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      動物實驗研究

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      動物實驗研究

      動物實驗研究范文第1篇

      關鍵詞:抗氧化實驗 老齡小鼠 氧化應激 動物實驗

      氧化應激是指體內氧化與抗氧化作用失衡、傾向于氧化作用而導致組織損傷[1]。氧化應激的發生,使機體內許多細胞分子生物,如DNA、脂質、蛋白質等易受到自由基引起的氧化損傷,導致細胞和組織功能障礙,并與多種疾病的發生密切相關[2]。因此抗氧化物質研究對各種氧化應激相關疾病的防控意義重大。近年研究表明人工合成抗氧化劑副作用較多,可能對人體多種臟器產生不利影響,故天然的抗氧化物日漸受青睞[2]。本研究對含有多種藥食同源成分的某保健食品膠囊進行動物實驗,探討其抗氧化功效。

      1 材料與方法

      1.1 樣品

      由某廠家提供的保健食品膠囊,配方組成:三七450 g、紅景天450 g、枸杞子500 g、五味子300 g, 提取濃縮制成干膏粉255 g, 再加葡萄籽提取物33.4 g及其他輔料,制成1 000粒(0.5 g/粒)膠囊。人體服用推薦劑量2.7 g/d, 按成人體重60 kg推算折合劑量為0.045 g/kg·bw。

      1.2 實驗動物

      SPF級ICR種雄性8~10月齡小鼠40只(湖南斯萊克景達實驗動物有限公司),實驗動物生產許可證號:SCXK(湘)2013-0004;實驗期間小鼠飼養于22 ℃~26 ℃、濕度50%~56%的屏障環境中。實驗動物使用許可證號:SYXK(湘)2015-0012。

      1.3 儀器與試劑

      動物稱量秤、離心機、水浴箱和紫外可見分光光度計等;丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)及蛋白質羰基試劑盒(南京建成生物工程研究所)。

      1.4 方法

      試驗初始、中期、末期均對小鼠進行體重監測。試驗初始,采尾尖血制成4%溶血液,用試劑盒測定其MDA水平。根據MDA含量將40只小鼠平均分為1個對照組和低、中、高3個劑量組(0.225、0.450和1.350 g/kg·bw),保證各組試驗前MDA值均衡。各劑量組小鼠經口灌胃給予相應劑量的某膠囊內容物,溶劑對照組給予等體積蒸餾水,灌胃1次/d, 灌胃體積為0.2 mL/10 g·bw, 連續30 d。試驗末期,采尾尖血測定4%溶血液中MDA含量、全血中GSH含量;摘眼球采血,離心后取血清測定SOD活力及蛋白質羰基含量。

      1.5 數據處理

      計量數據以xˉ±s表示。用Excel 2007、spss 19.0軟件統計分析。4組數據如果方差齊,則用單因素方差分析進行總體比較;方差不齊時Dunnett法進行多個劑量組與1個對照組均數間的兩兩比較,P<0.05有統計學意義。

      2 結 果

      2.1 老齡小鼠體重變化

      實驗初始、中期、末期,3個劑量組的小鼠體重及增重與對照組差異均無統計學意義,見表1。

      2.2 抗氧化試驗結果

      試驗末期各組間小鼠溶血液中MDA含量差異有統計學意義(F=4.16,P=0.013);與對照組比較,高劑量組的MDA含量降低,見表2。

      試驗末期各組間小鼠血清中SOD活力和全血中GSH含量差異均有統計學意義(F=3.38,P=0.028;F=3.24,P=0.033);與對照組比較,高劑量組SOD活力增加、GSH含量升高;各劑量組小鼠血清中蛋白質羰基含量差異無統計學意義(F=0.54,P>0.05),見表3。

      表1 某膠囊對小鼠體重的影響(g)

