立蛋

前言：想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎？我們特意為您整理了5篇立蛋范文，相信會為您的寫作帶來幫助，發現更多的寫作思路和靈感。

立蛋范文第1篇

立蛋范文第2篇

立雞蛋用生的。春分的習俗當中有一個特殊的傳統習俗，就是“立蛋”，“立蛋”游戲玩法確簡單易行且富有趣味，選擇一個光滑勻稱、剛生下四五天的新鮮雞蛋，輕手輕腳地在桌子上將它豎起來。雖然失敗者頗多，但成功者也不少。春分成了豎蛋游戲的最佳時光，故有“春分到，蛋兒俏”的說法。豎立起來的蛋兒好不風光。

根據經驗，應這樣春分豎蛋：雞蛋的表面其實是高低不平的，有許多突起的小山，山高0.03毫米左右，山峰之間的距離在0.5-0.8毫米。根據三點確定一個平面的道理，只要找到三個合適的小山支點，就能使雞蛋豎立起來了。

祖先的智慧。祖先在四千多年前就對時令節氣，天體運行有了掌握判斷，到今日仍然準確實用。春分是太陽直射赤道的時段，南北半球晝夜相等，就是說白天黑夜各十二小時等分，諺語說吃了春分飯，一天長一線。地球南北極的地軸與地球繞太陽公轉的軌道，處于力的相對平衡狀態，地心引力平穩，所以只有在春分這一天，才是雞蛋能豎著不倒的最佳時間。對于孩子來說，立蛋的過程，也是培養做事耐心、靜心、專心的好時機，雖有輸贏，也不過是添了些歡笑罷了，大人也乘機在旁邊教育鼓勵，也是寓教于樂。

（來源：文章屋網 ）

立蛋范文第3篇

在北京密云縣的6000畝有機農業示范園中養殖了13萬只“特別”的北京油雞，與其他工業化雞場中的雞相比，它們有點“傲慢”。它們不是雞籠里機械性的“動物工人”，沒有較高的“職業素養”，它們隨心所欲，經常散步，但卻不常下蛋?！肮B”著這些特殊油雞的就是北京百年栗園生態農業有限公司（以下簡稱為百年栗園），公司通過養殖的北京油雞，培育出“百年栗園”有機柴雞蛋、有機柴雞肉等品牌。

在市面上，百年栗園的雞蛋價格已經達到1.9元/枚，人們是否愿意多花幾毛錢去吃這些“上過房、吃過蟲”的北京油雞下的蛋？

2010年5月，深圳市天圖投資管理有限公司（以下簡稱為天圖創投）、天津天圖興盛股權投資基金合伙企業完成了對百年栗園4500萬元的投資。融資資金主要用于基礎設施建設，包括在百年栗園的北京基地建設了一個北京油雞的商品化種雞場，以及一個年產7萬噸全自動飼料加工廠等，同時還有一部分用于百年栗園生態園內的景觀建設。顯然，一向眼疾手快的資本投資者愿意為百年栗園這些有點“傲慢”的種雞買單。

堅持從蛋入手

“有機天然”的概念在美國已經成為時尚，美國最大天然食品零售商Whole Foods Market曾在華爾街的資本市場上備受追捧。如今，有機農業的熱風吹到了中國市場。但擺在超市貨柜上的有機水果、有機蔬菜等商品的價格和非有機商品價格的巨大差距也讓人嘆為觀止。百年栗園從雞蛋入手，用幾角錢的價格打開有機雞蛋的市場。

天圖創投的合伙人王岑坦言，在現代農業的投資中，找對人是關鍵。“投資百年栗園的原因有二，一是對事，二是對人?！蓖踽f道，“有機農業的行業前景明朗，同時有機雞蛋相比于其他有機食品的價格更易被消費者接受，更易成為日常消費品；另外，因為百年栗園董事長劉成軍是土生土長的密云人，又是知識分子下海經商，在創業的熱情、理念和方法上都有優勢。”

