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隨著經(jīng)濟與科技的發(fā)展,以及人們生活水平的提高,淡水養(yǎng)殖已經(jīng)成為我們經(jīng)濟發(fā)展的重要組成部分。而近年來,濱州市濱城區(qū)重點發(fā)展科技漁業(yè),水產(chǎn)養(yǎng)殖面積將近6萬畝,千畝以上的漁業(yè)養(yǎng)殖地、示范區(qū)共8處,全區(qū)有著強勁的漁業(yè)發(fā)展態(tài)勢,水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模也日益強大,在這種產(chǎn)業(yè)發(fā)展局勢下,水質(zhì)的調(diào)查以及對相關(guān)污染的研究解決尤為重要,為全區(qū)水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)濟的可持續(xù)發(fā)展提供技術(shù)支持與動力。
1 淡水養(yǎng)殖的水質(zhì)污染
1.1 污染分類
淡水養(yǎng)殖的廢水會污染環(huán)境,尤其是集約養(yǎng)殖生產(chǎn)的污水,并且伴隨著生活污水與工業(yè)廢水的隨便排放,會降低漁塘的調(diào)節(jié)與自凈能力,導(dǎo)致水質(zhì)的進步惡化。淡水養(yǎng)殖的廢水中,主要存在以下幾類污染物:重金屬污染、有機物污染、NH3-N、NO2-N等,其中,有機物污染是水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水中的主要污染。
1.2 有機物污染
有機物污染除了會讓水體缺氧,對養(yǎng)殖的生物造成直接危害,而且也會誘發(fā)水產(chǎn)養(yǎng)殖的品種頻繁爆發(fā)性疾病。因此,有機物污染是淡水養(yǎng)殖的關(guān)鍵的制約點。有機物污染的發(fā)生主要是通過浮游生物代謝、殘餌以及養(yǎng)殖品種的排泄物等的分解而成。由于目前水產(chǎn)養(yǎng)殖的工業(yè)化、集約化,養(yǎng)殖的密度以及投餌的數(shù)量都極大的增加,殘餌以及排泄物也隨之增加,造成有機物污染更加嚴(yán)重。養(yǎng)殖水中的有機物污染一般由水質(zhì)的COD值(化學(xué)需氧量)體現(xiàn)出來,COD值高則會引發(fā)魚類疾病以及感染性病毒的爆發(fā)。
2 淡水養(yǎng)殖水質(zhì)污染處理
2.1 淡水養(yǎng)殖污染處理辦法分類
面對日益嚴(yán)峻的淡水養(yǎng)殖水質(zhì)污染情勢,對污染的處理勢在必行。目前,對于污染的處理,主要有物理消毒、化學(xué)藥物及微生物修復(fù)等辦法。但物理消毒以及化學(xué)藥物處理法,在處理污染的同時,也會對水質(zhì)環(huán)境、水產(chǎn)品、水中有益微生物帶來副作用,方法處理不當(dāng)或者過量,反而會加重污染。在這種情況下,微生物修復(fù)法的研究和應(yīng)用顯得更為重要。
2.2 微生物修復(fù)養(yǎng)殖有機污染
微生物修復(fù)法是通過生物拮抗、通過微生物間的相互抵制、相互排斥、相互殘殺來減少消滅有害生物。水產(chǎn)養(yǎng)殖水質(zhì)中的有益微生物,能夠清除養(yǎng)殖水域底端的長期積累的殘餌、動植物殘體、排泄物和有害的氣體(硫化氫、氨等),先將其分解成小分子(多肽等),然后分解成更小分子的有機物(單糖、氨基酸等),最終將其分解成硝酸鹽、二氧化碳、硫酸鹽等,有效降低水中的BOD及COD,降低水中的NO2-N、NH3-N、氨以及硫化物的濃度,大大改善水質(zhì)。并且有益微生物能夠為水域環(huán)境中的浮游類植物提供其所需的營養(yǎng)要素,加快其繁殖,這些植物在光合作用后,又可以為水中的養(yǎng)殖物的呼吸、有機物分解供氧,形成良性循環(huán)。這種循環(huán),不僅有利于養(yǎng)殖物種的快速生長,而且大量繁殖的有益微生物會占據(jù)病原微生物的在生態(tài)環(huán)境中的位置,進而抑制病原微生物的繁殖,減少水產(chǎn)養(yǎng)殖物種的疾病發(fā)生。
2.3 有益微生物