      表2 某膠囊對小鼠4%溶血液中MDA含量的影響

      表3 某膠囊對小鼠血清中GSH含量、SOD活力和蛋白質羰基含量的影響

      3 討 論

      氧自由基反應和脂質過氧化反應在機體代謝中起重要作用。MDA是機體內自由基作用于脂質過氧化的終末產物,大量產生時可導致細胞膜損傷[3]。SOD是生物體中清除自由基的主要物質,SOD水平常作為象征衰老的直觀指標[4]。GSH是機體內一種強抗氧化劑,可消除自由基并參與細胞解毒及細胞損傷修復,有抑制脂質過氧化、保護細胞膜、恢復細胞功能的作用[5]。蛋白羰基是機體內多種氨基酸在蛋白質氧化修飾過程中產生的早期標志,能直接反映蛋白質的損傷程度[6]。

      本研究樣品膠囊以三七、紅景天、枸杞子、五味子和葡萄籽提取物為主要原料。研究表明三七多糖有較強的體外抗氧化活性[7],明顯降低血清中的MDA含量,并提高GSH-Px活力[8];紅景天中主要抗氧化物質包括紅景天苷和黃酮類物質。侯紅平等[9]發現紅景天苷的抗氧化作用可有效保護慢性阻塞性肺疾病體外細胞模型,但機體攝取紅景天提取物有最佳劑量,劑量過大時反而降低機體的抗氧化能力[10];苗婷婷等[11]研究發現枸杞多糖可能通過清除自由基、提高抗氧化酶活性、上調免疫應答、抑制神經系統的老化、調節細胞凋亡等途徑延緩衰老進程。多項動物實驗表明枸杞多糖可通過提高小鼠體內SOD活性、降低MDA含量[12],降低氧化產物含量[13],起到延緩衰老的作用;有研究發現,五味子提取物有效成分不僅可直接清除自由基[14],且對皮膚細胞的氧化應激有保護作用[15]。此外五味子中多糖[16]、總木脂素類成分及五味子乙素[17]有良好的抗氧化能力;方歡樂等[18]發現葡萄籽原花青素對D-半乳糖致衰老模型小鼠氧化應激反應的各項生化指標及肝臟組織病理狀態有一定改善作用,且葡萄籽對SD大鼠無胚胎毒性和致畸毒性,安全性較高[19]。

      本研究用的樣品膠囊以幾種藥食同源物質合理配伍,其中1.350 g/kg·bw劑量能降低小鼠血中MDA水平、提高小鼠血清中SOD活力、提高小鼠全血中GSH含量,說明該膠囊內容物可降低動物體內脂質過氧化程度、增加抗氧化酶抑制自由基反應能力及增強機體受到的氧化壓力程度,實驗結果與以上單個成分的抗氧化資料基本類似。本研究各劑量組小鼠血清中蛋白質羰基含量與對照組差異均無統計學意義,說明此膠囊對動物體內蛋白質氧化損傷的保護作用不明顯,也可能由于動物血清中蛋白質羰基含量較低,檢測值存在較大的人工誤差。

      綜上所述,提示含有三七、紅景天、枸杞子、五味子和葡萄籽提取物為主要原料的某膠囊,對實驗動物有抗氧化功能。

      參考文獻

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      動物實驗研究范文第2篇

      一、研究專題和期限

      專題1、實驗動物比較、相關標準研究領域

      研究目標:對常用嚙齒類實驗動物進行比較研究并建立數據庫;制定填補國內空白的若干實驗動物地方標準;凡涉及本專題項目需將有關研究成果納入*實驗動物資源中心統一管理。

      研究內容:

      1、對常用大、小鼠、豚鼠和地鼠進行比較生物學和比較醫學系統研究,提出各自在生物醫學等主要研究領域應用和回避的依據、選擇原則、運用方法;

      2、對常用實驗動物組織器官超微形態學結構進行比較研究并建立數據庫;

      3、建立兔、犬、猴心血管和心電圖數據庫并進行分析評價;

      4、制定實驗用羊標準、嚙齒類實驗動物墊料標準,大、小鼠運輸標準(鼓勵多家單位聯合申報)。

      進度要求:年9月30日前完成

      專題2、實驗動物新技術的建立及應用研究

      研究目標:建立若干種實驗動物質量檢測、遺傳工程和保種育種新技術;建立斑馬魚主要臟器三維電子圖像。

      研究內容:

      1、從病原學、血清學以及分子生物學領域研究實驗動物中支原體、泰澤氏菌、螺桿菌、CAR桿菌的特性,確立先進、可靠的檢測方法;