2005年，劉成軍在他的出生地，一個叫“后栗園村”的地方注冊成立了公司，旁邊的村子叫“前栗園村”，劉成軍就給公司起名叫做“百年栗園”。百年栗園依托密云縣當地獨特的生態優勢，發展柴蛋雞養殖產業，帶動了整個密云縣有機柴雞蛋產業發展。

劉成軍在摸索過程中，逐漸捋清了百年栗園做全產業鏈的產業模式?！笆紫?，有機養殖的飼料必須是有機的，我們有1.7萬畝有機玉米的種植地。其次是飼料加工廠，百年栗園建立了一個年產7萬噸的飼料加工廠。接下來就是進入有機養殖階段，這個階段用示范基地做培訓，帶領農戶進行有機養殖。養殖出的產品進行加工后，就進入了最后的銷售階段。從飼料到銷售終端，百年栗園建立了一個完善的產業鏈?！眲⒊绍娊榻B說。

在這一系列完整的全產業鏈中，百年栗園的主要盈利環節在種雞培育、飼料加工和產品銷售三部分。盡管百年栗園的定位是全面做有機農業，但劉成軍深知想做大先做強的道理。他堅持從雞蛋入手，在百年栗園的所有產品中，有機雞蛋和有機雞肉產品占到所有產品種類的95%，而其他產業鏈環節生產出的產品僅定位于特殊渠道的禮品銷售，短期內沒有拓展更多產品的想法。

市場對百年栗園產品的反饋讓劉成軍非常滿意，但示范培訓基地里的13萬只雞的存欄量顯然供不上市場需求。百年栗園采用“公司＋合作社＋農戶”的生產模式，以公司化的管理帶動合作社的建立，以合作社的方式帶動農戶的增收。在百年栗園的示范培訓基地的職能中，對其生產的要求很低，主要起科研、示范、培訓的作用。在劉成軍的帶領下，密云縣已經有500多家養殖農戶、1000多家種植農戶加入進來，百年栗園真正的生產在農戶中。

摸清了自己的盈利模式，劉成軍帶著百年栗園走到今日，已經有了過億的銷售收入。

嚴格把關食品安全

同仁堂的抱柱對聯“修合無人見，存心有天知”是劉成軍最推崇的祖訓。安全是食品行業的隱形炸彈，這也是投資方在投資該行業最為擔憂的風險。當許多雞蛋品牌由于蘇丹紅事件、三聚氰胺事件紛紛下架時，百年栗園的雞蛋卻依然能夠擺在超市貨架上。兩次食品安全事件對百年栗園來說不僅是考驗，更是機會。劉成軍敢對百年栗園雞蛋的食品安全拍胸脯，直言：“你可以不買我的雞蛋，但是不能說我的雞蛋不好?！?/p>

百年栗園飼養的北京油雞品種是中國珍貴的優良地方雞種，被《中國家禽品種志》收錄。距今已有300多年的歷史，曾經長時間作為宮廷御膳用雞。相比普通肉雞，北京油雞必須散養不能籠養，而且飼養周期較長，同普通肉雞相比，飼養成本高效益卻不高。普通養雞場里的海蘭褐雞種的產蛋率高達97%，即100天里產97枚蛋，而百年栗園養殖的北京油雞產蛋率只有40%-50%。但百年栗園的有機雞蛋的突出特色就是無化學添加的食品安全。

酒香也怕巷子深。百年栗園品牌的忠誠度大于知名度，這對劉成軍來說是個問題。但他知道，一個品牌建立的過程中，要耐得住寂寞。劉成軍希望百年栗園的基地建成了一個農業觀光生態園，希望感興趣的消費者到生產基地里參觀、休閑，對百年栗園做全方位的了解?！坝幸惶?，我們希望把我們全程的生產過程放到網上，接受大家的監督?！彼?，劉成軍將一部分資金用于生態園內的景觀建設，希望通過參觀提升百年栗園的知名度，也希望通過生態園來倡導有機農業的概念。