水產(chǎn)養(yǎng)殖中的主要的有益微生物有光合細菌、硝化細菌、芽孢桿菌、酵母菌、蛭弧菌、放線菌、培育的復(fù)合微生物等類別。光合細菌不是利用二氧化碳,而是在厭氧條件下通過小分子的有機物合成自我繁殖時所需的養(yǎng)分。光合細菌對大分子有機物的氧化是無效的,因此當(dāng)處理被有機物嚴(yán)重污染的底泥時,沒有多大的成效。硝化細菌是一種自給自足型的細菌,它只要在含氧的水中就能繁衍,不需要其他有機物。但硝化細菌的增殖速度非常慢,一兩天僅僅增殖出一倍的量,如果水質(zhì)中含過多有機物會反而會阻礙其繁衍。芽孢桿菌在土壤、植物表層面、水體等自然環(huán)境中廣泛存在,是化能有機營養(yǎng)型。酵母菌是單細胞的蛋白,富含營養(yǎng),其中的維生素含量,是魚粉的三十倍以上。蛭弧菌是具有攻擊、裂解、侵染其他微生物功能的寄生菌。放線菌可以產(chǎn)生多種抗生素、酶和維生素,同時可以降解一些難以分解物質(zhì),如纖維素、甲克素等,為其他有益維生素的增殖創(chuàng)造良好的水質(zhì)環(huán)境。復(fù)合微生物制劑是將擁有不同的特性的微生物的菌株,經(jīng)過培育與復(fù)合,形成復(fù)合微生物制劑。
3 有益微生物功能
有益微生物現(xiàn)在已經(jīng)在水產(chǎn)養(yǎng)殖中廣泛運用,通過有益微生物與病原或者潛在的致病的微生物之間的競爭,產(chǎn)生相互制約作用,減少有機物污染的可能性,降低養(yǎng)殖生物發(fā)生病害的機率。而且有益微生物可以為魚類提供生長所需的營養(yǎng)物質(zhì),幫助養(yǎng)殖物促進消化。一些有益微生物比如齙牙桿菌,還可以有效凈化水質(zhì),減少水中的致病菌,提高水產(chǎn)動物的長速以及幼體存活率。與此同時,微生物試劑還能夠增強水產(chǎn)動物的免疫系統(tǒng)的抗菌和吞噬作用,增強其非特異性免疫力。
4 微生物修復(fù)水產(chǎn)養(yǎng)殖污染存在的問題
雖然微生物修復(fù)法已經(jīng)得到廣泛的推廣及應(yīng)用,但在實際水產(chǎn)養(yǎng)殖中仍然存在一些問題,需要水產(chǎn)養(yǎng)殖負責(zé)部門的關(guān)注和重視。首先是微生物種類的選擇,雖然現(xiàn)在市場上已經(jīng)有許多微生物試劑運用在淡水養(yǎng)殖中,但這些商品性的制劑很多是為陸地生物所研究設(shè)計的,并不是全部適用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。所以在菌種的選擇上,應(yīng)謹(jǐn)慎考慮,選擇與確認適合自己水域的菌株。微生物修復(fù)養(yǎng)殖的水體,有一定的局限性,一是水型的復(fù)雜性,二是每種生物對環(huán)境的要求都有一定的特性,有益微生物并不是適合所有的養(yǎng)殖水體的環(huán)境。因此在現(xiàn)有研究的基礎(chǔ)上,要針對不同的水型選擇不同的菌種,并確定相匹配的用量與用法,提高微生物修復(fù)的有效性。要加強對應(yīng)用對象和水質(zhì)環(huán)境的研究,注意微生物施入后,對環(huán)境與宿主的影響,有些細菌在有益微生物施用前是無毒無致病性的,環(huán)境變化后,出現(xiàn)了變異,反而導(dǎo)致了細菌的致病性,這一點在運用中需加強研究。在微生物修復(fù)養(yǎng)殖有機物污染的研究開發(fā)過程中,多是在特定的實驗條件下進行,并未實地考察,對各種水質(zhì)條件分析試驗,而部分微生物卻是條件性致病菌,只會在特定條件中才會發(fā)揮我們期望的作用,所以若未對水域環(huán)境進行試驗,微生物在實際運用中有可能不會產(chǎn)生預(yù)期效果、產(chǎn)生的效果不持續(xù)甚至產(chǎn)生相反效果。
5 總結(jié)
隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展與研究,微生物修復(fù)養(yǎng)殖有機物污染的研究已經(jīng)相對成熟,取得許多喜人的成果,并運用在實際生產(chǎn)中,對我國的水產(chǎn)養(yǎng)殖的發(fā)展提供重要技術(shù)支持。但是,實際運用中依然存在很多問題,需要我們有針對性的深入研究,讓微生物修復(fù)的效果更加持續(xù)穩(wěn)定、適用更加廣泛。同時,水養(yǎng)生物的世界是仍有我們未知的領(lǐng)域,將來會有更多的問題爆發(fā),需要我們在對現(xiàn)有污染研究的同時,做好超前研究,對潛在問題做好應(yīng)對措施,讓水產(chǎn)養(yǎng)殖呈現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展?fàn)顟B(tài)。
參考文獻
[1]趙永坤.淡水養(yǎng)殖水質(zhì)調(diào)查及微生物修復(fù)養(yǎng)殖有機物污染的研究[D].南昌大學(xué),2008.