      2、以DNA和RNA各一種病毒的主要抗原基因進行真核表達,結合單克隆抗體技術建立診斷技術平臺,提升實驗動物質量控制水平;

      3、選擇4-6個品系作為供體和受體,構建2-5個染色體替換的小鼠新品系,初步建立PCR-LDR小鼠基因分型技術平臺;

      4、建立新的小鼠內源基因修飾技術,實現對小鼠內源基因的即時可逆調節,提高小鼠遺傳操作的效率,完善小鼠遺傳操作生物技術平臺的建設;

      5、在組織學研究的基礎上,采用IT技術初步建立斑馬魚的某種三維電子臟器;

      6、建立大鼠體外授精技術、冷凍技術、輔助體外受精技術(人工授精、ICSI);

      7、建立2-4種實驗動物人工哺乳和無菌技術,并培育2-4種無菌動物。

      進度要求:年9月30日前完成

      專題3、動物模型及其效果評價體系的建立與應用研究

      研究目標:建立若干種人類重要疾病的動物模型,并要求對每一種模型建立效果評價體系;凡涉及本專題項目需將有關研究成果納入*實驗動物資源中心統一管理。

      研究內容:

      1、建立若干種人類重要疾病的動物模型,重點建立不育大鼠模型、大、小鼠腦卒中模型、前列腺疾病模型、小型豬腹壁拉鏈模型、原位大腸癌模型等,并要求對以上模型建立效果評價體系;

      2、建立和完善腫瘤高轉移動物模型篩選技術。

      進度要求:年9月30日前完成

      二、申請方式

      1)本指南公開。凡符合課題制要求、有意承擔研究任務的法人、自然人均可以從“*科技”網站上進入“在線受理科研計劃項目課題可行性方案”,并下載相關表格《*市科學技術委員會科研計劃項目課題可行性方案(*版)》,按照要求認真填寫。書面可行性報告要求同時附上相應的知識產權狀況查新報告。鼓勵多家單位聯合申報,實行資源共享,并在申請材料中明確各自承擔的工作和職責,并附上合作協議或合同。

      2)課題責任人年齡不限。鼓勵通過課題培養優秀的中青年學術骨干。作為課題責任人和主要科研人員,不得同期參與承擔的863、973、國家科技攻關和*市重大、重點科研課題數超過三項。

      3)每一課題的申請人可以提出不超過2名的擬回避自己課題評審的同行專家名單(名單可以隨課題可行性方案一同提交)。

      4)本專項課題的申請起始日年7月4日,截止日期為年7月25日。課題申報時需提交書面可行性方案一式8份,并通過“*科技”網站提交可行性方案和所有表格。書面可行性方案集中受理時間為*年7月21日至7月25日,每個工作日上午9:00—下午4:30。所有書面文件請采用A4紙雙面印刷,普通紙質材料作為封面,不采用膠圈、文件夾等帶有突出棱邊的裝訂方式。

      5)網上填報備注:

      1)登陸“*科技”網,進入網上辦事專欄;

      2)點擊《科研計劃項目課題可行性方案》受理并進入申報頁面:

      -【初次填寫】轉入申報指南頁面,點擊"專題名稱"中相應的指南專題后開始申報項目(需要設置“項目名稱”、“依托單位”、“登錄密碼”);

      -【繼續填寫】輸入已申報的項目名稱、依托單位、密碼后繼續該項目的填報。

      動物實驗研究范文第3篇

      [關鍵詞] 補腎中藥;骨髓基質干細胞;堿性磷酸酶;礦化結節

      [中圖分類號] R274 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2013)08-0001-03

      骨質疏松癥是中老年人最常見的慢性病之一,其特征主要表現為骨的微觀結構退化、骨量減少。中醫學認為骨質疏松癥發生的重要原因是腎氣虛衰,補腎中藥方劑是治療骨質疏松癥較為有效的藥方。目前在補腎中藥促進成骨的基礎研究方面取得了一些成果[1],但是目前有關補腎中藥復方的研究仍在探索階段。本實驗自擬對成骨有作用的補腎中藥進行組合, 對體外培養的大鼠骨髓基質干細胞進行誘導,從細胞水平檢測補腎復方對骨髓基質干細胞的影響,觀察成骨情況。

