb-10型pH計(德國賽得利斯Sartorius)。TGL-16M高速臺式冷凍離心機(長沙湘儀離心機儀器有限公司),數顯恒溫水浴鍋(常州國華電器有限公司)。消化爐(Buchi Digestion Unit K-424),蒸餾儀(Buchi Distillation Unit K-350)。SP-752紫外分光光度計(上海光譜有限公司),旋轉蒸發儀(上海亞榮生化儀器廠),YXQ-SG42-280手提式壓力蒸汽滅菌鍋,超凈工作臺(SW-CJ-1F),電熱恒溫鼓風干燥箱(上海躍進醫療器械廠)。
1.2海馬樣品的制備及溶液配制方法
將海馬雌雄分開,剪碎,用高速粉碎機將其粉碎,得到雌雄海馬粉末樣品,碎屑,稱重,將其裝入棕色廣口瓶中,備用。
準確稱取0.500 0 g的海馬粉末,加入配制好的磷酸鹽緩沖溶液100 mL,加入一定量的酶,在水浴鍋里反應一定時間,反應完后放入100 ℃的水浴鍋中滅酶10 min,等冷卻到室溫后將酶解液過0.45 μm濾膜過濾,4 ℃冰箱中保存,作為樣品儲備液備用。
1.3海馬中蛋白質以及灰分含量的測定
1.3.1海馬中蛋白質含量的測定將海馬樣品進行消化:將樣品進行分組,雄海馬粉末,雄海馬碎屑,雌海馬粉末,雌海馬碎屑。分別準確稱取海馬樣品0.500 0 g,小心移入干燥潔凈的500 mL消化管,然后加入研細的硫酸銅0.500 0 g,硫酸鉀10.000 0 g和濃硫酸20 mL,空白組除了不加樣品外其他和實驗組一樣,輕輕搖勻后放入電路中加熱,至液體變為藍綠色透明后停止。
樣品的蒸餾與滴定:分別將消化完全的消化液冷卻后,完全轉入100 mL容量瓶中,加蒸餾水至刻度,搖勻。準確移取消化稀釋液10 mL于蒸餾儀內的消化管中,再加入10 mL,400 g/L氫氧化鈉溶液使其呈強堿性。蒸餾儀中的冷凝管下端預先插入盛有10 mL,40 g/L硼酸吸收液的液面下,吸收液中帶有混合指示劑,蒸餾5 min后停止。餾出液用0.1 mol/L HCl標準溶液滴定至微紅色為終點。同時做空白試驗。
結果計算:海馬種中蛋白質的含量按下式計算:
式中: c——HCl標準溶液的濃度,mol/L;
V1——滴定樣品吸收液時消耗鹽酸標準溶液體積,mL;
V2——滴定空白吸收液時消耗鹽酸標準溶液體積,mL;
m——樣品質量,g;
M——0.5N2摩爾質量,14.01g/moL;
F——氮換算為蛋白質的系數(F=6.25)。
1.3.2海馬中灰分含量的測定分別準確稱取雄海馬粉末、碎屑各1 g,雌海馬粉末、碎屑各1 g于已知質量的坩堝中,經預處理后的海馬置于調溫電爐上以小火加熱使試樣充分碳化至無煙為止。將碳化好裝有試樣的坩堝用坩堝鉗移至高溫爐中,在(550±25)℃下灼燒4 h,待高溫爐爐溫降至200 ℃以下后取出坩堝,冷卻至室溫。
結果計算:海馬中灰分的含量按下式計算:
灰分
式中:X——樣品中總灰分的含量;
m1——空坩堝的質量,g;
m2——樣品加空坩堝的質量,g;
m3——殘灰加空坩堝的質量,g。
1.4海馬酶解液的活性研究
1.4.1海馬酶解液抗氧化活性的研究海馬酶解液清除DPPH的能力:準確量取2 mL海馬酶解液,然后加入2 mL所配制的DPPH溶液并混合均勻后,25 ℃水浴反應30 min,移入比色皿中517 nm測其吸光度Ai,同時測定2 mL樣液加入2 mL乙醇25 ℃水浴反應30 min后的吸光度Aj,2 mL的DPPH加2 mL的乙醇25 ℃反應30 min的吸光度A0。則海馬酶解液的DPPH清除率按下式計算:
式中:Ai——樣品加入DPPH后溶液的吸光度。
Aj——樣品加入乙醇后溶液的吸光度。
Ao——空白溶液的吸光度。
海馬酶解液清除羥自由基的能力:準確量取海馬酶解液2 mL,然后加入3 mmol/L的FeSO4 2 mL,6 mmol/L的水楊酸-乙醇2 mL,最后加入質量分數為3.75%的雙氧水2 mL啟動反應,在37 ℃反應30 min,以蒸餾水為參比,在510 nm下測吸光度,考慮到樣本本身的吸光度Ai,取蒸餾水2 mL,3 mmol/L的FeSO4 2 mL,6 mmol/L的水楊酸-乙醇2 mL和樣液2 mL作為本底吸收Aj, 取蒸餾水2 mL,3 mmol/L的FeSO4 2 mL,6 mmol/L的水楊酸-乙醇2 mL,最后加入質量分數為3.75%的雙氧水2 mL啟動反應,37 ℃反應30 min的吸光度A0。則海馬酶解液對羥基自由基的清除率按下式計算:
式中:Ai——樣品中加入FeSO4,水楊酸-乙醇和雙氧水后溶液的吸光度。
Aj——樣品中加入FeSO4,水楊酸-乙醇后溶液的吸光度,即本底吸收。
Ao——不加樣品,空白溶液的吸光度。
海馬酶解液清除超氧離子自由基的能力:取海馬酶解液1 mL加入pH為8.2,0.05 mol/L的tris-HCl緩沖溶液4.5 mL,在25 ℃水浴中保溫20 min后,加入0.5 mL 25 mmol/L鄰苯三酚,混勻后,在25 ℃中保溫5 min,用1 mL 8 mmol/L的HCl終止反應。以蒸餾水作為空白對照為A0,在320 nm下測吸光度值Ai,考慮到樣本本身的吸光度,加入0.05 mol/L的tris-HCl緩沖溶液4.5 mL,在25 ℃水浴中保溫20 min后,加入0.5 mL的水,混勻后,在25 ℃中保溫5 min,用1 mL 8 mmol/L的HCl終止反應,在320 nm下測吸光度值Aj。則海馬酶解液對超氧陰離子自由基的清除率按下式計算:
式中:Ai——樣品加入tris-HCl緩沖溶液,鄰苯三酚和HCl后溶液的吸光度。
Aj——樣品加入tris-HCl緩沖溶液,HCl后溶液的吸光度,即本底吸收。
Ao——不加樣品,空白溶液的吸光度。
1.4.2海馬酶解液的抑菌活性
培養基的制作:取牛肉膏3 g,蛋白胨10 g,NaCl 5 g,瓊脂15~20 g,水1 L,調pH值到7.0~7.2之間,加熱融化,然后在121 ℃滅菌20 min后備用。
菌懸液的配制:從經過活化的菌體斜面上挑取一環菌體接種于相應的液體培養基上,放入恒溫震蕩培養箱中培養至對數生長期,分別吸取各供試液0.5 mL,加入無菌水稀釋,備用。
平涂法接種:在無菌操作臺里,將融化好的培養基均勻的倒在平板上,等培養基冷卻好后,在培養皿的底部用記號筆劃出均勻的區域,點燃酒精燈,將三角玻璃棒進行滅菌,在將酒精燈旁分別用移液槍取出100 μL的五種菌懸液,用三角玻璃棒將菌懸液均勻的涂布在培養基上。
濾紙片法測海馬酶解液的抑菌活性:經平涂接種發后,當培養基上的菌懸液完全滲透到培養基上時,用無菌鑷子將小濾紙片輕輕的貼在平板上,濾紙片一旦貼上就不可拿起,然后取酶解液樣品和75%乙醇(作為陽性對照)各10 μL滴在濾紙片上,每個平板貼6張濾紙片,一張為空白對照,每張濾紙片的間距不得少于24 mm。待干后將放有樣品的培養皿倒過來放在恒溫培養箱里培養24 h后觀察抑菌圈的大小。
1.4.3海馬酶解液的抗疲勞活性實驗動物的飼養與給藥:昆明種小鼠20只,體重18~22 g。隨機分為兩組,分組后飼養觀察3 d,剔除不合格個體后按小鼠體重平均分為兩組給藥,空白對照組灌胃PBS緩沖液0.2 mL/d,陽性對照組灌胃中性蛋白酶的海馬酶解液0.2 mL/d。連續灌胃15 d,實驗期間小鼠自由攝食飲水。
酶解液對小鼠游泳時間的影響以及體內指標的變化:給藥第15 d后,末次灌胃半小時后進行負重游泳實驗。小鼠負重為小鼠體重5%的鉛絲,將兩組小鼠分別放入兩個水溫(25±1) ℃、水深40 cm的水槽中同時游泳,記錄小鼠從入水至運動疲勞發生時的游泳時間。以小鼠頭部沒入水面以下7 s不再上浮判定為疲勞。
1.4.3.1小鼠血清SOD和MDA的測定小鼠連續灌胃15 d,在末次灌胃30 min后,小鼠自由游泳5 min后取出,斷頭取血。血樣置冰箱靜置后,3 500 r/min離心10 min,取上清液,分別按照SOD測定試劑盒MDA測定試劑盒說明書方法測定實驗組和對照組血清中SOD和MDA含量。
1.4.3.2小鼠肌乳酸、血清尿素含量的計算取斷頭取血的血樣,3 500 r/min離心10 min,取上清液,按照LD測定試劑盒說明書方法測定LD。按照BUN測定試劑盒說明書方法測定斷頭取血所得的血清中BUN含量。
2結果與討論
2.1海馬中蛋白質含量測定