在創立百年栗園之前，劉成軍做過小學老師，當了10年律師，又做了7年的廣告人。轉了一圈之后，土生土長在密云的劉成軍又回到了這塊土地，開始了有機農業的創業歷程?！拔野l現自己真正的興趣還是在農業，做這些事情能讓我有自我滿足感?！眲⒊绍娬娴淖龀闪耍缃癜倌昀鯃@的沼氣池供著全村1000多戶的燃氣，1500戶農民也在和百年栗園的合作中獲得了每年3.5萬元的增收。

為了保證食品安全和品質，百年栗園和農戶之間的合作非常緊密。在百年栗園內部，采取“六統一”的方針進行管理。從環境、雞種、飼料、操作程序、防疫、銷售等六方面做到統一，保證每家農戶所生產的雞蛋品質合格。隨著百年栗園規模的擴大，吸引人才的需求也在增大。五年以來，百年栗園的技術服務中，大學?？埔陨蠈W歷的成員達30人；銷售隊伍的骨干人員已有50人的規模，算上分布在超市的銷售人員，百年栗園的銷售團隊有300人的規模。加強團隊的建設也是投資方的期待。

緊盯三地布局

北京、上海、深圳是百年栗園主要布局的三大市場，目前產品已進入了上述三地的600多家商超。三個一線城市中高消費者相對集中的區域，以北京為中心輻射華北地區、以上海為中心覆蓋華東地區、以深圳為中心立足華南地區，為百年栗園走向二三線城市打好了市場基礎。

在北京站穩腳跟后，百年栗園打入上海市場。從市場反饋來看，上海市場的增幅表現讓劉成軍非常滿意。劉成軍預計到2011年年底，三地的銷量會達到均衡，可能華東地區還會超過北京的銷量。

“我們2011年能達到存欄量400萬只，2012年能達到700萬只。但是產品仍然會處于比較緊俏的狀態?！眲⒊绍姳硎?，今后在華東和華南地區也會建立生產基地，主要用于雞蛋的供應。盡管比普通雞蛋、雞肉產品價格高一些，但劉成軍認為有機雞蛋、有機雞肉產品已經成為日常消費品。從早餐配比來看，一般人在早餐時會選擇一個雞蛋加一塊干糧，多花幾角錢選擇一個無化學添加、具有蛋香味的雞蛋，在價格上沒有障礙。所以決定人們消費有機食品的因素不是價格，是理念。這也是劉成軍著力布局北京、上海、深圳三個市場的主要原因。

立蛋范文第4篇

近來媒體鋪天蓋地對李寧放棄贊助國家體操隊一事，做了海量報道，對該事件的解讀，也基本趨于一致，李寧差錢了，供不起了，真的嗎？李寧從來不差錢，現在不差，將來也不會差，為何？且容文后再做解釋。我私下，將該事件視為一個信號彈，什么信號呢？李寧吃了秤砣，鐵了心，要將“李寧品牌國際化戰略”執行到底了；李寧品牌國際化進程，將向縱深全速推進！用李寧的話來講，就是：“李寧是世界的李寧，不是中國的耐克；李寧不做中國的耐克，要做世界的李寧！”此時此刻，我腦海里轟鳴著：“向前進、向前進”

無巧不成書，可巧的是，我近來受邀參加一位著名書法家舉辦的書法展，我臨時有事，到展廳時，稍晚了些，本想上前向大書法家致歉，卻發現他被眾人圍在中間，正在布道。據說這位大書法家能透過一個人的筆跡看出一個人的壽命，據傳八九不離十，我忙將耳朵拉長，使勁聽，大書法家講道：“進”字的繁體字是“進 ”，從字形上來看，走字底上面是個“佳”，向前走越走越好的意思；可是簡化后的“進”字呢，走字底上面是個“井”，向前走就掉井里去了，這個意境不好。我聽了，心里卻不以為然，我覺得還是簡體的“進”字更佳些，它就像一盞紅燈，在不斷警示前進的人們：“當心，前面有井，別掉井里去了！”其實呢，這句警語，也恰好是我想送給李寧的：“當心，品牌國際化戰略，可能是陷阱，千萬當心，別掉進去了！”