      1 材料與方法

      1.1 動物

      選用出生6周齡雄性SD大鼠,體重不限,購于溫州醫學院實驗動物中心,合格證書:SCXK(浙)2006-0026。

      1.2 中藥藥材

      藥材(羊霍、杜仲、骨碎補、補骨脂、黨參、熟地、川牛膝、云苓、白術、煅龍骨、炒山藥、生蠣、丹皮)購自浙江溫州地區醫藥公司。

      1.3 儀器與試劑

      Thermo二氧化碳培養箱;Nikon 倒置生物顯微鏡;掃描電鏡,上海泰思肯貿易有限公司;RPMI-1640培養基、胰蛋白酶、MTT試劑、地塞米松、維生素C、β-甘油磷酸鈉、四環素鹽酸鹽, 均為Sigma 公司產品;胎牛血清,上海勁馬生物科技有限公司;堿性磷酸酶試劑盒,南京建成生物工程研究所。

      1.4 方法

      1.4.1 補腎中藥水提取液的制備 取羊霍、杜仲、骨碎補、補骨脂、黨參、熟地、川牛膝、云苓、白術、煅龍骨、炒山藥、生蠣、丹皮,按比例稱重混合后,加蒸餾水浸泡并煮沸3次,每次3 h,合并濾液并濃縮,用75%乙醇沉淀后靜置于冰箱過夜,次日過濾回收乙醇,用0.5%NaOH調pH至7.0,制成含生藥1 g/mL的藥液,冷藏備用。

      1.4.2 大鼠骨髓基質干細胞的分離與培養鑒定[2] 取出生6周左右的雄性SD大鼠,體重不限(由溫州醫學院實驗動物中心提供)。頸椎脫位法處死,無菌條件下取股骨,剪斷兩骨端,無血清培養液吹打髓腔并沖出骨髓。將組織均勻平鋪加10%DMEM培養基接種于10 cm培養皿內,放置于5%CO2、37℃培養箱培養。3 d換液1次,待細胞長滿瓶底時后傳代,利用第3代細胞進行實驗。倒置顯微鏡下觀察細胞形態并用鈣鈷法進行堿性磷酸酶染色。

      1.4.3 細胞增殖功能測定 采用MTT法[3]測定補腎中藥方劑對大鼠成骨細胞增殖的影響。細胞消化傳代后,調整細胞濃度加入96孔細胞培養板中,每孔加入培養液,放入5% CO2 37℃培養箱內培養。24 h后顯微鏡下觀察細胞生長合適后,分別換入含1 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L、100 mg/L、200 mg/L補腎中藥的DMEM培養基,共6組,每組12孔;對照為空白組,為單用20ng/mL的地塞米松。含不同濃度補腎方劑培養1、3、7、10 d。采用MTT法于490 nm波長,在酶標儀上測試各孔光吸收值。本檢測方法重復3次,分別計算對照組與實驗組的增殖率。

      1.4.4 細胞功能的表達 大鼠骨髓基質干以每孔1×105個/孔的密度被接種于6孔培養板,加入培養液,3 d后分別換入含0 mg/L、1 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L、100 mg/L、200 mg/L補腎中藥的DMEM培養基,定期更換培養液及干預藥物,不進行傳代直至檢測。

      ①細胞分化功能測定(ALP活性測定) 分別取各組(藥液濃度分別為0 mg/L、1 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L、100 mg/L、200 mg/L,共7組)培養至第7天的成骨細胞,倒除原培養液,經胰蛋白酶消化后吸出消化液,加入0.9%NaCl吹打后低溫凍溶至破碎,離心后上清液行酶免法測定堿性磷酸酶含量。②細胞礦化功能測定 同上述方法培養至第14天,利用von Kossa染色法顯示礦化結節。培養14 d后采用多聚甲醛進行固定。以直徑>200 μm邊界清晰的結節,為礦化結節的計數標準[1]。