海馬中蛋白質含量測定結果見表1,由結果可以看出雄海馬粉末蛋白質含量為55.83%,雌海馬粉末的蛋白質含量為49.00%。蛋白質在人體含量的多少決定了物質營養價值的高低的重要指標,從表中可以看出海馬蛋白質含量高達52?42%,但是本實驗采用的蛋白質含量的測定方法為凱氏定氮法,屬于元素分析的范疇,因此,從測定結果看蛋白質含量較高,但是考慮到海馬體內還含有其他的含氮生物分子,該結果只是作為隨后的氨基酸分析的依據。
2.2海馬中灰分含量測定
海馬中灰分含量測定結果見表2。結果表明,雌雄海馬的灰分分別為12.3%,12.6%。雌雄海馬的灰分含量相差不大,雌雄海馬灰分的平均含量為12.45%。
2.3海馬中性蛋白酶酶解液的活性研究
2.3.1海馬酶解液抗氧化活性
2.3.1.1海馬酶解液對DPPH的清除率從表3可以看出海馬酶解液對DPPH有一定的清除能力,其清除能力與多肽和水解的氨基酸有關。其中,雄海馬的中性蛋白酶酶解液對DPPH的平均清除率為45.2%;雌海馬的中性蛋白酶酶解液對DPPH的平均清除率為36.0%。
2.3.1.2海馬酶解液對羥基自由基的清除率通過表4可以看出海馬酶解液對·OH有顯著的清除效果。其中,雄海馬的中性蛋白酶酶解液對·OH的清除率為81.7%;雌海馬的中性蛋白酶酶解液對·OH的清除率為80.03%;可以看出,雄海馬酶解液對·OH的清除率要好于雌海馬酶解液。
2.3.1.3海馬酶解液對超氧陰離子自由基的清除率通過表5可以看出,海馬酶解對O2-有一定的清除能力。其中,雄海馬的中性蛋白酶酶解液對O2-的清除率為46.0%;雌海馬的中性蛋白酶酶解液對O2-的清除率為34.4%。通過比較表3-12兩組數據可以看出,雄海馬酶解液對O2-的清除率要高于雌海馬酶解液。
2.3.2抑菌活性實驗結果通過表6的數據可以看出,海馬酶解液對大腸桿菌、產氣桿菌和變形桿菌的抑制性比較強,而對金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的抑制性不是很強。其中對變形桿菌抑制作用最強的是雄海馬的中性蛋白酶酶解液;對枯草桿菌抑制作用最強的是雄海馬的中性蛋白酶酶解液;對產氣桿菌的抑制,雌雄海馬的中性蛋白酶酶解液作用強度基本相同;對大腸桿菌的抑制作用最強的是雄海馬的中性蛋白酶酶解液;但是每一種樣品都不可能對所有菌種均有抑制作用,整體來看海馬中性蛋白酶酶解液有一定的抑菌活性,可以用于進一步的研究。
從上面四組表格可以看出這樣一個共性:雄海馬的抗氧化活性和抑菌活性均優于雌海馬,原因可能是雄海馬有育兒的義務,體內的優質蛋白要高與雌海馬。這與前面測得的雄海馬的蛋白質含量高于雌海馬的結果是一致的。
2.3.3抗疲勞活性實驗結果灌服海馬酶解液對小鼠游泳時間的影響見表7,可以看出,連續灌服海馬酶解液15 d對小鼠的體重略有變化,但是不是很顯著。從表中可以看出,灌服海馬酶解液的實驗組小鼠的游泳時間達到143 min,極顯著高與對照組93 min。小鼠游泳時間的延長,表明海馬酶解液能延緩運動性疲勞出現的時間。但是僅憑運動時間還不足以說明海馬酶解液具有運動性抗疲勞的作用,還需要一些生化指標來說明。
2.3.3.1海馬酶解液對小鼠血清SOD、MDA的影響總超氧化物歧化酶(Total Superoxide Dismutase,T-SOD)是一種新型的酶制劑,廣泛存在于需氧原核生物和真核生物中,能夠清除體內的活性氧自由基。在機體代謝過程中會產生大量的活性氧和自由基,它可攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸,引起脂質過氧化作用,并因此形成脂質過氧化物。如醛基、酮基、羥基以及新的氧自由基等。可見超氧化物歧化酶對機體起到保護免受損傷的作用。同時可測定丙二醛(Maleic Dialdehyde,MDA)的含量以此來反映機體脂質過氧化的程度,間接地反映出細胞損傷的程度。實驗結果見表8。
從表8的數據可知,實驗組小鼠血清中SOD活力比對照組高了13.5%。實驗組小鼠血清中MDA含量比對照組降低了42.53%。運動可以引起脂質過氧化反應從而產生自由基,自由基對肌肉細胞造成損害,從而產生疲勞。SOD酶能清除超氧陰離子自由基(O2-·),保護細胞免受損傷,因此能夠降低疲勞的程度。灌服海馬酶解液的小鼠血清中SOD含量明顯增加,因此有助于減少自由基的堆積,延緩疲勞。MDA是脂質自由基氧化產物之一,它的高低間接反應了機體細胞受自由基攻擊的嚴重程度。灌服海馬酶解液的小鼠血清中MDA含量的減少,也表明海馬酶解液有助于降低自由基氧化過程,抵抗機體的疲勞。因此,灌服海馬酶解液的小鼠延緩了疲勞的出現。