為何說李寧的“品牌國際化戰略”可能是“陷阱”呢？《李寧品牌壯語：一切為了“贏”》一文網上發表后不久，很多策劃界同行給我發來賀信，表示認同我給李寧做的系統品牌規劃。有位同行還批了我一下，說我文章標題中的“壯語”一詞很出彩，美中不足的是，文中卻漏掉了一個重要信息，李寧是“壯族”人。我趁熱打鐵與各路高手集思廣益，對李寧困局做了診斷和分析，大家基本達成共識，李寧品牌年輕化戰略，并非導致李寧困局的根本原因，本質問題可能主要出在品牌國際化戰略上，因為“品牌年輕化戰略”是為“品牌國際化戰略”服務的，如果后者不小心掉進了井里，前者當然也跟著落井下石。

再重復一遍李寧的話：“李寧是世界的李寧，不是中國的耐克；李寧不做中國的耐克，要做世界的李寧！”李寧品牌變得年輕了，更有活力了，更有吸引力了，這本身是大好事，問題是，如果變得年輕的“世界的李寧”，相當于“世界的耐克”，相當于“世界的阿迪”，那么，李寧是不是將自己推進了同質化競爭的泥沼？是不是將自己的差異化優勢給自我埋沒了呢？

請注意，我說的是“相當于”，而不是“等同于”。果如此，假設李寧已經贏得夢想，那么，世界運動品牌三強位次排列，依次是耐克第一、阿迪第二、李寧第三，從品牌位勢層面說，這好像是好事，其實呢，如果從消費者層面來看，卻并非好事，為何？原來，消費者做選擇，是二選一，或者選耐克阿迪兄弟（國際大牌），或者選李寧（中國大牌），李寧與耐克阿迪是站在同一個平臺上，是并列冠軍，等著消費者來頒金牌；現在呢？消費者做選擇，是三選一，李寧不再與耐克阿迪倆兄弟站同一個平臺上了，而是變成了由上至下站臺階，李寧不再是耐克阿迪的并列冠軍了，而是成了銅牌獲得者，消費者可能給耐克阿迪頒完金牌和銀牌后，早就忘了給李寧頒銅牌了。

用一句話來概括：“李寧只要成為中國的李寧，自然就是世界的李寧；李寧只要做好中國的李寧，就是無與倫比的世界的李寧”！不同的是，這個“世界的李寧”，是金牌獲得者，而不是可有可無、低三下四的銅牌獲得者。

品牌“返輕”戰略，可能，才是正確的品牌年輕化戰略

大家伙一番研討后，覺得李寧一直在謀求的“去李寧化”，可能是一個“偽命題”，李寧品牌根本就不存在“去李寧化”這回事，除非李寧品牌改姓更名叫“零零”。李寧該做、當作的不是“去李寧化”，而是“給李寧品牌定格”，目的是從根本上解決李寧品牌年輕化這個大問題！

李寧想通過換標換廣告語來實現品牌年輕化，現在來看，基本是失敗的，為何？動了皮毛，沒有動本——“形象”，用專業術語說就是“品牌印記”！品牌年齡顯然與“形象”相關，譬如肯德基爺爺、麥當勞叔叔，沒做過市調，李寧品牌是讓消費者腦中想到了“爺爺”|、“叔叔”，還是什么？其實，也不用市調，顯然，爺爺輩、叔叔輩的成分要大一些，因為李寧的“形象”如今是“一頭白發”。

如果李寧如李小龍一般英雄早逝，可能就像李小龍一樣自然定格在那個年齡了，當然，李寧不必為公司和品牌獻出寶貴的生命，只需要拿出一些當年奪冠時的冠軍靚照，貼滿店鋪，貼滿媒體，就可給品牌年齡定格了。我想，稱之為“返輕”，應該貼切些。