      1.5 統計學方法

      采用SPSS16.0軟件處理,數據以(x±s)表示,多組間采用方差分析,然后行兩兩t檢驗,以P < 0.05為差異有統計學意義。

      2 結果

      2.1 成骨細胞的鑒定

      倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態,培養1 d后大部分的細胞為圓形,大小不等漂浮于培養液;培養2 d后部分細胞貼壁,形態主要為梭形、多角形或紡錘形等幾種形狀(圖1)。培養后7 d貼壁細胞增多可見偽足,瓶底長滿梭形或多角形細胞(圖2);10 d可見貼壁細胞形多呈梭形(圖3)。von Kossa染色礦化結節(圖4)。

      2.2 補腎中藥方劑對大鼠MSCs增殖的影響

      如表1所示,在1 d時100 mg/組高于空白組(t = 6.21,P < 0.001),且200 mg/組也高于空白組(t = 10.27,P < 0.001),差異有統計學意義(P < 0.05);在3 d時濃度為20 mg/L(t = 6.89,P < 0.001)、40 mg/L(t = 6.63,P < 0.001)、100 mg/L(t = 14.49,P < 0.001)、200 mg/L(t = 22.21,P < 0.001)的OD值均高于空白組,差異有統計學意義(P < 0.05);在7 d時濃度為20 mg/L(t = 15.39,P < 0.001)、40 mg/L(t = 24.36,P < 0.001)、100 mg/L(t = 32.84,P < 0.001)、200 mg/L(t = 29.80,P < 0.001) 的OD值均高于空白組,差異有統計學意義(P

      2.3 對礦化結節數的影響

      如表2所示,選取第14天,濃度20 mg/L組、40 mg/L組、100 mg/組、200 mg/組的礦化結節數與空白組比較,差異均具有統計學意義(P

      3 討論

      骨髓間充質干細胞是存在于骨髓中的間充質干細胞,它具有多向分化潛能,能夠自我更新,可在體外培養。骨髓間充質干細胞在一定的誘導條件下可以向軟骨細胞、成骨細胞、脂肪細胞、神經細胞、心肌細胞等多個方向分化[4]。成骨細胞是體內骨形成的主要細胞也是骨代謝的重要功能細胞,對維持骨的代謝平衡非常重要[5]。成骨細胞功能障礙或數量減少,都會導致骨組織代謝異常、骨質疏松等多種疾病的發生。骨質疏松癥在中醫學上被認為是腎氣虛衰所致,因此近年來越來越多的研究利用補腎中藥來治療骨質疏松癥。

      本研究發現,不同濃度組的補腎中藥均可促進骨髓間充質干細胞的增殖, 增強堿性磷酸酶的活性。堿性磷酸酶是骨髓間充質干細胞成骨分化的主要特征性酶,也是最早出現的指標,其由成骨細胞產生并可反映分化程度的高低。目前比較普遍的觀點認為,堿性磷酸酶在體外的鈣化中起著關鍵的作用[6],堿性磷酸酶活性的高表達標志著成骨細胞的分化成熟[7]。相較于堿性磷酸酶,礦化結節為骨形成的標志,它的形成代表了細胞進一步成骨分化成熟[8]。本實驗結果顯示,不同濃度的補腎中藥在不同程度上能刺激骨髓間充質干細胞的增殖分化成骨。

      傳統醫學認為“腎主藏精”,腎精可以生骨養髓的。本方劑所涵蓋的多味補腎中藥中部分作為單味中藥在體外有促進向骨髓基質干細胞成骨分化的作用。殷曉雪等[9]的研究發現羊藿可以上調BMP-2基因的表達,促進成骨細胞的增殖和分化。徐展望等[10]的研究發現補骨脂能促進大鼠成骨細胞的增殖。張立等[11]的研究發現杜仲也能通過刺激成骨細胞的增殖分化促進骨的重建。此外,Wang等[12]的研究指出骨碎補能促進人成骨細胞增殖作用。本實驗中的補腎中藥是在上述單味補腎藥物的基礎上經過組合構成,它能夠促進大鼠體外骨髓間充質干細胞增殖及其向成骨細胞分化。