2.3.3.2海馬酶解液對小鼠肌乳酸含量及血清尿素的影響尿素是人體內蛋白代謝的主要終產物,它構成了血液中絕大部分的非蛋白氮。血中尿素氮來源于肝臟,通過腎臟隨尿液排除體外。腎臟功能衰竭、腎炎、泌尿道梗阻等可使血液尿素氮含量升高。而乳酸含量越多,疲勞程度越重[2]。結果見表9。
從表9的數據可知,實驗組小鼠乳酸含量比對照組降低4.8%。實驗組小鼠血清尿素含量比對照組降低3.0%。動物劇烈運動后,無氧糖酵解過程產生的乳酸堆積,是產生疲勞的一個重要原因。灌服海馬酶解液的實驗組乳酸堆積程度小于對照組,提示海馬酶解液具有加速乳酸清除代謝的作用。血清中尿素含量隨著運動負荷的增加而增加,機體對負荷適應能力越強,血清中尿素含量就越少。實驗結果表明,灌服海馬酶解液的實驗組血清中尿素含量低于對照組,表明海馬酶解液在一定程度上可以提高小鼠運動負荷能力,抵抗疲勞。
3結論
海馬的粉末經過中性蛋白酶酶解后含有豐富的多肽和氨基酸,這些多肽和氨基酸具有抗氧化活性。實驗證明海馬酶解液對DPPH的清除率為:雄海馬45.2%,雌海馬36%;清除羥自由基率為:雄海馬81.7%,雌海馬80.0%;超氧陰離子清除率為:雄海馬46.0%,雌海馬34.4%。海馬酶解液同時具有抑菌活性。通過濾紙片法可以看出海馬酶解液對大腸桿菌,產氣桿菌和變形桿菌的抑制性比較強,而對金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的抑制性不是很強。海馬酶解液還具有抗疲勞活性。通過小鼠負重游泳實驗檢測海馬中性蛋白酶酶解液的抗疲勞活性,實驗組游泳時間平均為143 min,而對照組的游泳時間為91 min,相比之下實驗組比對照組高出52 min。研究結果還表明了海馬酶解液具有增加小鼠游泳耐力、增加小鼠血清中SOD活力、降低血清中MDA和尿素以及降低血乳酸的作用。實驗結果表明,海馬可作為海洋藥物開發的潛在優質原料。
參考文獻:
[1]
黃建設,龍麗娟. 海洋天然產物及其生理活性的研究進展[J].海洋通報,2001,20 (4):83-90
1.對當前教育改革創新的要求。媒介現已滲入社會的各個方面,對人們生活的影響有目共睹。然而,在迎接多媒體網絡信息時代到來的同時,應站在歷史的角度,辯證地看待傳統教育,提出教育改革的新思路。媒介素養教育就是為適應時代需求而生的教育改革新思路、新理念。今天如果我們缺乏對媒介作用的認識,我們就不可能對當前世界政治發展進程、經濟發展進程、文化特點乃至我們自己,甚至對現行的教育有個比較清醒的認識。
2.未成年人離不開媒介。青少年已經成為我國網民中的主力軍,是各家網絡和網絡商家的目標受眾群。2006年7月,中國互聯網絡信息中心(CNNIC)在京“第十八次中國互聯網絡發展狀況統計報告”,報告顯示,截至2006年6月30日止,我國上網用戶總數為12300萬。從網民結構上看,網民中18~24歲的青年人所占比例最高,達到38.4%;而18歲以下的青少年就占到了14.9%。媒介對未成年人產生的直接或間接影響是巨大的。傳統社會里,未成年人的社會學習和教育主要依靠家庭和學校,而在現代社會,這一社會化的過程則有很大改變,媒體從某種程度上取代了家庭和學校,幫助完成這一社會化的過程。現在的孩童多數是在電視機前、電腦前度過童年和青少年時期的。近年人們對媒體給孩子們造成的不良影響表現出憂心忡忡,公共輿論普遍認為孩子出現的早熟、消費主義、暴力、價值觀混亂等不良傾向,媒介有著不可推卸的責任。美國研究人員發現,1歲至3歲的兒童電視看得越多,到了7歲時,注意力不集中的情況就越嚴重。網絡媒介對現代文化的塑造和人們價值觀念的形成起到不可估量的作用,青少年因缺乏及時的引導和有效教育,從而患上了“道德缺血癥”、“法律癡呆癥”和“網絡癡迷癥”。面對這些頑癥,治愈他們的有效方案就是通過媒介素養教育的途徑,賦權于青少年,使其擁有較好的網絡素養。有了較好的網絡素養,青少年可具備理解當代文化的能力和解析網絡信息的掌控能力;有了網絡素養,青少年好似穿上了“防彈衣”。它能減少網絡不良信息的傷害,網絡素養賦予廣大青少年良好的判斷力、思辨力,以及生存于網絡時代的技能,從而成為積極的網絡使用者。