關(guān)鍵詞:水產(chǎn)養(yǎng)殖;疾病;用藥
中圖分類號: S931 文獻標(biāo)識碼:A 文章編號:1674-0432(2010)-08-0226-1
1 當(dāng)前水產(chǎn)養(yǎng)殖用藥的幾大誤區(qū)
1.1 盲目用藥和加大劑量
在水產(chǎn)養(yǎng)殖的整個過程中,因存在多種治病因素而導(dǎo)致水產(chǎn)養(yǎng)殖動物時常患有各種各樣的疾病。水產(chǎn)動物一旦病情發(fā)作,應(yīng)該依照動物的病情病癥有針對性的進行選藥和治療,以免造成不必要的更進一步的經(jīng)濟損失。而很多養(yǎng)殖戶“病重亂投藥”,在大量的水產(chǎn)動物發(fā)病時亂了方寸,不管藥物對癥對因與否、效力是否合適,是否有禁忌,拿來即用,大多數(shù)情況還是疾病非但未得到有效控制,反而惡化,還貽誤了動物治療時間,使發(fā)病率和死亡率增加,因此,一定要嚴(yán)格用藥的對癥效應(yīng)。
任何藥物都有其嚴(yán)格規(guī)定的劑量和使用方法,必須要在其合理的劑量范圍內(nèi)正確使用,才可能取得良好的治療效果,且過猶不及。很多的養(yǎng)殖戶認為,劑量越大就越有效果,因而盲目加大劑量,因此常常使藥物劑量過大,造成養(yǎng)殖水產(chǎn)中毒甚至死亡。目前很多養(yǎng)殖戶用藥知識不足,對用藥禁忌比較忽視,武斷的認為多種藥物一起混合使用,那么解決問題的幾率會更大,效果更好,因而經(jīng)常隨意將幾種藥物放在一起混用,不是引起死亡事故,就是導(dǎo)致藥效降低,損失慘重。
1.2 嚴(yán)重缺乏對內(nèi)服藥的使用的重視
受傳統(tǒng)防治手段的限制,即便是很多沿海地區(qū),養(yǎng)殖戶在防治水產(chǎn)動物疾病時,無論水產(chǎn)動物患的是什么病,都片面的強調(diào)外用藥的使用,往往采取潑灑的方法,極少投喂內(nèi)服藥。這種現(xiàn)象很普遍,但是非常偏激。對于某些水產(chǎn)動物來說,不僅要潑灑外用消毒液或殺蟲劑,用于消滅水體和養(yǎng)殖動物體表體內(nèi)的病原微生物,同時還應(yīng)投喂藥餌,清除體內(nèi)的寄生蟲,達到標(biāo)本兼治的目的。
1.3 高溫季節(jié)用藥
大多數(shù)漁民都認為,溫度與藥劑的療效成正比。高溫可以使藥物擴散,從而提高治療效果。這是沒有科學(xué)根據(jù)的。以魚類為例。當(dāng)氣溫超過38℃時,魚停止攝食,而藥液揮發(fā)加快,如果在高溫季節(jié)中午用藥,不僅起不到防治魚病的效果,反而會造成魚中毒。大多數(shù)藥物隨著溫度升高毒性增強,特別是殺蟲類藥物,如硫酸銅,在16-30℃范圍內(nèi),水溫每升高5℃,藥效便會增強85-90%。高錳酸鉀水溶液不穩(wěn)定遇光發(fā)生分解,生成二化錳沉淀。碘制劑在高溫下易揮發(fā)等。池塘潑灑藥物時間一般應(yīng)在上午8-9時或下午3-5時,中午一般不用藥。
2 選擇水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的用藥法需要考慮的因素
水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的用藥方法,主要有拌藥餌投喂法、注射法、浸泡藥浴法、懸掛消毒法和涂抹法等。選擇恰當(dāng)?shù)挠盟幏椒ū仨氁C合考慮下列因素:
2.1 因物而異――根據(jù)患病動物的狀況選擇
患病后的水產(chǎn)養(yǎng)殖動物一般都較少攝食甚至不攝食,行動緩慢或出現(xiàn)離群獨行等傾向。對于食欲下降的水產(chǎn)動物,即使在飼料中拌上藥物進行投喂也未必會起到實質(zhì)性作用,只能是對尚能攝食的個體起作用,因而治療目的是難以達到的;而對于那些不能攝食的動物則根本起不到作用,而未被攝食的藥餌侵入水中,還可能不斷地擴散,逐步侵害養(yǎng)殖環(huán)境。因此,采用投喂藥餌時要注意患病水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的攝食能力。例如,對于魚類水產(chǎn),往往可以使用有誘食功能的藥劑。魚類對糖類和鹽的味覺較為靈敏,為激發(fā)患病魚種的食欲,可以在藥餌中添加適量的誘食藥劑。根據(jù)魚類獨特的狀況,添加誘食藥劑,從而提高了治病效果。
2.2 有的放矢――根據(jù)病原體的特性選擇
攜帶于水產(chǎn)養(yǎng)殖動物身上的病原體有病毒、細菌和寄生蟲等多種類型,對于不同類型的病原體應(yīng)采用不同的藥物。而且并不存在包治百病的藥物。因此,必須在確定病灶的基礎(chǔ)上,對病因作出正確的診斷之后再進行藥物的選擇,對于病毒類的病原,目前還沒有用于根治的絕對有效的藥物,而對患病毒的動物用藥,也僅僅是為了控制病原性細菌所引起的二次感染。
對于細菌性水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病,一般采用抗生素藥物進行治療,在這種情況下,還需要注意患病動物是全身性感染還是局部感染,由此來選擇用藥方式,如鰻魚的愛德華菌病,因病菌可以通過血液在全身流動,因而采用投喂藥餌法可以獲得較好治療效果,而對于細菌性鰓病和柱狀菌病,其患病部位主要是魚鰓和體表,藥物能直接作用于病原體,可采用浸泡藥浴法治療。
2.3 根據(jù)藥劑型選擇
漁藥的種類和劑型也多種多樣,有粉劑、針劑、片劑等,能溶于水或經(jīng)過少量溶媒處理后能溶于水的藥物,既可以制成藥餌投喂,也可作為藥浴使用。對于不能溶于水的各種藥物則不能采用藥浴法,一般漁藥生產(chǎn)商都是根據(jù)藥物的使用方法和給藥途徑來生產(chǎn)出不同劑型的,使用者要認真地閱讀產(chǎn)品說明書。有的劑型藥物在消化道內(nèi)不容易吸收,而較容易通過魚鰓吸收。中西藥結(jié)合的方法已經(jīng)廣泛用于水產(chǎn)動物治病之中,中藥副作用少,成本低,西藥藥效迅速。實踐證明,有療效的中草藥摻入一些西藥,既能提高藥效,又有效降低了成本。如,黃連、大黃、黃柏、穿心蓮、地錦草等碾成粉末,摻入一些西藥,比單獨使用中草藥要提高5-10倍的療效。
要做到科學(xué)、安全、合理地使用魚藥,在不危害人類健康的同時,又積極保護水域生態(tài)環(huán)境,是現(xiàn)代水廠養(yǎng)殖業(yè)貫徹科學(xué)發(fā)展觀的基本體現(xiàn)。
參考文獻
[1] 孔淑珍,水產(chǎn)養(yǎng)殖用藥的幾個問題[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問,2010,(4).
[2] 王玉堂,水產(chǎn)養(yǎng)殖用藥常識與注意事項(1)[J].中國水產(chǎn),2010,(2).
[3] 王玉堂,水產(chǎn)養(yǎng)殖用藥常識與注意事項(2)[J].中國水產(chǎn),2010,(3).