當然，李寧也未必就一定要退居幕后，如果李寧把白發染成類似瘋狂英語李陽的滿頭紅發，倒立在搖滾巨星崔健的板寸頭上，四只手一起彈著一把迷彩電吉他，先高歌一曲《紅旗下的蛋》，再齊唱一曲《路上的搖滾》，還不把小伙伴們、大伙伴們、老伙伴們都給齊刷刷驚呆了？老巴菲特見了，興奮過度，大手一揮，號令天下，把錢票都投給李寧，保證李寧股票立馬一飛沖天！

為何要把崔健搬出來獻丑？因為崔健和李寧，可謂是異曲同工的《義勇軍進行曲》，也可說是催人奮進的同一首歌，對三四十歲的人來說，大概不用解釋！還有另一原因，為了助力李寧盡快走出困局（弦外之音：其實，我是杞人憂天，其實，我是皇帝不急太監急，李寧是一定會、一定能走出困局的，因為李寧是“紅旗下的蛋”，現在的李寧只是走在“路上”，未來“贏”是必然的，只是早一些、晚一些的問題！李寧本質上，不是“私企”，而是“央企”，所以是一盤“活棋”，更是一盤“和棋”。），我經常到一座專業體育商城去踩點，商城里匯聚了耐克、阿迪和李寧等眾多運動品牌，每當我走到商城門口，都被高音喇叭里的用英文唱響的“耐克腔”、“阿迪調”刺痛，我在想，如果高音喇叭奏響的是冠軍領獎時必放的雄壯的《國歌》、或者是讓人踏歌尋蹤的《紅旗下的蛋》，那么，會不會讓李寧成為消費者眼中的“唯一”和“偏愛”呢？我想，很有可能，私心人人有、偏心人人有！

立蛋范文第5篇

關鍵詞：蛋白質，質譜分析，應用

前言：

蛋白質是生物體中含量最高，功能最重要的生物大分子，存在于所有生物細胞，約占細胞干質量的50%以上，作為生命的物質基礎之一，蛋白質在催化生命體內各種反應進行、調節代謝、抵御外來物質入侵及控制遺傳信息等方面都起著至關重要的作用，因此蛋白質也是生命科學中極為重要的研究對象。關于蛋白質的分析研究，一直是化學家及生物學家極為關注的問題，其研究的內容主要包括分子量測定，氨基酸鑒定，蛋白質序列分析及立體化學分析等。隨著生命科學的發展，儀器分析手段的更新，尤其是質譜分析技術的不斷成熟，使這一領域的研究發展迅速。

自約翰.芬恩(JohnB.Fenn)和田中耕一(Koichi.Tanaka)發明了對生物大分子進行確認和結構分析的方法及發明了對生物大分子的質譜分析法以來，隨著生命科學及生物技術的迅速發展，生物質譜目前已成為有機質譜中最活躍、最富生命力的前沿研究領域之一[1]。它的發展強有力地推動了人類基因組計劃及其后基因組計劃的提前完成和有力實施。質譜法已成為研究生物大分子特別是蛋白質研究的主要支撐技術之一，在對蛋白質結構分析的研究中占據了重要地位[2]。

1．質譜分析的特點

質譜分析用于蛋白質等生物活性分子的研究具有如下優點：很高的靈敏度能為亞微克級試樣提供信息，能最有效地與色譜聯用，適用于復雜體系中痕量物質的鑒定或結構測定，同時具有準確性、易操作性、快速性及很好的普適性。

2．質譜分析的方法

近年來涌現出較成功地用于生物大分子質譜分析的軟電離技術主要有下列幾種：1)電噴霧電離質譜；2)基質輔助激光解吸電離質譜；3)快原子轟擊質譜；4)離子噴霧電離質譜；5)大氣壓電離質譜。在這些軟電離技術中，以前面三種近年來研究得最多，應用得也最廣泛[3]。