3.青少年本身的心理和行為特征。由于青少年對客觀世界和自我心理世界缺乏足夠的認識和分析判斷能力,思考上也具有較大的非理性,因而會產生缺乏思考的膚淺行為和過激行為。比如:熱衷于追逐新事物,沉湎于網絡游戲、叛逆行為,與家長老師對立,使用暴力解決問題,甚至出現性道德滑坡走上犯罪道路。媒介素養教育以培養人思辨能力和積極參與能力為宗旨,通過接受媒介素養教育作為媒介的消費者,青年人面對媒介不僅能具備解釋媒體和做出明智的判斷的能力,而且能自己動手制作媒介產品,從而成為積極的、能力不俗的社會參與者。
二、關于開展中學生媒介素養教育的建議
1.借鑒加拿大媒介素養教育的成功實踐。加拿大是世界上為數不多的多元文化國家,加拿大各省都已經將媒介素養教育納入學校課程教育計劃中。加拿大媒介素養的成功實踐對我國有著強烈的教育意義。加拿大的媒介素養教育主要包括:一項是培養學生的“自我認同能力”,即幫助他們區分虛擬與現實、個人與世界的關系,認識媒體價值和自我價值,并懂得自我價值不應為媒體所主導。同時,還要增強學生作為媒介消費者的自覺意識。另一項是培養學生的“公民意識”。
2.對未成年人要有科學準確的認識。對未成年人進行媒介素養教育,首先要對他們有科學準確的認識。要認識到未成年人群體是社會生產的生力軍和后備力量,兒童和青少年的概念具有基礎性和未來性,他們身上具有天然的發展性和進步性,所以我們要以發展的視角觀察他們的特性、需求和問題。傳統的觀念對社會總體進行人群劃分,一直將未成年人置于社會弱勢群置。在社會發展進程中,青少年面臨著許許多多的困惑、限制、壓力和選擇,缺乏參與社會的有效途徑和經驗,因此媒介素養教育要賦權于他們,通過他們接觸媒體、思考媒體、解讀媒介訊息、參與制作媒介產品的實際經驗,發揮他們的能動性和潛在能力。
【摘要】 目的探討牡蠣酶解液的抗氧化活性。方法用普魯士藍反應法測定牡蠣酶解液還原能力,在DPPH體系、Fenton體系和鄰苯三酚自氧化體系中分別檢測牡蠣酶解液清除二苯代苦味酰自由基(DPPH·)、羥基自由基(·OH)和超氧陰離子(O2―·)的能力,并考察牡蠣酶解液在Fe2+誘發卵黃脂蛋白過不飽和脂肪酸(PUFA)過氧化體系中的抗氧化作用。結果牡蠣酶解液清除DPPH·和·OH的EC50分別為7.313和1.330 mg/ml;牡蠣酶解液(17.800 mg/ml)對超氧自由基和卵黃脂蛋白脂質過氧化的抑制率分別為19.86%和82.97%。結論牡蠣酶解液具有顯著的清除DPPH·和·OH作用,且活性與劑量呈正相關,并對卵黃脂蛋白脂質過氧化也顯示出了較強的抑制作用。
【關鍵詞】 牡蠣 酶解 自由基 抗氧化
現代醫學研究表明,適量的自由基在免疫反應、細胞分化、細胞凋亡和其它生化代謝過程中起著重要的作用,然而過量的自由基則在機體中引起一系列生物學反應,導致組織細胞、亞細胞和分子結構的破壞,并隨著破壞層次逐漸擴展造成功能損傷,引起心血管疾病、癌癥和衰老等,它是構成很多疾病的病理學基礎。因此合理地使用抗氧化劑可以有效地預防和治療某些疾病,延緩衰老。
合成抗氧化劑往往具有一定的毒副作用,使得它們的使用受到嚴格控制。而天然抗氧化劑副作用較小,因此,尋找高效、價廉、低毒甚至無毒的天然抗氧化劑的工作備受人們關注。目前,抗氧化活性肽是天然抗氧化劑研究熱點之一,而且現在大部分抗氧化活性肽是通過蛋白酶在溫和條件下水解蛋白質而獲得,食用安全性高,比較符合現代人所追求的健康飲食的理念。
牡蠣(oyster)俗稱海蠣子、蠔等,是世界上第一大養殖貝類,也是我國四大養殖貝類之一。牡蠣肉的主要營養成分為蛋白質和糖原,含量分別為50.63%和22.41%;其氨基酸組成完善,8種必需氨基酸含量占氨基酸總量的40%,而且還含有豐富的牛磺酸。此外,牡蠣肉中還含有多種礦物質和微量元素,其中鋅和硒的含量豐富[1]。我國牡蠣資源豐富,且其蛋白質含量高,是采用酶解法制備生物活性肽的良好原料。本文就牡蠣酶解液的抗氧化活性進行全面地評估,為我國的牡蠣資源充分開發利用奠定基礎。
1 材料與儀器