一、池塘環(huán)境
1.池塘消毒。池塘是水產(chǎn)養(yǎng)殖動物棲息的場所,也是病原體滋生的場所。池塘環(huán)境是否清潔,直接影響到魚類等各種水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的生長速度,可在價格合適的時候上市。
1.1干塘清塘,加固塘基。在冬季捕魚后,將塘水排干,挖去一層污泥,然后讓陽光曝曬,可達到清除蟲害的目的。若因生產(chǎn)需要養(yǎng)過冬魚類,未能做到冬季捕完后干塘,可用排污機將塘堤埂披上的雜草清除,以減少昆蟲等產(chǎn)卵的場所。同時加固塘基,預(yù)防滲漏。
1.2藥劑清塘,殺毒消菌。生石灰清塘在池塘修整后,選擇晴天進行生石灰清塘,將干粉均勻干撒到塘底或池底及塘基上,再故入4-6厘米清水,次日用長柄耙將池底淤泥和石灰漿調(diào)勻,發(fā)揮生石灰的殺毒作用。有些魚類池塘,若清塘清池前無法排水,或原池水排出后又無法補入新水,可以進行帶水清塘。
1.3凈化水質(zhì)。為了保證水產(chǎn)養(yǎng)殖系統(tǒng)的安全性和可靠性,可以利用質(zhì)量平衡原理進行設(shè)計。該原理是:“在某個單元中,某一物質(zhì)的累積量,等于該物質(zhì)的進流量減去出流量,再加上增生量。”利用該原理,可以準(zhǔn)確地分析出被養(yǎng)殖水產(chǎn)品所需要的水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(比如氨氮、溶氧、亞硝酸氮、弧菌數(shù)、生菌數(shù)以及BOD等)下,可以放養(yǎng)的水產(chǎn)品數(shù)量,并以容許放養(yǎng)的最低量作為實際設(shè)計放養(yǎng)量,(1)光合細菌艋水質(zhì)。光合細菌投入池塘中,能迅速消除水體中的氨氮、硫化氫、有機酸等有機物質(zhì),平衡酸堿度,改善池水質(zhì)量。投放光合細菌要注意:多菌種混合比單菌種投喂好有機物腐敗程度越高、污染越嚴(yán)重的池底投放效果越好,可與麥飯石、沸石等合用,效果更佳不能與消毒劑合用,以免被殺死。(2)凈水活菌凈化水質(zhì)。凈水活菌是由多種化能異樣菌組成,具有改善水質(zhì)的功能,它們克服了光合細菌不能直接利用大分子有機物、不能分解生物尸體及殘餌糞便等不足,兼有氧化、氨化、硝化、反硝化、解磷、硫化及固氮的作用。不僅能凈化水質(zhì),還為單胞藻的繁殖提供了大量營養(yǎng)。而且魚類的肉質(zhì)鮮美,市場價格高。
二、調(diào)整放養(yǎng)密度。
實行輪捕輪放和輪養(yǎng):1.是魚類實行輪捕輪放,改變過去年底一次干塘起捕的習(xí)性,常年根據(jù)市場魚價適時起水銷售,賣個好價。可一次放足,捕大銷售。也可多次放養(yǎng)大規(guī)格魚種,捕大補小。時刻保持水體有足夠多的載魚量,常年保持均衡上市,根據(jù)魚價波動情況,靈活上市,提高效益。2.是各種魚、蝦等輪養(yǎng)。這樣不僅可根據(jù)市場靈活地選擇水產(chǎn)養(yǎng)殖品種,還可減輕池底質(zhì)惡化程度,減少病害傳播機會。如有的養(yǎng)殖戶同一口池塘上半年養(yǎng)南美白對蝦,下半年養(yǎng)鯉魚,既提高了經(jīng)濟效益,又減少了病害的發(fā)生,效果好,值得借鑒。
三、池塘養(yǎng)魚的管理
1.經(jīng)常巡塘,觀察池塘中魚群動態(tài)
每天早、中、晚巡塘,黎明前觀察魚類有無浮頭現(xiàn)象,浮頭的程度如何;日間可結(jié)合投鉺和測水溫等工作,檢查魚活動和吃食情況。在高溫季節(jié),天氣突變時,魚類易發(fā)生嚴(yán)重浮頭,還應(yīng)在半夜前后巡塘,以及時制止嚴(yán)重浮頭,防止泛池。
2.除草去污,保持水質(zhì)清新和池塘環(huán)境衛(wèi)生,用時防除病害。
3.掌握池塘注排水,保持適當(dāng)水量、防澇抗旱、防止逃魚。根據(jù)情況,10~15d注水1次,以補充蒸發(fā)消耗,使魚類有充裕舒適的活動空間和良好的生活環(huán)境。