3．蛋白質的質譜分析

蛋自質是一條或多條肽鏈以特殊方式組合的生物大分子，復雜結構主要包括以肽鏈為基礎的肽鏈線型序列[稱為一級結構]及由肽鏈卷曲折疊而形成三維[稱為二級，三級或四級]結構。目前質譜主要測定蛋自質一級結構包括分子量、肽鏈氨基酸排序及多肽或二硫鍵數目和位置。

3.1蛋白質的質譜分析原理

以往質譜(MS)僅用于小分子揮發物質的分析，由于新的離子化技術的出現，如介質輔助的激光解析/離子化、電噴霧離子化，各種新的質譜技術開始用于生物大分子的分析。其原理是：通過電離源將蛋白質分子轉化為氣相離子，然后利用質譜分析儀的電場、磁場將具有特定質量與電荷比值(M/Z值)的蛋白質離子分離開來，經過離子檢測器收集分離的離子，確定離子的M/Z值，分析鑒定未知蛋白質。

3.2蛋白質和肽的序列分析

現代研究結果發現越來越多的小肽同蛋白質一樣具有生物功能，建立具有特殊、高效的生物功能肽的肽庫是現在的研究熱點之一。因此需要高效率、高靈敏度的肽和蛋白質序列測定方法支持這些研究的進行?，F有的肽和蛋白質測序方法包括N末端序列測定的化學方法Edman法、C末端酶解方法、C末端化學降解法等，這些方法都存在一些缺陷。例如作為肽和蛋白質序列測定標準方法的N末端氨基酸苯異硫氰酸酯(phenylisothiocyanate)PITC分析法(即Edman法，又稱PTH法)，測序速度較慢(50個氨基酸殘基/天)；樣品用量較大(nmol級或幾十pmol級)；對樣品純度要求很高；對于修飾氨基酸殘基往往會錯誤識別，而對N末端保護的肽鏈則無法測序[4]。C末端化學降解測序法則由于無法找到PITC這樣理想的化學探針，其發展仍面臨著很大的困難。在這種背景下，質譜由于很高的靈敏度、準確性、易操作性、快速性及很好的普適性而倍受科學家的廣泛注意。在質譜測序中，靈敏度及準確性隨分子量增大有明顯降低，所以肽的序列分析比蛋白容易許多，許多研究也都是以肽作為分析對象進行的。近年來隨著電噴霧電離質譜(electrosprayionisation，ESI)及基質輔助激光解吸質譜(matrixassistedlaserdesorption/ionization，MALDI)等質譜軟電離技術的發展與完善，極性肽分子的分析成為可能，檢測限下降到fmol級別，可測定分子量范圍則高達100000Da，目前基質輔助的激光解吸電離飛行時間質譜法(MALDITOFMS)已成為測定生物大分子尤其是蛋白質、多肽分子量和一級結構的有效工具，也是當今生命科學領域中重大課題——蛋白質組研究所必不可缺的關鍵技術之一[5]。目前在歐洲分子生物實驗室(EMBL)及美國、瑞士等國的一些高校已建立了MALDITOFMS蛋白質一級結構(序列)譜庫，能為解析FAST譜圖提供極大的幫助，并為確證分析結果提供可靠的依據[6]。

3.3蛋白質的質譜分析方式

質譜用于肽和蛋白質的序列測定主要可以分為三種方法：一種方法叫蛋白圖譜(proteinmapping)，即用特異性的酶解或化學水解的方法將蛋白切成小的片段，然后用質譜檢測各產物肽分子量，將所得到的肽譜數據輸入數據庫，搜索與之相對應的已知蛋白，從而獲取待測蛋白序列。將蛋白質繪制“肽圖”是一重要測列方法。第二種方法是利用待測分子在電離及飛行過程中產生的亞穩離子，通過分析相鄰同組類型峰的質量差，識別相應的氨基酸殘基，其中亞穩離子碎裂包括“自身”碎裂及外界作用誘導碎裂.第三種方法與Edman法有相似之處，即用化學探針或酶解使蛋白或肽從N端或C端逐一降解下氨基酸殘基，形成相互間差一個氨基酸殘基的系列肽，名為梯狀測序(laddersequencing)，經質譜檢測，由相鄰峰的質量差知道相應氨基酸殘基。