1.1 材料牡蠣(購于南寧海鮮批發交易市場);胰蛋白酶(1:250,牛胰,Amresco分裝);二苯代苦味酰基(DPPH,1, 1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,購自Sigma公司);番紅O(Safranin O,AMRESCO,上海生工生物工程有限公司);2-硫代巴比妥酸(生化試劑,國藥集團化學試劑有限公司);鐵氰化鉀、硫脲、H2O2 、EDTA二鈉鹽、焦性沒食子酸等均為國產分析純。
1.2 儀器LAMBDA BIO 20型紫外-可見分光光度計(美國PE公司);DS-1高速組織勻漿機(上海標本模型廠);TOMY RS-20Ⅱ型高速冷凍離心機(TOMY SEIKO CO.,LTD);HH-W600型三用恒溫水箱(江蘇省金壇市醫療儀器廠)。
2 方法
2.1 牡蠣酶解液的制備[2]新鮮牡蠣去殼、洗凈,得新鮮牡蠣肉,按料水比1∶3(mg∶ml)比例加入預冷的雙蒸水,高速勻漿,加酶量為2%,在pH 8.0(用0.2N NaOH調節),45℃條件下,酶解6 h后,沸水浴滅活10 min,冷卻,最后以7 000~8 000 r/min,4℃離心30 min,取上清液分裝,即得牡蠣酶解液,冷藏備用。
牡蠣酶解液的蛋白含量測定采用Folin-酚試劑法[3]。
2.2 牡蠣酶解液還原能力的測定[4]采用普魯士藍反應法測定牡蠣酶解液的還原能力。其原理為:
K3Fe (CN)6 + 樣品 K4Fe (CN)6 + 樣品氧化物
K4Fe (CN)6 + Fe3+ K4[Fe (CN)6]3 (藍色)
在波長700 nm條件下測定吸光值A(A越大,則樣品的還原能力越強)。
取不同濃度的牡蠣酶解液稀釋液(3.625,7.250,10.875,14.500,18.125 mg/ml)1.0 ml,再加入0.2 mol/L,pH6.6的磷酸鹽緩沖液1.0 ml及1%的鐵氰化鉀〔K3 Fe(CN)6〕溶液1.0 ml,于50℃水浴反應20 min后急速冷卻,再加入質量分數為10%的三氯乙酸(TCA)溶液1.0 ml,振蕩均勻后,3 000 r/min離心10 min,取上清液2.5 ml,加入蒸餾水2.0 ml及質量分數為0.1%三氯化鐵溶液0.5 ml,混合均勻,靜置10 min后于700 nm測定其吸光值。
2.3 牡蠣酶解液在DPPH體系中抗氧化性的測定[5]DPPH·(二苯代苦味酰基自由基)在有機溶劑中是一種穩定的自由基,其結構中含有3個苯環,1個氮原子上有1個孤對電子,呈紫色,在517 nm有強吸收。有自由基清除劑存在時,DPPH·的單電子被配對而使其顏色變淺,在最大吸收波長處的吸收度變小,而且這種顏色變淺的程度與配對電子數是成化學計量關系的,因此可用與檢測自由基的清除情況,從而評價實驗樣品的抗氧化能力。
取不同濃度的牡蠣酶解液稀釋液(1.780,3.560,5.340,7.120,8.900 mg/ml)2 ml,加入1×10-4 mol/L DPPH無水乙醇溶液 2 ml,混勻后在室溫下避光反應30 min,在517 nm下測定吸光度Ai,空白組以等體積無水乙醇溶液代替DPPH溶液,對照組以等體積蒸餾水代替樣品溶液,并以等體積蒸餾水和無水乙醇混合液空白調零。
清除率計算:清除率(%) = [1- (Ai-Aj)/A0] ×100%
式中:A0-對照組吸光度;Ai-樣品組吸光度;Aj-空白組吸光度。
2.4 牡蠣酶解液在Fenton體系中抗氧化性的測定[6]在Fenton反應體系中,·OH由EDTA-Na2-Fe(Ⅱ)-H2O2產生,由于·OH可特異性地使番紅O(Safranin O)褪色,根據褪色程度用比色法來衡量·OH的含量。
取0.15 mol/L,pH 7.4的磷酸緩沖液1.5 ml,110μg/ml的番紅溶液0.2 ml,2 mmol/L的EDTA-Na2-Fe(Ⅱ) 0.7 ml,再分別加入不同濃度的樣品溶液0.8 ml,最后加入體積分數為1.5%的H2O2 0.8ml以啟動反應,混勻后于37℃水浴保溫30 min,在波長520 nm處測吸光度A。空白組以等體積的去離子水代替樣品溶液;對照組以等體積的去離子水代替樣品溶液和EDTA-Na2-Fe(Ⅱ)溶液。清除率E (%)按下式計算,并以羥基自由基特異性清除劑—硫脲作陽性對照。