      通過本實驗可以發現,補腎中藥對骨髓基質干細胞增值的影響。在低濃度不但沒有毒害作用,而且隨著濃度的增加,細胞增值作用遞增。中藥具有誘導分化的作用,和空白組相比(空白組也加入了誘導成骨液),中藥有誘導基質干細胞向成骨細胞分化的作用。中期的ALP和細胞分化成熟晚期的礦化結節表明,藥物對細胞的分化成熟作用明顯,特別是對成骨晚期的骨礦化,補腎中藥顯示出極佳的促成骨作用。

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      動物實驗研究范文第4篇

      【關鍵詞】 中藥; 治療; 靜脈炎

      The Research of Goat Animal Experiment in Vein Preventing Superficial Transfusion Phlebitis with Self Made “Qiwei Tongmai Heated Application”/FANG Xiao-li.//Medical Innovation of China,2012,9(25):003-005

      【Abstract】 Objective:To discuss the effect of intervening superficial transfusion phlebitis with self made “Qiwei tongmai heated application”.Method:UUO group:No intervention was given to goat every time except for injecting 20% mannit through superficial vein in hind leg.Control group:After injecting 20% mannit through superficial vein in hind leg of goat,50% magnesium sulfate was used for wet packing every time around the venipuncture site.Treatment group:After injecting 20% mannit through superficial vein in hind leg of goat,self made “Qiwei tongmai heated application” was used for heat packing every time around the venipuncture site,and moved before next puncture.Observe the change of cell around the goat superficial vein wall with light microscope.Result:In the UUO group,plenty of inflammatory cells were observed assembling in the the goat superficial vein wall,and thrombus formed.In the control group,some inflammatory cells were also observed gathering in the goat superficial vein wall,and the cell from cells wall were seen dropsy,but slighter than that of UUO group.In the experimental group,no inflammatory cells were observed assembling in the goat superficial vein wall,and the vein wall intact relatively and not dropsy.Conclusion:Partial external application of self made “Qiwei tongmai heated application”can promote blood circulation,remove blood stasis,clear heat,ease pain,and prevent the form of superficial phlebophlogosis,much better than wet dressing with 50% magnesium sulfate.It is cheap,and has easy operability in nursing,no side effect such as skin stimulus.It is worth promoting in clinical practice.

      【Key words】 Chinese medicine; Treatment; Phlebitis

      First-author’s address:The Orthopedic Hospital of Wendeng,Wendeng 264400,China

      動物實驗研究范文第5篇

      【摘要】實驗研究是現代醫學的常用方法和手段,動物模型中醫藥研究中發揮著巨大作用。復制中醫動物模型的難度大,造模方法多樣,有待進一步研究。我們從中醫藥研究應用動物模型意義、應用價值、復制模型的要求及存在的問題等方面談幾點看法。

      【關鍵詞】中醫藥;實驗研究;動物模型;應用價值;

      1 中醫藥實驗研究中開展動物實驗的意義和動物模型的應用價值

      1.1 提供發病率低、潛伏期長和病程長的疾病材料 臨床上不易見到的疾病可用動物模型隨時復制出來,如遺傳性疾病、免疫性疾病等在臨床上發病率較低,研究人員可以有意識地提高在動物種群中的發病率,隨時進行研究;腫瘤、呼吸道疾病、心血管疾病等,發生發展緩慢、潛伏期和病程較長,在人體上很難進行長期觀察,而許多動物生命周期較短,在實驗室可以進行長期實驗和研究。

      1.2 嚴格控制實驗條件,比較可靠地證實治療效果 人類疾病的轉歸除藥物治療外還受著多種因素的影響,如:氣候環境、精神情緒、飲食勞逸等,這些因素在一定條件下會導致疾病好轉或惡化。臨床上還可見到由于患者產生強烈的治愈欲求,對接受治療產生良好的療效愿望,心理上產生一種有效偏見,從而出現治療有效的反應,即所謂“假陽性”現象;反之,臨床上也常見到患者在治療中因飲食起居不慎或受到精神刺激等因素的影響,導致疾病惡化。這些都會造成醫生在治療疾病中產生錯誤的療效判斷。所以要比較可靠地評論藥物治療效果就需要嚴格控制,而對于動物來說則較容易嚴格控制。