3.3.1蛋白消化

蛋白的基團越大，質譜檢測的準確率越低。因此，在質譜檢測之前，須將蛋白消化成小分子的多肽，以提高質譜檢測的準確率。一般而言，6-20個氨基酸的多肽最適合質譜儀的檢測?，F今最常用的酶為胰蛋白酶(trypsin)，它于蛋白的賴氨酸(lysine)和精氨酸(arginine)處將其切斷。因此，同一蛋白經胰蛋白酶消化后，會產生相同的多肽。

3.3.2基質輔助激光解吸電離/飛行時間質譜測量法(MALDI-TOFMS)[7]

簡而言之，基質輔助激光解吸電離/飛行時間質譜測量儀是將多肽成分轉換成離子信號，并依據質量/電荷之比(mass/charge，m/z)來對該多肽進行分析，以判斷該多肽源自哪一個蛋白。待檢樣品與含有在特定波長下吸光的發光團的化學基質(matrix)混合，此樣品混合物隨即滴于一平板或載玻片上進行揮發，樣品混合物殘余水份和溶劑的揮發使樣品整合于格狀晶體中，樣品然后置于激光離子發生器(lasersource)。激光作用于樣品混合物，使化學基質吸收光子而被激活。此激活產生的能量作用于多肽，使之由固態樣品混合物變成氣態。由于多肽分子傾向于吸收單一光子，故多肽離子帶單一電荷.這些形成的多肽離子直接進入飛行時間質量分析儀(TOFmassanalyzer)。飛行時間質量分析儀用于測量多肽離子由分析儀的一端飛抵另一端探測器所需要的時間。而此飛行時間同多肽離子的質量/電荷的比值成反比，即質量/電荷之比越高，飛行時間越短。最后，由電腦軟件將探測器錄得的多肽質量/電荷比值同數據庫中不同蛋白經蛋白酶消化后所形成的特定多肽的質量/電荷比值進行比較，以鑒定該多肽源自何種蛋白.此法稱為多肽質量指紋分析(peptidemassfin-gerprinting)?；|輔助激光解吸電離/飛行時間質譜測量法操作簡便，敏感度高，同許多蛋白分離方法相匹配，而且，現有數據庫中有充足的關于多肽質量/電荷比值的數據，因此成為許多實驗室的首選蛋白質譜鑒定方法。

3.3.3電子噴霧電離質譜測量法(electrosprayion-izationmassspectrometry,ESI-MS)[8]

同基質輔助激光解吸電離/飛行時間質譜測量法在固態下完成不同，電子噴霧電離質譜測量法是在液態下完成，而且多肽離子帶有多個電荷，由高效液相層析等方法分離的液體多肽混合物，在高壓下經過一細針孔。當樣本由針孔射出時，噴射成霧狀的細小液滴，這些細小液滴包含多肽離子及水份等其他雜質成分。去除這些雜質成分后，多肽離子進入連續質量分析儀(tan-demmassanalyzer)，連續質量分析儀選取某一特定質量/電荷比值的多肽離子，并以碰撞解離的方式將多肽離子碎裂成不同電離或非電離片段。隨后，依質量/電荷比值對電離片段進行分析并匯集成離子譜(ionspectrum)，通過數據庫檢索，由這些離子譜得到該多肽的氨基酸序列。依據氨基酸序列進行的蛋白鑒定較依據多肽質量指紋進行的蛋白鑒定更準確、可靠。而且，氨基酸序列信息即可通過蛋白氨基酸序列數據庫檢索，也可通過核糖核酸數據庫檢索來進行蛋白鑒定。