E (%) = (A樣品-A空白)/(A對照-A空白)×100%
式中:A樣品-樣品組吸光度;A空白-空白組吸光度;A對照-對照組吸光度。
2.5 牡蠣牡蠣酶解液在鄰苯三酚體系中抗氧化性的測定[7~9]鄰苯三酚在弱堿性(Tris-HCL緩沖溶液pH為8.20)環境中自身氧化分解產生O-2·和有色中間物(在320 nm處有最大吸收峰),O-2·對自氧化又起催化作用,依據有色中間物生成量的多少,可判斷O-2·生成量的多少。也由此出現的一系列顏色變化,可以利用分光光度法進行測定。當有抑制劑存在時,可清除氧自由基,從而阻止中間產物的積累,根據吸光度數值的變化可求出抗氧化劑的活性。
取50 mmol/L ,pH 8.20 Tris-HCl緩沖液4.5 ml(其中含有2 mmol/L EDTANa2),加入0.1 ml不同濃度的樣液,于25℃保溫10 min,然后加入25℃預溫的4.5 mmol/L的鄰苯三酚(用10 mmol/L HCl配制)0.2 ml,混勻后迅速于干燥的比色皿中,在320 nm下每隔半分鐘測定一次OD值,以等體10 mmol/L HCl代替鄰苯三酚溶液為空白調零,對照組以等體積去離子水代替樣品。作吸光度隨時間變化曲線的回歸方程,其斜率為鄰苯三酚的自氧化速率V,按下式計算樣品對O-2·的抑制率。
抑制率 (%) = ( V對照- V樣品)/ V對照×100%
式中:V對照-對照組鄰苯三酚自氧化速率(OD/min);V樣品-樣品組鄰苯三酚自氧化速率(OD/min)。
2.6 牡蠣酶解液在Fe2+誘發卵黃脂蛋白過不飽和脂肪酸(PUFA)過氧化體系中抗氧化活性(AOA)的測定[10,11]卵黃中磷脂C-2位上所含極低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)過不飽和脂肪酸(PUFA)在鐵離子的催化下,經振蕩,能誘發過氧化,產生烷氧基(LO·)和烷過氧基(LOO·)物質,再引發鏈式反應。在加熱的條件下,過氧化產物可與硫代巴比妥酸(TBA)反應產生紅色化合物,并在波長為532 nm處有強吸光度。當有抗氧化劑存在時,可清除過氧化產物,從而阻斷鏈式反應的發生,使得該卵黃脂蛋白脂質過氧化體系的過氧化產物生成受阻,根據吸光度數值的變化可求出抗氧化劑的活性。
選用1∶25的卵黃懸液(卵黃用等體積的0.1 mol/L,pH 7.45的磷酸緩沖液PB配成1∶1懸液,磁力攪拌10 min,再用PB稀釋成1∶25的懸液置于冰箱中備用)并吸取0.2 ml,加入不同濃度的牡蠣酶解液稀釋液0.1 ml,加入25 mmol/L FeCl2 0.2 ml,用0.1 mol/L,pH 7.45的PB補充至2 ml,37℃培養12 h ,取出后加入0.5 ml 20%的三氯醋酸(TCA),靜置10 min,以3500 r/min離心10 min,取2.0 ml上清液加入0.8%TBA(2-硫代巴比妥酸)1.0 ml,加塞,放入沸水浴中15 min,冷卻后,于532 nm處比色測定吸光值(A),對照管除不加樣品液外,其它試劑同前,所測吸光值為A0,空白管調零,空白管以2.0 ml PB代替,樣品對卵黃脂蛋白脂質過氧化的抑制率用AOA表示:AOA(%)=(A0-A) / A0×100%。
3 結果
3.1 牡蠣酶解液還原能力依據“2.2”還原能力的測定方法,在700 nm處的吸光度越大,樣品的還原能力越強。由表1和圖1可知,牡蠣酶解液在其濃度范圍內隨著濃度的增加而增大;與陽性對照—硫脲相比,其還原能力較弱。
而一般情況下,樣品的還原能力與抗氧化能力呈正相關,所以牡蠣酶解液的抗氧化能力隨其濃度的增加而增強。表1 牡蠣酶解液的還原能力
3.2 牡蠣酶解液在DPPH體系中抗氧化性依據“2.3” DPPH體系測定方法,(Ai-Aj)為樣品組中單電子未被配對的DPPH·的吸光度值,該值越小,樣品清除DPPH·的能力越強。由表2可知,牡蠣酶解液清除DPPH·的能力隨濃度增大而增強。
牡蠣酶解液清除DPPH自由基的能力以EC50來衡量,EC50的定義為:使得DPPH自由基的清除率達到50%時需要的樣品液的濃度,通過回歸方程可求出EC50。依據回歸方程Y= 6.42X + 3.048 7,r=0.993 7求得牡蠣酶解液清除DPPH·的EC50為7.313 mg/ml。表2 牡蠣酶解液對DPPH·的清除作用(