4.科學(xué)投餌,科學(xué)投餌的關(guān)鍵是合理安排投餌的時間和數(shù)量。以往根據(jù)“兩頭精、中間青,糞肥施兩頭,化肥施其中”的投餌施肥原則。但在其它條件正常情況下,吃食魚平均生長速度和相對增重率和溫度正相關(guān),且餌料系數(shù)在低溫時偏高。因此在6-8月魚體增重黃金時期不能全靠青料,而必須輔助投餌,更新觀念、肥料需求量預(yù)算和分配。在一定條件下,投喂餌肥料的數(shù)量和質(zhì)量決定著池塘養(yǎng)魚的產(chǎn)量,大力推行種草養(yǎng)魚,可將種植業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)有機結(jié)合起來。充分利用天然餌料資源。建立穩(wěn)定的精飼料和肥料供應(yīng)渠道。
5.其它措施。合理使用增氧機,投餌等漁業(yè)機械,搞好維修保養(yǎng)和用電。注意市場行情,及時安排出塘,有條件的地方可搞好輪捕輪放。做好池塘日記記錄和統(tǒng)計分析。
關(guān)鍵詞 中草藥;水產(chǎn)養(yǎng)殖;抑菌試驗;最低抑菌濃度
中圖分類號 S948 文獻標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-5739(2013)03-0303-01
我國水產(chǎn)養(yǎng)殖模式大部分屬于高密度養(yǎng)殖,高密度養(yǎng)殖有較高的投資回報,但是容易大規(guī)模暴發(fā)病害,在實際生產(chǎn)中為了防治病害,大量使用化學(xué)藥品及抗菌藥物,進而給水產(chǎn)品質(zhì)量帶來隱患。目前,利用我國傳統(tǒng)中草藥防治水產(chǎn)病害、減少抗生素使用量及提高免疫力成為獸醫(yī)藥理學(xué)研究熱點之一[1-3]。課題組根據(jù)2010年出版的獸藥國家標(biāo)準(zhǔn)匯編中中藥部分的內(nèi)容結(jié)合實際應(yīng)用,挑選出大黃、魚腥草、黃芪等多種中草藥進行抑菌效果測定,為增加抗菌中草藥種類和制劑研發(fā)提供科學(xué)依據(jù)[4]。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.1.1 供試菌株。試驗菌株共有3株,分別為:標(biāo)準(zhǔn)株嗜水氣單胞菌嗜水亞種菌株(購于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號:cgmcc1.0927);嗜水氣單胞菌(從湖州地區(qū)患病甲魚中分離得到);愛德華氏菌。后2組菌株由浙江省淡水水產(chǎn)研究所實驗室分離鑒定[5]。
1.1.2 供試藥物。供試大黃、黃芪、黃芩、甘草、穿心蓮、金銀花、虎杖、大青葉、魚腥草、板藍根、柴胡、川楝子、黃柏、地錦草、五倍子、茵陳、連翹、陳皮、貫眾、苦參,購于湖州開心人大藥房。
1.1.3 培養(yǎng)基。營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基購于杭州天和生物制劑公司,121 ℃滅菌15 min備用。
1.2 試驗方法
1.2.1 藥液提取。水提法,取各種單味中藥50 g,粉碎后加超純水300 mL,溫室浸泡過夜,煎30 min,紗布過濾藥液,重復(fù)3次,最后將過濾液蒸餾濃縮至藥液內(nèi)含原藥1 g/mL。
1.2.2 最小抑菌濃度(MIC)測定。采用試管倍比稀釋法:1號試管加1.8 mL營養(yǎng)肉湯,2~6號試管加1 mL營養(yǎng)肉湯。在1號試管中加入配好的藥液0.2 mL,充分混勻后用移液器吸取1 mL混合液加入第2管中,依次倍比稀釋至第6管,混勻后棄去第5管中的1 mL液體,最后試管里的藥液濃度比依次為1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320。第7管為生理鹽水對照組[6]。將細菌置于營養(yǎng)肉湯中37 ℃培養(yǎng)24 h,校正細菌濃度至1×106 cfu/mL,取菌液0.025 mL加到各管中,混勻后,置于37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h。MIC判定:以藥物最低濃度管中無細菌生長者為該試驗藥物的MIC值[7]。