4．蛋白質質譜分析的應用

1981年首先采用FAB雙聚焦質譜測定肽分子量，分析十一肽(Mr=1318)，質譜中出現準分子離子[M+1]+=1319強峰。分子量小于6kDa肽或小蛋白質合適用FAB質譜分析，更大分子量的多肽和蛋自質可用MALDI質譜或ESI質譜分析。用MALDI-TOF質譜分析蛋自質最早一例是HillenKramp等[9]于1988年提出用紫外激光以煙酸為基質在TOF譜儀上測出質量數高達60kDa蛋白質，精確度開始只有0.5%，后改進到0.1-0.2%。質譜技術主要用于檢測雙向凝膠電泳或“雙向”高效柱層析分離所得的蛋白質及酶解所得的多肽的質量，也可用于蛋白質高級結構及蛋白質間相互作用等方面的研究[10,11],三條肽段的精確質量數便可鑒定蛋白質。近年來，串聯質譜分析儀發展迅猛，其數據采集方面的自動化程度、檢測的敏感性及效率都大大提高，大規模數據庫和一些分析軟件(如:SEQUEST)的應用使得串聯質譜分析儀可以進行更大規模的測序工作。目前，利用2D電泳及MS技術對整個酵母細胞裂解產物進行分析，已經鑒定出1484種蛋白質，包括完整的膜蛋白和低豐度的蛋白質[12]；分析肝細胞癌患者血清蛋白質組成分[13]，并利用質譜進行鑒定磷酸化蛋白研究工作[14]及采用質譜技術研究許旺細胞源神經營養蛋白(SDNP)的分子結構[15]等。

結束語：

在蛋白質的質譜分析中，質譜的準確性(accuracy)對測定結果有很大影響，因此質譜測序現在仍很難被應用于未知蛋白的序列測定。肽和蛋白的質譜序列測定方法具有快速、用量少、易操作等優點，這些都非常適合于現在科學研究的需要。我們相信，隨著各種衍生化方法和酶解方法的不斷改進，蛋白雙向電泳的應用[16]以及質譜技術的不斷完善，質譜將會成為多肽和蛋白質分析最有威力的工具之一。

參考文獻

1．吳世容,李志良,李根容,等.生物質譜的研究及其應用.重慶大學學報,2004,27(1):123-127.

2．成海平,錢小紅.蛋白質組研究的技術體系及其進展.生物化學與生物物理進展,2000,27:584588.

3．陳紹農,潘遠江,陳耀祖.多肽及蛋白質質譜分析新進展.質譜學報,1995,16(3):15-21.

4．陳晶,付華,陳益.質譜在肽和蛋白質序列分析中的應用.有機化學,2002,22(2):81～90.

5．解建勛,蒲小平,李玉珍,等.蛋白質組分析技術進展.生物物理學報,2001,17:19-26.

6．劉慧敏,賴志輝,黎軍,等.碎片結構分析在MALDITOFMS法測定多肽序列中的應用.生物化學與生物物理學報,2000,32:179-182.

7．Lay.JOJr.MALDI-TOFmassspectrometryofbacteria.[J].MassSpectromRev,2001;20(4):172-194.

8．HarveyDJ.Identificationofprotein-boundcarbohydratesbymassspectrometry[J].Proteomic,2001;1(2):311-328.

9．KARASM,HILLENKAMPF.Laserdesorptionionizationofproteinswithmolecularmassesexceeding10000daltons[J].Anal.Chem,1988,60:2299-2301.

10．龔海霞,陳榮華,郭錫熔.蛋白質組技術及其在臨床醫學領域的運用.國外醫學兒科學分冊,2001;28(6):287-289.

11．魏開華,楊松成,王紅霞,等.轉印到膜上的蛋白質的質譜分析.質譜學報,2000;20(3,4):89-90.

12．司英健.蛋白質組學研究的內容、方法及意義.國外醫學臨床生物化學與檢驗學分冊,2003;24(3):167-168.

13．王征,阮幼冰,官陽.肝細胞癌患者血清蛋白質組成分的雙向凝膠電泳-飛行時間質譜分析.中華病理學雜志,2003;32(4):333-336.

14．黃珍玉,于雁靈,方彩云,等.質譜鑒定磷酸化蛋白研究進展.質譜學報,2003;24(4):494-500.