3.3 牡蠣酶解液在Fenton體系中抗氧化性依據Fenton體系反應原理,樣品組在520 nm處測定的吸光度值越大,其清除·OH的能力越強,其在該體系中抗氧化能力越強。由表3可知,牡蠣酶解液和硫脲清除·OH的能力隨它們的濃度增大而增強。
牡蠣酶解液和硫脲對·OH的清除作用的回歸方程分別為Y = 29.261X + 11.078 ,r=0.975 0和Y = 7.826 9X + 13.725,r=0.990 2。 求得牡蠣酶解液和硫脲清除·OH的EC50分別為1.330 mg/ml和4.635 mg/ml,表明牡蠣酶解液對·OH有較強的清除作用,而且其清除·OH能力強于陽性對照藥物硫脲。表3 牡蠣酶解液和硫脲對·OH的清除作用
3.4 牡蠣酶解液在鄰苯三酚體系中抗氧化性依據“2.5”鄰苯三酚自氧化體系的測定方法,在波長320 nm處測定的吸光度越小,樣品的抗氧化能力越強。由圖2可知,超氧陰離子自由基的產生和鄰苯三酚產生有色物質的變化隨著時間的變化而保持相對的穩定。不同濃度的牡蠣酶解液對鄰苯三酚的自氧化均有一定的抑制作用,且隨著牡蠣酶解液濃度的增加而增大,其抑制率分別為4.29 %,9.66%,13.95%,17.35%,19.86%。由此可知牡蠣酶解液在鄰苯三酚體系中抗氧化性能力較弱,當樣品為牡蠣酶解液母液時,抑制率僅達19.86%。
圖2 牡蠣酶解液對超氧陰離子(O-2·)的抑制作用
3.5 牡蠣酶解液在Fe2+誘發卵黃脂蛋白過不飽和脂肪酸(PUFA)過氧化體系中抗氧化活性由表4及圖3可知牡蠣酶解液對PUFA過氧化體系的抑制作用隨樣品濃度的增大,抗氧化活性也明顯增加。當樣品為牡蠣酶解液母液時,抑制率AOA(%)值達到(82.97±0.25)%。
表4 牡蠣酶解液對卵黃脂蛋白脂質過氧化的抑制作用(±s)
濃度C/mg·ml-1OD532抑制率(%)7.1201.159±0.00210.55±0.5510.6801.030±0.01820.53±0.7714.2400.647±0.00950.09±1.0817.8000.221±0.00282.97±0.25對照1.296±0.010
4 結論
牡蠣酶解液顯示出了一定的還原能力,證明其具有一定的抗氧化活性。
牡蠣酶解液清除·OH的效果強于硫脲,其清除·OH的能力是硫脲的3.5倍;牡蠣酶解液在DPPH體系中也具有較強的清除DPPH自由基的能力。
圖3 牡蠣酶解液對卵黃脂蛋白脂質過氧化的抑制作用
在Fe2+誘發卵黃脂蛋白過不飽和脂肪酸(PUFA)過氧化體系中有明顯的抑制作用。
【參考文獻】
[1] 汪何雅,楊瑞金,王 璋,等.牡蠣的營養成分及蛋白質的酶法水解[J].水產學報,2003,27(2):163.
[2] 譚雯文,周延華,梁海秋,等.牡蠣蛋白的純化及酶解條件的研究[J].現代食品科技,2006,22(2):79.
[3] 吳耀生,周素芳,賴祥進,等. 新編生物化學實驗[M].北京:人民衛生出版社,2002:37.
[4] 劉 清,李 玉,姚惠源,等. 大麥提取物的體外抗氧化活性研究[J].食品工業科技,2007,28(2):131.
[5] 黃 琳,段 磊,李榮貴,等. 沙蠶提取物的抗氧化活性研究[J].中國海洋藥物雜志,2007,26(2):19.
[6] 王 輝,孫春艷,劉 剛,等. 異蓮心堿的體外抗氧化活性[J].中國生化藥物雜志,2005,26(1):21.
[7] 秦恩華. 茶樹菇水溶性多糖的提取及其對氧自由基清除效果的研究[J].現代食品科技,2005,23(6):48.
[8] 崔月花,徐 鵬,章克昌.靈芝液態發酵有效產物體外抗氧化活性的研究[J].食品與發酵工業,2006,32(8):32.
[9] 吳海濤,張 彧,繆 琪,等. 牡蠣水提液的抗氧化特性[J].食品與發酵工業,2005,31(4):42.
[10] 張爾賢,俞麗君,周意琳,等. Fe+2誘發脂蛋白PUFA過氧化體系及對若干天然產物抗氧化作用的評價[J]. 生物化學與生物物理學報,1996,28(2):218.