2 結(jié)果與分析
20種中草藥提取液對3種細菌的體外抑菌試驗結(jié)果見表1。除黃芪、甘草、魚腥草、黃柏、陳皮外,其他中草藥提取液對嗜水氣單胞菌均有一定的抑菌效果,其中大黃、黃芩、穿心蓮、連翹、貫眾的抑菌效果最好,達到0.006 25~0.012 50 g/mL。虎杖、川楝子、茵陳、苦參、五倍子、大青葉等有較好的抑菌效果。中草藥對愛德華氏菌的抑菌效果與嗜水氣單胞(上接第303頁)
菌的結(jié)果相近。
3 結(jié)論與討論
在本試驗中發(fā)現(xiàn)各種中草藥的抑菌效果對嗜水氣單胞菌和愛德華氏菌效果相似,可能是由于這2種菌都是革蘭氏陰性菌,具體原因有待進一步的論證。
本試驗采用試管倍比釋法研究了20種中草藥對水產(chǎn)中常見的2種細菌的體外抑菌效果,其中大黃、黃芩、穿心蓮、連翹、貫眾的抑菌效果最好,達到0.006 25~0.012 50 g/mL。但是根據(jù)我國傳統(tǒng)的中獸藥學(xué),常見的單味藥的作用要比復(fù)方制劑效果差。根據(jù)不同的配伍,效果相差較大,不同的藥物有協(xié)同或者拮抗作用。科學(xué)配伍不同的藥物組成復(fù)方制劑,能明顯提高療效[8]。
中草藥具有來源廣、毒性低、副作用小、不易產(chǎn)生抗藥性等特點,近年來,中草藥在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用越來越多,如提高水產(chǎn)動物營養(yǎng)、防治疾病、提高非特異性免疫等。2010年出版的獸藥國家標(biāo)準(zhǔn)匯編中藥方子有40個,其中水產(chǎn)用的有9種[9]。中草藥中的多種生物堿、揮發(fā)油、有機酸等有效成分既有抗菌作用也有免疫作用,能夠提高水生動物的免疫力進而提高自身的抗菌能力。本試驗為研發(fā)提高水生動物免疫力的中草藥復(fù)方制劑提供了一定的理論基礎(chǔ)[10]。
4 參考文獻
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一、益生菌的概念及作用機理
益生菌(Probiotics),是微生態(tài)制劑的一個類別,是通過改善腸道微生物平衡而對動物產(chǎn)生有利影響的活的微生物飼料添加劑。益生菌進入水體或消化道后,能夠同其他菌體競爭營養(yǎng)或粘附位點,產(chǎn)生抑菌物質(zhì),抑制病原菌的生長,降低病原菌的數(shù)量;能夠強化水產(chǎn)動物飼料的營養(yǎng),改善機體代謝,提高水產(chǎn)動物機體免疫力;能夠降解和轉(zhuǎn)化有機物,分解殘留餌料、動植物殘體,減少或消除氨氮、硫化氫、亞硝酸鹽等有害物質(zhì),改善水質(zhì)。
二、微生態(tài)水質(zhì)調(diào)節(jié)劑
利用水中的有益微生物改善水質(zhì),防治水產(chǎn)動物疾病,提高產(chǎn)量,是目前水產(chǎn)專家研究的重要課題。
(一)光合細菌(PSB)
光合細菌是一類能夠產(chǎn)生光合作用但不產(chǎn)生氧氣的原核微生物的統(tǒng)稱。其主要作用是可以利用水體中的無機物或有機物,通過不產(chǎn)氧的光合作用,合成菌體自身物質(zhì),從而有效降低水體中有毒無機物如硫化氫和氨氮等的含量,并改善由于殘餌和糞便等有機質(zhì)造成的水體富營養(yǎng)化現(xiàn)象。而菌體本身又含有多種的營養(yǎng)成分是養(yǎng)殖生物良好的天然活體餌料。熊暉等的研究表明,光合細菌能有效去除水體亞硝態(tài)氮和硝態(tài)氮,還能有效地增加養(yǎng)殖水體中微生物群落的豐富度。目前主要使用的光合細菌有著色桿菌、外硫紅螺菌、紫色非硫細菌和綠色硫細菌等。
(二)化能異養(yǎng)菌