      1.3 有利于樣品收集和簡化實驗操作,縮短研究周期,加快中醫發展 動物模型作為人類疾病的“縮影”或“復制品”,便于研究者按實驗目的與需要隨時采集各種樣品,或處死動物收集樣品,以了解疾病的全過程,這在臨床上是根本辦不到的。實驗動物的小型化發展趨勢也有利于動物飼養管理和簡化實驗操作。有些問題單憑臨床經驗積累需要花費很長時間才能得到解決,或者雖花費很長時間,問題仍有得不到解決,而通過動物實驗有些問題就可以得到迅速解決。

      2 復制中醫動物模型的基本要求

      2.1 符合中醫的理論特點 中醫學具有完整獨特的理論體系,在實驗動物模型制作方面,必須以中醫學的基本理論為指導,采用氣溫變化、飲食失宜、過服藥物及手術結扎等造型法,所做出的動物模型表現的“ 證” 基本符合中醫臨床實際,能較好地反映中醫病因病機理論的重點。

      2.2 重復性好,較好再現所研究人類疾病 理想的動物模型應是規范化的,能夠準確地重復再現。建立疾病動物模型的最終目的是為了研究探求防治人類疾病的規律,無論復制何種病理動物模型,其表現和體證與中醫證的臨床表現特征大體一致。因此,對疾病動物模型的評估主要取決于模型與人類疾病的相似或可比程度。一個理想的疾病動物模型應能再現所要研究的人類疾病,即動物疾病表現與人類疾病相似。

      2.3 簡單易行,造模時間較短 復制的動物模型應力求可靠地反映人類疾病,即可特異性地反映某種疾病或某種功能、代謝與結構變化。動物模型應具備某種疾病的主要癥狀和體征,還應考慮到今后的臨床應用和便于控制其疾病發展,以利于進行研究。故要求模型復制方法簡單易行,實驗設計力求以急性實驗為主,縮短造模時間,一般應選小動物復制人類疾病模型。

      2.4 觀察指標具有直觀性與客觀性 動物模型的觀測指標力求客觀性、直觀性及重復性,既能如實反映實驗所提問題的特征變化,又便于操作。如把小鼠的體溫、心率、活動度、精神表現、眼球的凹凸、耳廓色澤、游泳時間作為“陽證”、“陰證”的觀測指標,兩者呈鮮明的對比,形象地顯示了“陽”與“陰”的特征。

      3 中醫動物模型應用中存在的問題

      3.1 動物模型很難用“四診”方法加以判別 在病人身上通過望、聞、問、切可以得到完整的四診資料,做出較為準確的診斷辨證,但是對復制動物模型要想得到詳盡的四診資料困難較大,動物既無主訴,又無法通過脈診、舌診來給動物辨證。例如陽虛、氣虛和寒證的造模動物都可出現進食減少、大便溏、耐寒力低等現象,因此單憑這些癥狀、體征較難判斷此模型屬何證。應加強對中醫“證”動物模型本質的研究,制定出動物模型的各項定量、半定量客觀指標。

      3.2 造模因素選擇缺少標準 目前有關造模的因素很多,究竟哪種造模因素比較符合臨床實際,能造出較為典型的中醫證型,目前還有待于進一步研究。

      3.3 照搬西醫動物模型 未能以中醫理論為依據,單純把西醫疾病模型當成中醫證的模型,中醫的證候不完全等同于西醫疾病的癥狀,臨床上??梢钥吹酵环N西醫疾病,中醫可能診斷為多種證候,而對不同的西醫疾病,中醫也可能診治方法完全相同,所以要研究中醫、發展中醫,不能完全照搬西醫動物模型,應根據中醫特點,復制體現中醫藥特色的動物模型,但這并不排除運用西醫現代科學技術對中醫藥進行深人細致的研究。

      隨著現代醫學的發展,實驗研究越來越受到人們的重視。經過近幾十年的不懈努力,我國目前已建立中醫動物模型150余種,這僅僅是初步的探索,還有待于進一步研究。中醫藥只有通過大量實驗研究,借用現代先進技術和方法,才能使中醫藥逐漸發揚光大,逐步走向世界,為人類健康事業做出更大貢獻。

      參考文獻

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      [2] 馬超英主編.實驗中醫學基礎,北京.中國協和醫科大學出版社,2000

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