化能異養(yǎng)菌在水體中能發(fā)生氧化、氨化、反硝化、解磷、硫化、固氮等作用,把養(yǎng)殖動物的排泄物、殘存飼料、動植物殘骸等有機物迅速分解為二氧化碳、硝酸鹽、磷酸鹽等,為單細胞藻類生長繁殖提供營養(yǎng)。單細胞藻類的光合作用又為有機物的氧化分解,微生物受養(yǎng)殖生物的呼吸溶解氧,從而構(gòu)成一個良性的生態(tài)循環(huán),使養(yǎng)殖池內(nèi)的菌藻趨于平衡,維持和營造良好的水質(zhì)條件。向羅非魚養(yǎng)殖水體中每隔25d添加一次以芽孢桿菌為主的微生物復(fù)臺菌劑,能明顯改善水質(zhì)條件,有效降低氨、氮與亞硝酸鹽,營造良好的水色,促進羅非魚的生長。以芽孢桿菌、光臺細菌、蛭孤菌等制戚的“益生菌王”,將其按1mg/kg餌料的用量投入養(yǎng)蝦池內(nèi),每星期1次,共計3次。結(jié)果試驗池對蝦病毒病發(fā)病時間較對照組延遲l0d,產(chǎn)量提高40%。用于文蛤的3個池塘均未發(fā)病,而對照組的3個池塘發(fā)病率為30%~50%
三、微生物控制劑
拮抗是微生物之間普遍存在的自然現(xiàn)象。在同一生態(tài)位中微生物通過營養(yǎng)競爭、空間競爭或分泌抗生素、細菌素等毒素抑制其他微生物的生長。微生物控制技術(shù)便是應(yīng)用這一原理,將具有拮抗特性的益生菌施入養(yǎng)殖水體,殺死或抑制病原微生物,為養(yǎng)殖動物營造良好的生存環(huán)境。Maeda等最早將這一技術(shù)應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中,將分離的益生菌PM-4加大蝦、蟹育苗水體,以抑制弧菌和某些真菌,促進幼體生長,提高成活率。Garriques等用溶藻膠弧菌競爭性排斥育苗水體中潛在的病原菌,以提高萬氏對蝦幼苗的產(chǎn)量。印度尼西亞將芽孢桿菌制劑應(yīng)用于成蝦養(yǎng)殖,成功地改善了水體和底泥中的細菌組成,發(fā)光弧菌的數(shù)目明顯減少,有效地控制了弧菌病的發(fā)生。一些海洋細菌也具有抗病毒活性。Maeda等用在水蛹交替單胞菌的去細胞上清液中培養(yǎng)3h的IHNV病毒感染EPC細胞,發(fā)現(xiàn)與對照相比病變細胞明顯減少,將此菌用于黃(魚參)育苗水體能提高幼體成活率,PCR檢測表明,對照池有SJNNV病毒。
四、餌料添加劑
(一)提供營養(yǎng),改善機體代謝,
提高餌料轉(zhuǎn)化率益生菌除了本身可以幫助動物對食物進行消化,提高飼料的利用效率外,本身也含有一些營養(yǎng)物質(zhì),如PSB富含蛋白質(zhì),粗蛋白質(zhì)含量達到65%,還含有多種維生素、鈣、磷和多種微量元素及輔酶Q等。同時,隨著它們在動物消化道內(nèi)的繁殖和代謝,又可產(chǎn)生動物生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì),如氨基酸、維生素等。還產(chǎn)生生長素之類的生理活性物質(zhì),有助于食物的消化吸收,而某些益生菌如芽孢桿菌,能使空腸內(nèi)的pH值下降,氨濃度降低,并產(chǎn)生淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶等消化酶類,協(xié)助動物消化餌料,以及產(chǎn)生各種B族維生素,加強營養(yǎng)代射,提高餌料轉(zhuǎn)化率等。另外,一些益生菌尤其是乳酸桿菌和鏈球菌在進入腸道后,會產(chǎn)生乳酸,使腸道內(nèi)容物pH值下降;而乳酸、丙酸、乙酸的含量上升,使得腸道呈現(xiàn)酸化,從而有利于鐵、鈣及維生素D等的吸收,有利于水產(chǎn)動物的生長。同時,減少腸內(nèi)胺和氨的生成,抑制病原菌的生長繁殖。
(二)增強水產(chǎn)動物免疫力
益生菌是良好的免疫激活劑,益生菌除了可以通過抑制致病菌減少疾病的發(fā)生,還可以通通過產(chǎn)生非特異性免疫調(diào)節(jié)因子等激發(fā)機體的免疫功能,增強其對病毒、細菌、真菌和寄生蟲等病原微生物的抵抗能力水產(chǎn)養(yǎng)殖生物多為分類地位較低的無脊椎動物,如蝦蟹、貝類以及低等的脊椎動物魚類,其自身的免疫系統(tǒng)多不完善,因而要依靠非特異性免疫提高其對病原微生物的抵抗能力。
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